專題3胚胎工程體外受精和早期胚胎培養(yǎng)課題2新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第1頁國產(chǎn)奶牛：年均產(chǎn)奶量3000千克左右國際良種奶牛：年均產(chǎn)奶量10000千克左右我國蒙古黃牛：均重300Kg海福特肉用牛：2歲體重可達(dá)800Kg存在問題：1.引進(jìn)一頭良種成年奶牛需要3萬－5萬元2.牛生育率低，一頭牛一胎只一個，一生只能生育四五次新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第2頁牛生育率即使很低，不過牛卵母細(xì)胞卻相當(dāng)多，其卵巢中卵母細(xì)胞數(shù)目要比一生中排卵數(shù)多1000倍左右公牛產(chǎn)生精子數(shù)目就更多了偉大構(gòu)想誕生了新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第3頁(1)概念：經(jīng)過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)過移植產(chǎn)生后代技術(shù)(2)過程移植卵子受精卵早期胚胎子宮精子個體試管動物技術(shù)新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第4頁從試管牛說起實現(xiàn)良種牛快速大量繁殖首先要做是（體外受精）和（早期胚胎）培養(yǎng)體外受精：采取雌性動物（卵細(xì)胞）和雄性動物（精子），使其在（試管）中受精。注：但發(fā)育主要場所是（母體）新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第5頁試管動物克隆動物生殖方式技術(shù)伎倆遺傳規(guī)律1.思索一下，試管動物和克隆動物比較？有性生殖無性生殖體外受精、胚胎移植核移植技術(shù)、胚胎移植遵照不遵照新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第6頁步驟1、卵母細(xì)胞采集和培養(yǎng)2、精子采集和獲能3、受精二、體外受精：新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第7頁用促性腺激素處理，使其排出更多卵子，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能精子在體外受精。對不一樣動物,采取卵母細(xì)胞方法不一樣新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第8頁不一樣動物,采集卵母細(xì)胞方法不一樣：試驗動物如小鼠、兔，以及家畜豬、羊等卵細(xì)胞采集：

Ⅰ最慣用方法是卵巢經(jīng)過

處理。詳細(xì)做法是給供體注射

，使一頭母畜一次排出比自然情況下多幾倍到十幾倍卵子，之后從

中沖取卵子，直接與獲能精子在體外受精。超數(shù)排卵促性腺激素輸卵管新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第9頁大家畜或大型動物，如牛，卵細(xì)胞采集：

Ⅱ從屠宰場已屠宰母畜

中采集卵母細(xì)胞；

Ⅲ也能夠借助

、

或

等工具確定卵泡位置，直接從活體動物中吸收泡卵液（連同卵母細(xì)胞）取出。卵巢超聲波(B超)探測儀內(nèi)窺鏡腹腔鏡注意：后兩種方法采集卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)成熟后才能與獲能精子受精。新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第10頁活體采集牛卵母細(xì)胞新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第11頁超聲波探測儀新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第12頁新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第13頁卵母細(xì)胞成熟培養(yǎng)：CO2培養(yǎng)箱新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第14頁培養(yǎng)箱新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第15頁1.不一樣方法采集卵母細(xì)胞成熟程度相同嗎？能不能直接用于體外受精？為何？不一樣初級卵母細(xì)胞，體外培養(yǎng)至MII中期不能。2.怎樣讓雌性動物排出更多卵細(xì)胞？超數(shù)排卵，給供體注射促性腺激素。新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第16頁精子搜集和獲能搜集精子方法有：假陰道法手握法電刺激法新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第17頁受精獲能精子和培養(yǎng)成熟卵子，普通情況下在或中完成受精過程。獲能溶液專用受精溶液新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第18頁獲能精子＋成熟卵子（MII）

受精卵獲能液或受精液胚胎發(fā)育培養(yǎng)液新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第19頁三、胚胎早期培養(yǎng)培養(yǎng)液成份：有機(jī)鹽、無機(jī)鹽、激素、維生素、氨基酸、核苷酸、血清等新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第20頁培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時，可將其取出向受體移植或冷動保留。不一樣動物胚胎移植時間不一樣桑椹胚階段：牛、羊8個或16細(xì)胞胚階段：小鼠、家兔4個細(xì)胞胚階段：試管嬰兒檢驗受精情況和受精卵發(fā)育能力。目標(biāo)：新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第21頁1.以牛為例，從屠宰場搜集卵巢中卵母細(xì)胞進(jìn)行體外受精應(yīng)用效果怎樣？當(dāng)前，從屠宰場廢棄卵巢中，每個卵巢平均可采集10枚左右可用卵母細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)成熟和受精后約可獲4枚可用胚胎，經(jīng)過移植給受體母牛，最終可得到1～2頭犢牛。牛體外受精胚胎工廠化生產(chǎn)已在一些發(fā)達(dá)國家開展。新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第22頁新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第23頁采集良種母牛卵母細(xì)胞采集良種公牛精子卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠采集卵巢中卵母細(xì)胞市場“試管牛”工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)流程圖胚胎移植新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第24頁小結(jié)：試管牛工廠化生產(chǎn)技術(shù)流程（）（包含卵細(xì)胞采集、精子獲能、受精等步驟）（）（）（）良種牛犢成熟期牛例題1

從澳大利亞和新西蘭引進(jìn)一流良種無角道賽特肉用綿羊和布爾肉用山羊，能否設(shè)計一個快速繁殖子代個體，而又大大縮短良種本身周期方法？簡述其詳細(xì)過程。體外受精早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植代孕母牛新版體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專家講座第25頁能。分別取賽特肉用綿羊和布爾肉用山羊卵母細(xì)胞和精子，然后做以下處理：卵母細(xì)胞培養(yǎng)成熟