2023/3/211實訓九菌種移接2023/3/212一、實驗目的熟悉各種接種工具的使用；掌握菌種移接的基本方法；熟練掌握無菌操作技術。二、實驗原理無菌技術：指在微生物實驗工作中，控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關措施。接種：將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程。2023/3/213三、實訓材料和用具

超凈工作臺、接種工具、斜面培養基、酒精燈、酒精棉球、菌種、火柴、肥皂、標簽紙等2023/3/214四、操作步驟：（一）常用接種工具的介紹1.接種針2.接種鉤3.接種耙4.接種環5.接種圈6.玻璃涂棒正面觀7.玻璃涂棒側面觀注意：不同菌種的移接和不同的培養目的，需選用不同的接種工具。

2023/3/215（二）接種前的準備工作1.微生物的無菌接種技術要點：防止污染，嚴格的無菌操作。實驗室：在超凈工作臺上進行。必須進行嚴格的消毒處理。用酒精棉球擦凈超凈工作臺臺面將接種管、酒精燈、接種工具等用品放在臺面于接種之前打開超凈工作臺紫外燈消毒30min，同時打開風機接種時必須關閉紫外燈2023/3/2162.將接種管貼上標簽，注明菌種名稱、接種日期、接種人姓名等，標簽應貼在接種管斜面的背面。3.操作者用肥皂洗手，晾干后用酒精棉球將手、菌種管擦拭消毒。2023/3/217主要講述斜面接種

※斜面接種：

從已生長好的菌種斜面上挑取少量菌種移植至另一新鮮斜面培養基上的接種方法。

流程：

點燃酒精燈→手持試管→環滅菌→拔棉塞→灼燒接種環→環冷卻→取菌→接種→塞棉塞→環滅菌→培養

注意：除“培養”外此所有步驟均在超凈工作臺內進行。（三）菌種移接的基本方法2023/3/2181、點燃酒精燈。2、手持試管取一菌種管和接種管，置左手食指、中指、無名指間，拇指壓住兩管底部上側面，使菌種管位于外側，培養基管位于內側。將斜面向上，盡量放平。3、接種環灼燒滅菌右手持接種環，先垂直后水平將環部燒至紅熱，其余部分再在火焰上慢慢來回通過2～3次。手持試管和接種環灼燒滅菌2023/3/2194、拔管塞：以右手小指與手掌，小指與無名指分別夾取棉塞（先外管后內管），將兩管口迅速通過火焰1～2次(切勿燒得過燙)。5、環滅菌：再灼燒接種環。2023/3/21106、取菌:接種環冷卻，輕沾取少量菌體或孢子，然后將接種環移出菌種管，注意不要使接種環碰到管壁，取出后帶菌接種環不可通過火焰。

2023/3/21117、接種:在火焰旁迅速將沾有菌種的接種環伸入待接斜面管。從斜面培養基底部向上作“Z”形來回密集劃線，勿劃破培養基。有時也可用接種針僅在斜面培養基的中央拉一條直線作斜面接種，直線接種可觀察不同菌種的生長特點。2023/3/21128、塞管塞：取出接種環，灼燒試管口，并在火焰旁將管塞旋上。不要用試管去迎棉塞，以免試管在移動時納入不潔空氣。9、將接種環灼燒滅菌。放下接種環，再將棉花塞旋緊。10、培養：斜面朝下置培養箱中培養。2023/3/2113溫馨提示1．接種人員在接種過程中盡量少說話，少走動。2．每接完一支菌種后接種工具都要灼燒。3．接種工具灼燒后要充分冷卻，防止燙傷菌體。4．接種要在酒精燈火焰無菌區進行。5．操作過程中雙手不要超出超凈工作臺邊緣，頭部不要探入工作臺內。

2023/3/2114斜面接種時的無菌操作

(1)

環滅菌

(2)開啟棉塞

(3)管口滅菌

(4)沾取菌苔

(5)接種

(6)塞好棉塞

演示202