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文檔簡介
1
1.2
3
9
15
4
10
16
5
11
17
6
12
18
7
13
19
8
14
20.
1.
2.
3.
4.
5.
N
C
nm
6.
7.
8.
=2.34
a-COOH
9
10.
11.
-
12.a-
pH=pl
PK=9.69
a-NH3
，
1965
pl=
%
pHpl
PK
pH=7
N-SDS
SDS
13
14
15
16.
17
18
-Ala-Phe-Tyr-Ala-Arg-Ser-Glu--Lys-Glu-Arg-Gln-His-Ala-Ala--Gln-Cys-Leu-Ala-Ser-Cys-Ala-
1-Gly-Leu-Ser-Pro-Ala-Phe-Val-
2
3
4
pH=7280nm
a
-
19.Paulinga-
100
20
21.a-22.
23.
2
-XC.
-XD.X-
C
C
D
A
B
D
C
24.
25.
26.
27.GSH
10
28.
29.a-B-
a
110
-
22000
3-
nm,3-
nm
30.
DD..
:
1A.-XBX
B
.
:
2.
A.3.
A.
4
.
a
B.
.
:D.D
D
.
.
B.C.
.
Sepharose4B
:
.
5
A.
.
Ala
N
C.
6.
Pro-Ala-Phe-Arg-Ser
:
A.FDNBB.PITCC.
:
7.
A.DNAB.RNAC.
pH7.2
8.
pH13
:
.
A.B.
D
.
B
B
10
A.11
B.
C.D.
A.
13.
A.
B.
C
.
D.
14.
PheB.ProC.GluD.Met
pH
A
.
3
B
.
4
DpHD.Glu
15
ABC.D.
16SDS
A.B.C.D.
17
A.BD.
18
A.LysB.AsnC.Gln
19
A.GlyB.ProC.TrpD.Try20
A.OrnB.CitC.Pro()D.HyPro
21D.A.B.C.a+b
22.A.
B.C.DNFBD.PITC
23.
C
.
A.a-B.C.D.
24
A.B.C.D.
25
A.3B.4C.5D.6
26B-
A.3-
B
.
C.3-
D.3-3-
27.
A.B.C.D.
28.a-
A.2.610B.3.613C.4.015D.4.41629.
A.B.C.D.
30.
A.
B.
C.
D.
31.
A.
B.
C.
D.
5
32.a
A
.
B
D
a
a
02
C02
B
.
02
C.a
3
3
02
02
02
02
Da
.
33.
A
.
.
.
C.S-
34
A.
B.
C.
D.
35
A
.
B.C.SDSD.
a
36
-
A
B
.
.
C
.
D
.
37
5000400000
A
.
C13370
B
.
400000
C.
D.
247500
68500
1.
SDS
2.
3.
4.
pHpH
5.
6.
7.
8.
a-NH2
pH
pHpI
-
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
-
17.
18.
19.
20.
21.
7.0
22.
23.
6
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.pl-COOH-NH2
35.-C=O
36.
1.?2.
280nmPaulyCNBr
3.Asp1SeriGlylAlaiMet1PhelIys2
FDNBDNP-AIa
CTAspiGlylLys1
Met1FDNBDNP-GIy
TLys1AlaiSeriPhelLys1Glyl
CNBr
4.
5.
24
6.
7.
Gly2Phe2TyriMetiAspiArgiProiCT
PheiTyriGlyiProiCNBr
ArgiPheiGlyi
TPheFDNBDNP-Tyr
Ala-Pro-lys-Arg-Val-Tyr-Glu-Pro-Gly
iAB23
FDNB45
2000
8.
9.
iO
11.
12.
13.
14.
-SH
Rnase
WhiteAnfinsen
-Pro-Phe-Cys-Lys-Tyr-Val-Ala-Ser-His-
7
15.
PTH-Ser
Ala
Ala
Cys
Lys
N-
SerPhe
Cys
16.PKa-COOH=2.34,PKa-NH3=9.69PKa-COOH=2.19,PKa-NH3=9.67PKR-COOH=4.25
17.SerIleGluAla
18.a-B-240Kda5.06x10-5cma-
19.pH7
ValProPheAspLysIleHis
SerThrAsnGln
20.a-
1.
2.
D-L-
3.
4.
-N
5.
CC
-
a
-
pH
pH
C
a
CN
a
a
-
C-CO-NH-C
aaaa
C
a
C-C
C
a
9
6.
a
-
7.
a
-
8.
9.
10.
aa
11.
B-B-
(BBB)(BaB)
3a3a3BCB)
12
BCB
C
12.pH
pH
8
13.
14.:
15.
16.
17.
18.
19.
20.
:
:
:
:
:
:
S
1.24
2.aaBap
3.
4.
5.
6.16%
7.
/FDNB
BBB
AspGIu
/PITC
/DNS-CI
280
ArgLysHis
8.
9.
10.
11.20
12.
13.Cys
14.
15.
16.Lys
6.02
N-HC=OH0
GIy
Arg
17.
18.
4nm0.15nm
20
21
22
23EdmanPITCPTC-aaPTH-aa
24．a-B-B-
25
26
27aa
28SangerSanger30293072
30NHSONaClNaSO42424
1.A2.B3.C4.C5.C6.B7.D8.A
11.12.B13.C14.B15.A16.D17.DC
21
9.
A18.
D
10.B
19.B20.C
9
27.D
37.B
21.1.D
22.A23.D24.A25.D26.C
32.B33.C34.D35.D36.D
1.2.3.
11.12.
22.23.
32.33.
13.
34.
4.
2
4
514.
35.
.6.15.
25.
36.
28.29.D30.B
B
7.
16.
26.
8
.17.
2
7.
9.
28
.
10.
18.
29.
19.
20.30.
21.31.
1.2a2B4
23-
2.---
3.NAlaCGly-Lys-Met-AspNAla-Ser-LysPhe-Gly-LysCNBr
Met-Asp
CAla-Ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Met-Asp
TJCTJT；
Ala-Ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Met-Asp
DNP-AlaDNP-Gly
4.Tyr-Pro-Gly-Phe-Asp-Met-Gly-Arg-PheCTJCNBrJTJ
Tyr-Pro-Gly-Phe-Asp-Met-Gly-Arg-Phe
DNP-Tyr
ProPro-Gly
Gly-Pro
5.2
FDNB
NAla
Lys
AlaProLys
ArgArg
Tyr
C
6.
7.
FDNB
Gly
1
Val
N
184-188
Glu
S
4
SDS
pHpH
10
23
HPLC
8
pH
9
10
11
12.
H-N
3.6
13
3n+4
n=3
a
-
a-
a-
N-H
a-
2
C=O
C=0…a-
a
-
13a-
3.6
13
n=2
3.0
io
3.6
13
13.
3
14.
2
B
-
N
-
15.A
PTH-SerC
C
AlaCysLysSer
D
Phe
B
Ser-Lys-Cys-Phe-Ala
PK+PK
12
16.
pI=0.5
17.
Cys-Phe-Ala;
AlapI=6.02
Ser-Lys;
GlupI=3.22
Glu>Ser>Ala>IleGlu>Ser>Ala>Ile
18.
240000Da
240000/120=2000Xa-
XX0.15+(2000-X)X0.36=5.06X10-5X107nm=506nmX=1019a-
0.15=152.9nma-152.9/506=30.22%
19VaiProPhelie
120Da
1019X
AspLys
1
His
SerThrAsnGinpH
12
20
21
a
-
a-
a-
B
-
N
-
C
I.2.3.4.DNA5.
.10.DNATm
II.(9)12.13.SnRNA1415.16.
17.H-DNAtsDNA18.19.
1.()()2.DNARNA
RNA(
3RNA()
()
4.
5.
()
6.(
DNA
DNA())()RNA()DNA
()()
()
()
)O
()()
()
)(DNA)(
RNA
()()
()
)
7.
8.
-
()
9.
()
10.
()
11.
12.
()
13.DNA
14.
15.tRNA()()
16.tRNA
17.
(
+DNA
()
DNAA30
DNA
B
(O
DNA5
(
5
tR)NA
()
mRNA
))(
A21%
DNA
(),
(
(
T
)
(
)
((
)
)
()(
(
)
(
)
G9%T21%RNA
)
C
)
)
(
(
)
()(
)
DNA
(
C29%
-
(
(
(
T
G=24%
A+G(
(
T+C
C()
A=30%
))nm
()
)nm
)nm
(
DNA(
)
(
3
(
)()
()
)
(
13
18.
()
19.
20.DNA
()
21.
22.DNA
23.DNA
()
95
24.
25.pH26.1944Auery27.
28.B-DNA
29.
30.
31.DNA
32.DNA
33.
()
RNA
(
)
()
(
G)
0.14MnaCl
1MnaCl(
()
DNA(
aB
DNA
A260/A280
()nm
()
((C)
()
260nm
SDS
)
()
(
)
(
()(
()O
(
Z-D)NA
a
DNA
DNA
bp
A260/A280
RNA
A260/A280
DNA
)
(
)
)
1.()
A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.DNA
2.DNA()
A.A=TG=CB.A+T=C+GC.G+C>A+T
D.G+C<A+T
3.DNATm()
A.(G+C)=25B.(A+T)=
25
C.(G+C)=604.G-.(A+T)=55
Tm
A.G-CB.G-C
C.G-CD.G-C
5.()()
B.C-CC.N-ND.
A.C-N
6mRNAm7G5
A.2-5B.3-5C.3-3D.5-5
7.Tm()
A.DNAB.C-GC.D.
8.tRNA)
(
A.RNAB.tRNA
C.RNAD.tRNA()3CCA
9.DNA
17.
B.TmDNA
C.DNA
D.DNATm
10DNA()17.
B
.
C.DNA
D.DNAchargaffX
14
11.mRNADNA()
A.B.C.D.
1230SrRNA()
A.23SrRNAB.18SrRNAC.5SrRNAD.16SrRNA
13.()
A.B.C.
14DNAACCTTAGA
A.TGGAATCTB.AGATTCCAC.TCTAAGGTD.ACCTTAGA
15.DNA
A.B.C.D.
16.
A.DNATmB.
C.D.
D
.
()
A.
C.
17.
A.25-
C.35-
18.tRNA
3--CCA
5--CCA
19.Watson-CrickDNA
B.
D.
A.
C.
20.5-CpGpGpTpAp-3A.5-GpCpp5Ap-3C.5-UpApp5CpGp-3
21.RNADNA
A.B.C.
22.mRNA
17.mRNA
B.mRNA
C.mRNA5
D.mRNA3
23.pH3.5
A.AMPB.GMPC.CMP
24.
A.B.
C
.
25.RNAUgmICm6A
A.2B.3C.4D.
5
B.
D.
B
.
D.5--CCA
AG
DNARNA
-GpCpCpApUp-3
-TpApCpCpGp-3
D
.
PolyA
PolyA
D.UMP
D.
17.DNA
2.
3.DNA4.
5.RNA
6.rRNA
7.
3
mRNA3
RNA
mRNA
RNA
DNA
mRNA
polyA
A(polyA
DNA
A-UG-C
mRNA
15
8.
9.DNA
10.
11.DNA
12.DNARNA
13.DNAA+T/G+C
14.DNAG+C%G+C%
15.DNANaCI12M
16.DNAOD260/OD2801.8
17.DNA,RNADNARNA
18.5-
19.DNAB
20.mRNAmRNA
21.G-CTm
22.DNA
23.
17.??
2.DNARNA,3.
4.
5.Chargaff?
6.DNA(B)?DNA
7.RNA?RNA?
8.RNADNA?
9.DNATm？
10.tRNA?
11.DNA？DNA
12.DNA？？？
13.DNA2.8x109670DNA？？？
14.
A32P-G32P-GACTCTG32p-GACTCTGAGC
G32P-GACTCT32P-GACTCTGA
C32P-GA32P-GACT32P-GACTCTGAGT32P-GAC32P-GACTC
15.DNA15.1%
16.DNA32%17%
DNA64C)
17.
16
6.
5.
4.
3.
9.
pH10.
12.
19.()
27.
11.
17.
18.
22.
25.
26.
1.2.
7.13.
20.28.
31.
8.
14.
21.
29.
32.
15.16.
23.24.
30.
33.34.35.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
EC2
15.Km
17
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
()
27.
28.
29.
26.
18
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.1
37.
1.
A.
B.
C.
D.
2.
A.
B.
C.
D.
3.
A.
B.
C.
D.
4.
A.
B.
C.
D.
5.
A.
B.
C.
D.
6.
A.
B.
C.
D.
7.
A.
B.
C.
D.
8.
A.
B.
kmKm
V[S]
Km
ES
Km
Km
Km
K"
ES
l/Vmax
Km
ES
1/V1/[S]
Km
19
C.
D.
9.
A.
B.
C.
D.
10.
A.
B.
C.
D.
11.
A.
B.
C.
D.
12.
A.
B.
C.
D.
1/V1/S
RT
T
RT
TR
R
20
13.
A.KmUmaxB.KmUmax
C.KmVmaxD.KmVmax
14.[ES]?
A.B.C.D.15.
A.B.Km
16.C.KmVmaxKmD.VmaxKm
A.B.
1
.[S]=Km
1
8
A.
B.
C.
D.
19.
A.
20.
A.
C.
21.
D.V=1/3Vmax
Km[S]
C.V=l/2Vma
x75%
C.[S]=3KmD.[S]=4Km
B.[S]=2Km
D.0.5V
U
[S]=4Km
Vmax
B.0.8VmaxC.3/4Vmaxmax
B
.
D
.
:
C.
24.
A
.
22.
A.
B.
C.
D.
23.
A
.
pH
Km
B.
D.
pH
D
.
C
.
B
.
A.Km=4.3X1O-3
C.Km=2.3X1O-3
25.
A.
B.
C.
D.
26.
A.
C.
27.
A
.
C.
28.
B.Km=3.5Xl0-3D.Km=4.1XlO-3
B
.
D
.
B.
D.
pH
B
.
21
A
.
2
C.D.[ES]
29.u-[S]SA.
B.
C.
D.
30.16-D.
A.B.C.31.
A.
B.
C.()
D.
32.
A.
B.
C.
D.
33.pH
A.pH
B.pH
C.pH
D.pHB.
C.D.
35.
B
.
D
.
B.K3>>>K2Km=KS
C.KmKSESD.KSES
37.SerAspHis
A.HisB.Asp
C.SerD.Ser
38.(ATCase)
A.X-
B.Western
C.D.
39.TRA.
TTB.
C.RD.RT40.
A.B.C.D.
34.
A
.
41.1/2Km
A.0.25VmaxB.0.33VmaxC.0.50VmaxD.0.67Vmax
42.
A.B.
C.D.
23
5.1)
6.
1.
2.
3.
4.Km
5.KmUl/2Umax
6.Umax7.
8.Km
9.
10.
11.
12.Km
13.
14.
15.ATP
16.
17.Km
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.NADNADP25.
26.
27.Km28.
29.Km
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.ES
37.KmUmax38.
39.
40.
1.
2.
3.
4.
？
？
2)
？
Km?
：
？？
V-[S]
Km
24
-
1-
？
？
ES？
？
A
？
25ml
25mg
l
23.
1500g
g
1
C
7.？
8.？9.
：
[S]mol/LV(mol/min)
2mmol100mmol
3
5
10
30
90
4.1
6.4
11.3
22.6
33.8
10.4
14.5
2.12.9
4.5
6.8
8.1
22.5
33.8
40.5
？
Km
Km
？
2mmol
？
?EI
？
?EI
Km
1OOmmo
？
？
Km
10
11.
？
？
12.
13.
HOH?
+
？
？
？
14.
1
5
1000
？
(
0
25
15.16.18.
19.20.
21.
22.
1
？
？180
？
1/11
0.1ml
2ml
m1
180
(His57)
？
X-Pro-
Ki=0.001
Folin-
02mg,
l
1.
2.
3.
4.
=
+
25
5.
6.
7.
8.
9.
pH10.11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
pH
pH
-pH
pH
U)
25C,
1min
1mol
1
pH,
mol
mol
1mol
mol
katalkat
kat
lkatmol
:
lmol
kat(nkat)kat(pkat)
；
25Co
Ipkat
;
Km
;
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
S
29.
30.
3
Umax=KEt]
[5]
[5]
;
:
S
26
(K3)=Vmax/[Et]
31.
32.
33.
;
34.
35.
1.
2.：AH+B==A
2
3.L-a-4.
5.(
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.v=Vmax[S]/(Km+[S])
13.ATRCTR
BH,NADNADRFADFMN
ATR
)()
14.
15.
16.//
17.RNADNA
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.Asp102His57Sew35.
36.
37.S
1.A2.B3.C4.D5.A6.D7.B8.B9.
7.CC.D7.C8.BADCCCC
10.
1.
2
D
20.
0.
B
27
31.
1.
B
1.
11.
21.
31.
32.33.2.D
B
2.3.
12.
22.
32.
1.
2.
-
3.
4.
34.35.
DD
4.
13.
23.
33.
1
2
4.
34.
4.
：
：1958
36.37.A38.39.40.ABBC
5.
35.36.
9.10.
18.19.
28.29.
39.40.;
8.
1
7.
20
3.0
7.
16.
2
7.
38.
.
26.
37.
;
EmilFisher
AOgster:
;
：
Koshland
：
pH
pH
pH
pH
pH-
o
5.
6.V-[S]
Km
KmVmax
Km
28
：
1/V=Km/Vmax*[S]+1/Vmax
1/[S]
l/V
l/Km
(l/Vmax)
29
：
KmVmax
7.
b
a
b
b
b
14
a
ATP
8.
DL-
9.KmVmax
mol)
1/[S](
1/v(mol/min)
2mmol
100mmol
3.3
2
10.33
0.111)
2)
0.24
0.17
0.0080.044
0.03
0.48
0.34
r0.22
0.15
0.12
47.6mol/min
0.096
0.069
0.0445
0.033
0.025
KmI.IXIO-5mol/LVmax
3.1XIO
2mmolKm'_5moI/LVmax47.6mol/min
(KmVmax):
1
[1]/Ki=Km'/Km=3.1XIO/1.IXIO=2.8
[l]
3)
/Ki=1.4Ki=1.4X03moI/L
_
1OOmmo
Km'=1.IXIO5moI/LVmax=9.5
_
mol/min
(Km
Vmax
1+[l]/Ki=Umax/Umax'=47.6/9.5=5.01[I]/Ki=4.01
Ki=2.5XIOm_4ol/L
10.
11.Km
12.
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