血液具有維持生物體內環境穩態的作用，正常情況下血液中的的各項生理指標處于相對穩定的狀態，同時各項指標也能夠反映一個生物個體的健康程度，因而血液檢測已成為疾病檢測最基本的技術。多種多樣的血液檢測儀當前1頁，總共29頁。血液檢測能夠輔助疾病診斷當前2頁，總共29頁。

血涂片的顯微檢查是血液細胞學檢查的基本方法，也是生物顯微制片的基本方法之一，臨床上應用極為廣泛，特別是對于各種血液病的診斷具有重要的價值。制備厚薄適宜，分布均勻，染色良好的血涂片是血液學檢查的重要基本技術。人體血液涂片當前3頁，總共29頁。

血液涂片技術在水產動物疾病檢測過程中也有非常重要的作用，比如細菌感染、病毒感染以及血液寄生蟲疾病的檢測。目前該技術已成為水產技術從業人員的必備技能，也是執業資格考試的重點內容。當前4頁，總共29頁。當前5頁，總共29頁。當前6頁，總共29頁。

涂片經瑞氏-吉姆薩染色液染色后，相應各類細胞呈現不同的著色，從而達到辨別其形態特征的目的。一般細胞的細胞核嗜堿性，能被堿性燃料染成藍色，而細胞質基質嗜酸性，能被酸性燃料染成紅色。當前7頁，總共29頁。

血細胞計數法是將小量待測樣品血液的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上（又稱細胞計數板），于顯微鏡下直接計數，根據血液稀釋的倍數，進一步推算出血液中血細胞數的一種方法。當前8頁，總共29頁。當前9頁，總共29頁。當前10頁，總共29頁。當前11頁，總共29頁。魚類麻醉前后對比示意圖當前12頁，總共29頁。2、血液的采集將準備好的2mL注射器，抽動活塞用肝素鈉溶液將注射器內濕潤，為血液的采集做好準備工作。血液的采集按實驗2的采血方法進行，采好的血液保存于1.5mL離心管中待用。當前13頁，總共29頁。3、推片取一塊邊緣光滑的載片做推片。將其一端刮取血滴，迅速使血液均勻分散在推片與載片的接觸處。然后使推片與載片呈30°～40°，向另一端平穩地推出，涂片推好后，放置于空氣中使之自然干燥。（1）將采出的血液滴在載片上當前14頁，總共29頁。

（2）另一張邊緣光滑的雙凹片，斜置于血滴的前緣，先向后稍移動輕輕觸及血滴，使血液沿玻片端展開成線狀。當前15頁，總共29頁。

（3）兩玻片的角度以30-45°為宜，輕輕將雙凹片向前勻速推進，即涂成血液薄膜。當前16頁，總共29頁。（4）血涂片當前17頁，總共29頁。不良血涂片當前18頁，總共29頁。4、血涂片染色先將干燥血片用甲醇固定3-5分鐘，將固定的血片置于被pH6.4-6.8磷酸鹽緩沖液稀釋10-20倍的吉姆薩染液中，浸染5分鐘（標本較少可用滴染法），取出用蒸餾水沖洗，再用伊紅復染1分鐘，用蒸餾水沖洗，待干后鏡檢。當前19頁，總共29頁。沖洗后滴加少量伊紅，染色1分鐘直接流水沖洗1分鐘（切勿先倒掉染液）涂片經水洗干燥后鏡檢涂片干燥后加吉姆薩染液染色5分鐘當前20頁，總共29頁。二、血細胞計數血細胞計數板的結構XB-K-25為計數板的型號和規格，表示此計數板分25個中格。0.1mm為蓋上蓋玻片后計數室的高；1/400mm2表示計數室面積是1mm2，分為400個小格，每小格面積是1/400mm2。

當前21頁，總共29頁。當前22頁，總共29頁。

1、血液稀釋用10微升移液槍取10微升血液于一新的1.5mL離心管中，再用1000微升移液槍吸990微升生理鹽水于離心管中（稀釋100倍），輕輕顛倒混勻。2、計數板處理用無水乙醇或95%乙醇溶液擦拭計數板后，用綢布擦凈，另擦凈蓋玻片一張，把蓋片覆在計數板上面。3、充液取干凈的計數板平放于實驗桌上，將蓋玻片置入計數板正中央。用毛細血管吸取已稀釋混勻后的血細胞懸浮液，并將管尖輕輕斜置于蓋玻片邊緣，讓血細胞懸液緩慢流出，借毛細管現象而自動流入計數室內。當前23頁，總共29頁。當前24頁，總共29頁。

4、靜置血細胞懸液充入計數室后，靜置2～3分鐘，待細胞不再浮動后，于低倍鏡下觀察計數室內待計數的血細胞分布是否均勻，分布均勻者，方可計數。當前25頁，總共29頁。

5、按圖計算計數板的四角大方格（每個大方格又分16個小方格）內的細胞數。計數時，只計數完整的細胞，若聚成一團的細胞則按一個細胞進行計數。在一個大方格中，如果有細胞位于線上，一般計下線細胞不計上線細胞，計左線細胞不計右線細胞。當前26頁，總共29頁。6、計算計完數后，需換算出每ml懸液中的細胞數。由于計數板中每一方格的面積為0.01cm2，高為0.01cm，這樣它的體積為0.0001cm3，即0.1mm3。由于1ml＝1000mm3，所以每一大方格內細胞數×10000＝細胞數/ml，故可按下式計算：細胞懸液細胞數/ml＝4個大格細胞總數/4×10000

如計數前已稀釋，可再乘稀釋倍數。當前27頁，總共29頁。血細胞計數換算公式：16×25：計數個數×4