聚酰胺的使用方法第1頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四產品介紹質量指標：分子量：14000～17000比表面：5～10m2/gPH值:6~7產品價格：30~60目180元/KG60～100目240元/KG100目以上300元/KG溶解度：溶于濃鹽酸，甲酸，微溶于醋酸，苯酚等溶劑，不溶于水，甲醇，乙醇，丙酮，乙醚，氯仿和苯等常用有機溶劑，對堿較穩定，對酸的穩定性較差，尤其是無機酸，在溫度高時更敏感。第2頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四吸附原理聚酰胺是由酰胺鍵聚合形成的高分子化合物。其酰胺基可與羥基酚類，酸類，醌類，硝基等化合物以氫鍵形成結合而被吸附，其脂肪長鏈可作為分配層析的載體。聚酰胺在含水系統中層析時，聚酰胺作為非極性固定相，其層析行為反向柱層析；在非水溶劑系統時，聚酰胺作為分配層析的載體，其層析行為為正向柱層析。第3頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四應用范圍聚酰胺特別適應于多元酚類化合物的分離，如黃酮、醌類、酚酸、含羰基化合物、羧基化合物等。例如：葛根素中提取葛根黃酮、茶葉提取茶多酚、人參中提取人參皂苷、銀杏葉中提取銀杏黃酮、甘草中提取甘草皂苷、甜葉菊中提取甜菊苷、發酵液中提取維生素和抗生素等成份對鞣質吸附強，用于將植物粗提物中的鞣質除去。第4頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四前處理新買的聚酰胺取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡，不斷攪拌，除去氣泡后裝入柱中。用3-4倍體積的90-95%乙醇洗脫，洗至洗脫液透明并在蒸干后無殘渣（或極少殘渣）。再依次用2-2.5倍體積5%NaOH水溶液、1倍體積的蒸餾水、2-2.5倍體積的10%醋酸水溶液洗脫，最后用蒸餾水洗脫至pH中性，備用。

第5頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四前處理用過的聚酰胺一般用5%NaOH水溶液洗脫，洗至NaOH水溶液顏色極淡為止。有時因某些鞣質與聚酰胺又不可逆吸附，用NaOH水溶液很難洗脫，可用5%NaOH在柱中浸泡，每天將柱中的NaOH水溶液放出一次，并加入新的5%NaOH水溶液，這樣浸泡一周后，鞣質可基本洗脫完。然后用蒸餾水洗脫至pH8-9，再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脫，最后蒸餾水洗脫至pH中性，重復使用。第6頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四聚酰胺吸附法的操作1、裝柱：一般將顆粒狀聚酰胺混懸于水中，使其充分膨脹，然后裝柱，讓聚酰胺自由沉降；當用非極性溶劑系統時候，則用組分中低級性的溶劑裝柱。

2、稀釋適當濃度上樣：一般每100ml聚酰胺上樣1.5-2.5g，樣品先用洗脫溶劑溶解，濃度為20%-30%。水溶性化合物直接上樣；若提取物水溶性不好，則用揮發性有機溶媒溶解、拌適量聚酰胺、揮干或減壓蒸干、干法裝入柱頂。3、水洗：先用水洗脫。

第7頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四聚酰胺吸附法的操作4、醇洗：在水中遞增乙醇濃度至濃乙醇溶液，或氯仿、氯仿-甲醇，遞增甲醇至純甲醇洗脫。若仍有物質未被洗脫，可用稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脫，分段收集。

5、找到最佳吸附比：先小量試驗找到最佳吸附比。

6、放大：根據小試及最佳吸附比進行放大試驗。

7、聚酰胺的回收：使用過的聚酰胺一般用5%氫氧化鈉溶液洗滌，然后水洗，再用10%醋酸液洗，然后用蒸餾水洗至中性，即可。

第8頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四黃酮類化合物的分離對于分離黃酮類化合物來說，聚酰胺是較理想的吸附劑。其吸附強度主要取決于黃酮類化合物分子中的羥基數目與位置。一般有以下規律：

1、苷元相同，連接糖越多，吸附力越大，流出越慢。

2、母核上增加羥基，洗脫速度相應減緩。

3、對位、間位酚羥基使吸附能力〉鄰位酚羥基。

4、不同類型的黃酮的流出順序一般是：異黃酮〉二氫黃酮醇〉黃酮〉黃酮醇。

5、分子中芳香核、共軛雙鍵多者則吸附力強，晚出柱。

6、若形成分子內氫鍵則吸附力減弱。第9頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四聚酰胺柱層析的溶劑洗脫系統含水系統洗脫能力：堿液>甲醇>水溶劑洗脫能力與溶劑極性相關可使化合物得到較好的分離。選擇系統時，可以將樣品加入上述溶劑系統中，觀察樣品在聚酰胺薄膜的層析行為，然后確定溶劑系統。含水溶劑系統非水溶劑系統甲醇-水（4：1）乙醇-水（2：1）甲醇-乙酸-水（90：5：5）氯仿-甲醇（94：6）苯-甲醇（3：1/7：3）第10頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四聚酰胺薄膜色譜常用的溶劑系統黃酮體苷元黃酮體苷氯仿-甲醇（94:6/96:4）氯仿-甲醇-丁酮（12:2:1）苯-甲醇-丁酮（90:6:4/84:8:8）氯仿-甲醇-甲酸（60:38:2）氯仿-甲醇-吡啶（70:22:8）氯仿-甲醇-甲酸（60:38:2）甲醇-醋酸-水（90：5：5）甲酸-水（4：1）；乙醇（4:1）丙酮-水（1:1）；異丙醇-水（3:2）30-60%醋酸；氯仿-甲醇-丁酮（64：25；10）乙酸乙酯-95%乙醇（6:4）氯仿-甲醇（7:3）；正丁醇-乙醇-水（1：4:5）第11頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四聚酰胺薄膜色譜常用的溶劑系統酚類丙酮-水（1：1）苯-甲醇-醋酸（45：8:4）；環己烷-醋酸（93：7）；10%醋酸醌類丙酮-水（1：1）；正己烷-苯-醋酸（45:8:4）；石油醚-苯-醋酸（10：10：5）糖類丙酮-水（1：1）苯-甲醇-醋酸（45：8:4）；環己烷-醋酸（93：7）；10%醋酸氨基酸衍生物苯-乙醇（8：2/9：1）；50%醋酸；甲酸-水（1.5：100/1:1）乙酸乙酯-甲醇-醋酸（20：1：1）；0.05mol/L磷酸鈉-乙醇（3：1）第12頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四聚酰胺薄膜色譜常用的溶劑系統生物堿環己烷-乙酸乙酯-正丙醇-二甲基胺（30：2.5：0.9：0.1）；水-乙醇-二甲基胺（88：12：0.1）甾體、萜類己烷-丙酮（4：1）；氯仿-丙酮（4：1）甾體苷甲醇-水-甲酸（60：35：5）；乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸（50:20:25：5）第13頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四聚酰胺與大孔樹脂的區別吸附原理不同：大孔樹脂是物理吸附原理；聚酰胺是化學吸附原理，氫鍵吸附，用于酚類、黃酮類、醌類成分的分離。大孔樹脂的分離效果沒有聚酰胺好。若是粗粉可以用大孔樹脂進行分段，聚酰胺可用于黃酮類成分的細分或純化。聚酰胺樹脂可以使用其干柱層析功能，在分離黃酮的過程中作用也是很大的，而大孔樹脂則沒有此功能。第14頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四聚酰胺與大孔樹脂的區別聚酰胺樹脂可以首先用聚酰胺薄膜展開系統，而大孔樹脂沒有薄層樹脂進行新藥研發，其新藥若用大孔樹脂制備，必須有打孔的殘留檢查，而聚酰胺目前還沒有正式的文件要檢查其殘留聚酰胺上樣時，其樣品中的鞣質會對主子產生死吸附，大孔出現這種現象很少大孔的可選擇類型比聚酰胺多，而且還增加了許多鍵合類型，如ASD型，其鍵合了酰胺鍵，增加了其選擇性。第15頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四聚酰胺的不足及解決方案聚酰胺柱層析的