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文檔簡介
種子生產與經營專業種子健康測定細菌和病毒測定方法一、種子健康細菌測定1、生長植株鑒定最簡單的方法是種植有種傳細菌的種子,鑒定幼苗的癥狀。一、種子健康細菌測定2、實驗室方法(1)病原菌提取
提取方法主要有通過浸泡種子和通過磨碎或破碎種子并在液體中浸濕兩種方法。種子數量和方法應根據試驗確定。(2)分離
通過瓊脂皿可以將病原細菌從提取后的溶液中分離出來,將提取液原液或者稀釋液涂在瓊脂皿上,可以分生出單個或者許多菌落。(3)細菌檢測方法
生物化學檢測法、血清檢測、噬菌體檢測、致病體核酸雜交探針法。一、種子健康細菌測定種子內部帶菌檢測種子外部帶菌檢測一、種子健康細菌測定植物病樣/種子樣品核酸序列測序比對PCR擴增病原物DNA提取病原物分離與純化確定病原物分類地位形態學觀測宏觀:菌落顯微:菌絲/孢子種子帶菌率/分離頻率/孢子負荷量一、種子健康細菌測定分離物純化PCR檢測Blast比對二、種子健康病毒測定
1、田間種植鑒定
(1)將樣品種植播種后,觀察幼苗的癥狀(2)將種子或幼苗的提取液接種至“指示植物”上,更易觀察和鑒定癥狀。二、種子健康病毒測定2、室內檢測(1)常用的方法有酶聯免疫吸附法、免疫吸附電鏡技術和多克隆抗體或非常專一的單克隆抗體技術。(2)隨著分子生物學技術的發展,利用PCR的分子檢測技術有望成為未來快速而準確的種傳病毒檢測方法。二、種子健康病毒測定核酸/蛋白分析DNA/RNA/蛋白提取;PCR擴增;測序比對;定性定量分析病毒檢測/鑒
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