抗血管生成治療及恩度先聲藥業抗腫瘤藥事業部市場部年走進恩度專題知識專家講座第1頁Folkman,J.Tumorangiogenesis:therapeuticimplication.N.Engl.J.Med.1971.285：1182-1186.腫瘤血管生成理論JudahFolkman

教授腫瘤血管生成理論之父波士頓兒童醫院醫療中心外科研究室主任美國國家藝術和科學院以及國家科學院(NAS)院士走進恩度專題知識專家講座第2頁“抗血管生成療法”示意圖細胞癌變小腫瘤腫瘤生長分泌生長因子誘發新生血管新生血管向腫瘤供養癌細胞經過血管擴散腫瘤休眠血管阻斷新生血管血管血管走進恩度專題知識專家講座第3頁

年度世界十大科技突破

——引自美國《科學》雜志走進恩度專題知識專家講座第4頁血管生成雙向調整機制ActivatorInhibitor當前研究表明，機體對血管生成調控遵照雙向調整普遍規律。血管生成是受血管生成促進因子和血管生成抑制因子共同調整。AngiostatinEndostatinThrombospondin-1VEGFbFGFPDGF走進恩度專題知識專家講座第5頁內源性促／抗血管生成因子

StimulatorsInhibitorsVEGFbFGFPIGFPDGFTGF-a/bTNF-aIL-8HGFAngiogeninIL-3ProliferinLeptinG-CSFInterferonsa/bAngiostatinEndostatinVasostatinCanstatinTumstatinPlateletfactor-4Thrombospodin-1IL-1216kDprolactinfragmentIL-18IP-1053kDantithrombinIII走進恩度專題知識專家講座第6頁抗血管生成治療策略經過抑制促進因子表示或者外援性補充抑制因子等方法改變血管生成促進因子和抑制因子之間相對平衡，來阻斷血管生成。直接針對各種血管生長因子抗體或藥品。針對生長因子受體藥品，阻斷細胞內信號傳導通路。針對血管內皮細胞藥品，抑制內皮細胞增值和遷移?；|金屬蛋白酶抑制劑，阻止基底膜以及細胞外基質降解。其它，比如抗粘附分子抗體抗整合素v3等走進恩度專題知識專家講座第7頁抗血管生成治療當前已經成為腫瘤治療中最引人矚目標熱點領域之一。經過近30年探索，近年來已經有幾十種新生血管抑制劑藥品進入I、II、III期臨床研究，其中最引人注目標便是當前發覺最廣譜血管生成抑制劑Endostatin(ES)。腫瘤血管生成理論走進恩度專題知識專家講座第8頁內皮抑素

Endostatin

發覺O’reillyMS,etal.Cell1997;88:277-285.走進恩度專題知識專家講座第9頁內皮抑素

Endostatin

發覺內皮抑素ES最初是從鼠成血管細胞瘤株培養液中分離提純得到一個在動物體內天然存在蛋白。內皮抑素ES是由細胞外基質成份膠原ⅩⅧ羧基末端水解而來，含有184個氨基酸，分子量為20KD。試驗研究發覺內皮抑素ES含有強烈抑制血管生成作用。走進恩度專題知識專家講座第10頁O’reillyMS,etal.Cell1997;88:277-285.內皮抑素

Endostatin抑瘤試驗走進恩度專題知識專家講座第11頁內皮抑素

Endostatin

抑瘤試驗O’reillyMS,etal.Cell1997;88:277-285.BoehmT,etal.Nature1997;390:404-407.走進恩度專題知識專家講座第12頁內皮抑素作用機理(一)

Endostatin能作用于VEGF受體KDR/Flk-1，阻止VEGF與內皮細胞結合，直接阻斷VEGF作用。

KimYM,etal.JBC,,277(31):27872-27879.走進恩度專題知識專家講座第13頁干擾血管生成因子作用：與bFGF競爭結合，干擾其信號傳導通路。下調VEGFmRNA和蛋白表示，直接阻斷VEGF受體信號轉導，從而抑制VEGF介導內皮細胞遷移和血管生成。內皮抑素作用機理(一)HajitouA,etal.FASEBJ.,16(13):1802-1804.UrbichC,etal.FASEBJ.,16(7):706-708.走進恩度專題知識專家講座第14頁

基質金屬蛋白酶MMP-2在血管生成中發揮主要作用，Endostatin能結合MMP-2催化活性區，阻斷其作用。

LeeSJ,etal.FEBSletters,:147-152.內皮抑素作用機理(二)走進恩度專題知識專家講座第15頁

Endostatin能結合于Tropomyosin,破壞微絲完整性，抑制內皮細胞遷移，誘導其凋亡，發揮抗腫瘤作用。

MacDonaldNJ,etal.JBC,,276(27):25190-25196內皮抑素作用機理(三)走進恩度專題知識專家講座第16頁

Endostatin能抑制Wnt信號通路，促進b-catenin降解，抑制內皮細胞移動，造成內皮細胞停滯在G1期，降低內皮細胞在S期百分比引發細胞周期停滯。

HanaiJI,etal.JCB,,158(3):529-539.內皮抑素作用機理(四)走進恩度專題知識專家講座第17頁對內皮細胞凋亡影響： ES促內皮細胞凋亡作用可能與誘導酪氨酸激酶活性,抑制bcl-2、bcl-xl和bad表示相關,而沒有改變bax、p53、cdc-5A、p38MAPK基因表示。 ES還能破壞微絲完整性抑制內皮細胞運動,誘導內皮細胞凋亡,最終抑制腫瘤生長內皮抑素作用機理(五)ShichiriM,etal.FASEBJ,,15(6):1044-1053.DixeliusJ,etal.Blood,,95(11):3403-3411.走進恩度專題知識專家講座第18頁FolkmanJ.ExperimentalCellResearch,.內皮抑素作用機理(六)走進恩度專題知識專家講座第19頁

Endostatin能下調體內促血管生成因子，上調體內血管生成抑制因子，經過改變血管生成調整因子平衡關系，發揮抗血管生成作用。

內皮抑素作用機理(六)FolkmanJ.ExperimentalCellResearch,.走進恩度專題知識專家講座第20頁Endostatininhibits

65differenttumortypesandmodifies12%ofthehumangenometodownregulatepathologicalangiogenesiswithoutside-effects.(抑制65種腫瘤生長，影響占人類基因組12％與血管生成相關基因發揮抗血管生成作用)Inhumans,endostatinhasvirtuallynotoxicityandhasrevealednoresistanceevenwhenithasbeenadministeredtopatientseverydayforupto>3.5yearswithoutinterruption.(國外有患者連續應用endostatin超出3.5年)Endostatin,therefore,representsamodelofabroadspectrumangiogenesisinhibitorthatinthefuturecouldbeaplatformanti-canceragentforcoadministrationwithothertherapies.內皮抑素作用機理(六)FolkmanJ.ExperimentalCellResearch,.走進恩度專題知識專家講座第21頁

Endostatin缺失小鼠體內腫瘤生長速度加緊2-3倍；而Endostatin表示水平高1.6倍小鼠體內腫瘤生長速度相對于正常小鼠減慢3倍。

SundM,etal.PNAS,,102(8):2934-2939.內皮抑素基因敲除試驗走進恩度專題知識專家講座第22頁內皮抑素與

Down

syndrome

DownSyndrome(DS)又叫21三體綜合癥，患者含有3條21號染色體，最主要特點是智力障礙。Endostatin基因位于21號染色體上，所以，DS患者血中Endostatin水平較正常升高1/3。一個有趣現象是這類患者中實體瘤發病率顯著較正常人低。

ZorickT,etal.EuropeanJournalofHumanGenetics,,9:811-814.走進恩度專題知識專家講座第23頁國家一類生物新藥

恩度TM(ENDOSTAR)

走進恩度專題知識專家講座第24頁產品普通信息通用名：重組人血管內皮抑制素注射液注冊商標：恩度TMEndostarTM

英文名：RecombinantHumanEndostatin Injection類別：生物制品一類新藥規格：15mg/3ml/支

(2.4×105u/支)代號：YH-16走進恩度專題知識專家講座第25頁恩度TM樣品走進恩度專題知識專家講座第26頁恩度TM(Endostar)恩度TM不是單純

Endostatin，是在ES母體上創造性添加了9個氨基酸新型

Endostatin，不但使

ES穩定性提升，半衰期延長，而且生物活性增加。恩度TM是純度大于99.9%高純生物制劑。恩度TM是人源化蛋白，不會誘導本身抗體產生。恩度TM蛋白非常穩定，能夠室溫放置一年依然保持活性，而國外同類產品需要-80℃冷凍保留。走進恩度專題知識專家講座第27頁包含體電鏡照片

高效表示蛋白在大腸桿菌內形成大量無活性包含體。走進恩度專題知識專家講座第28頁超出

99%

Endostatin不能復性Endostatin復性是一個世界性難題走進恩度專題知識專家講座第29頁復性結構不規則、無生物活性特定三維結構、有生物活性什么是蛋白質復性？走進恩度專題知識專家講座第30頁恩度與

Endostatin比較項目Endostatin恩度生產廠家美國EntreMed企業先聲麥得津企業氨基酸數目184個193個表示體系酵母大腸桿菌抑瘤活性較強作用Endostatin兩倍以上純度低高（99%）產量低高生產成本高昂較低生產周期長短臨床研究終止于II期臨床研究同意上市走進恩度專題知識專家講座第31頁恩度TM與國外同類產品質量比較YH-16樣品（中國）高壓液相色譜法：純度比較恩度TM純度遠高于國外Endostatin

樣品，這也是恩度劑量只有國外十分之一左右原因。EntreMed企業樣品(美國)走進恩度專題知識專家講座第32頁恩度活性分析—雞胚血管

生成抑制試驗對照組恩度組走進恩度專題知識專家講座第33頁恩度活性分析—體外遷移試驗對照組恩度組走進恩度專題知識專家講座第34頁863計劃重大科技專題資助走進恩度專題知識專家講座第35頁

恩度TM臨床試驗研究中國醫學科學院腫瘤醫院內科孫燕院士走進恩度專題知識專家講座第36頁恩度TM國內臨床試驗年7月－年3月恩度TMI期臨床試驗年3月－年3月恩度TMII期臨床試驗年4月－年7月恩度TMIII期臨床試驗走進恩度專題知識專家講座第37頁藥代動力學正常人

t1/2為10±小時，全身去除率為2.8L/h/m2。正常小鼠靜脈給藥后腎、肺和肝中濃度高于血漿，肌肉、脂肪和腦濃度最低。主要經腎排泄。荷瘤小鼠靜脈注射本品后全身分布與正常小鼠相近，腫瘤組織中分布不高。走進恩度專題知識專家講座第38頁中國醫學科學院腫瘤醫院遼寧省腫瘤醫院廣西醫科大學腫瘤醫院浙江省腫瘤醫院天津醫科大學腫瘤醫院北京胸部腫瘤醫院四川大學華西醫院中山大學腫瘤醫院天津第二中心醫院福建省腫瘤醫院第三軍醫大學新橋醫院第三軍醫大學西南醫院

安徽省腫瘤醫院福建醫學大學協和醫院軍事醫學科學院從屬醫院西安交通大學第一醫院第四軍醫大學西京醫院上海長征醫院河南省腫瘤醫院河北省腫瘤醫院福建醫科大學第一從屬醫院山東大學齊魯醫院山東省腫瘤醫院天津市胸科醫院Ⅲ期臨床試驗參加醫院（24家）走進恩度專題知識專家講座第39頁SunY,WangJW,LiuYetal,ResultsofphaseIIItrialofrh-endostatin(YH-16)inadvancednon-smalllungcancer(NSCLC)patients.ProcASCO;23:7138a王金萬、孫燕、劉永煜,等.重組人血管內皮抑素聯合NP方案治療晚期NSCLC隨機、雙盲、對照、多中心III期臨床研究。中國肺癌雜志,，8：283－290Ⅲ期臨床試驗發表論文走進恩度專題知識專家講座第40頁研究目標：

主要目標：RR、CBR、TTP、生存期次要目標：QOL、臨床癥狀緩解率、藥品安全性研究設計：

隨機、雙盲、撫慰劑平行對照、多中心臨床試驗質控辦法：設置獨立療效評價委員會高頻度、高質量臨床監查

III期臨床試驗走進恩度專題知識專家講座第41頁Ⅲ期臨床試驗設計NSCLC初治或復治493例PS0-2Ⅲ／Ⅳ期NVB25mg/m2NVB25mg/m2YH-167.5mg/m2+NS250mlIVgttd1d2,3,4d5d1-14d21隨機分組NVB25mg/m2CDDP30mg/m2NVB25mg/m2d21d1d2,3,4d5撫慰劑(NS3.5ml)+NS250mlIVgtt全國24

個中心。隨機、雙盲、撫慰劑平行對照、多中心臨床試驗初治：復治=2：1試驗組：對照組=2：1CDDP30mg/m2d1-14走進恩度專題知識專家講座第42頁Ⅲ期臨床試驗表7.兩組患者療效比較主要指標NP＋YH-16NP+撫慰劑P值總有效率(%)35.419.50.0003初治40.023.90.003復治3總臨床受益率(%)73.364.00.035初治76.565.00.02復治65.261.70.68總中位TTP(月)000初治000復治002總中位生存時間（月）14.879.900.0000初治15.169.770.0000復治14.6710.000.01861年生存率（％）62.7531.460.0000初治64.0831.830.0000復治59.4529.870.0186走進恩度專題知識專家講座第43頁兩組患者生存Kaplan-Meier曲線試驗組中位生存期延長了5個月（14.9月VS9.9月,延長5.0月，P<0.0001），1年生存率提升31.29%(P<0.0001)。走進恩度專題知識專家講座第44頁Ⅲ期臨床試驗表8.兩組患者不良反應比較(n=493)毒性類型NP＋YH-16（n=322）NP＋撫慰劑（n=167）總不良反應3/4度總不良反應3/4度病例數％病例數％病例數％病例數％中性粒細胞降低17152.49328.58550.94728.2出血10532.2113.44728.153.0貧血5115.672.12515.031.8血小板降低20.60010.600惡心/嘔吐16550.6268.09053.9116.6腹瀉123.710.384.821.2便秘5516.910.33621.621.2粘膜炎30.910.30000轉胺酶226.820.684.800總膽紅素61.810.310.600發燒61.80010.600皮疹20.610.321.210.6疲乏10431.9123.76136.531.8疼痛3811.720.61810.842.4過敏30.910.30000周圍神經毒性30.90053.010.6脫發3912.0002313.821.2心律失常216.410.363.600注：兩組不良反應發生率比較無顯著差異走進恩度專題知識專家講座第45頁總結

恩度與NP聯合含有協同作用，能顯著延長患者腫瘤緩解及生存時間。恩度不增加化療不良反應。在取得臨床受益患者中大多數能伴隨腫瘤緩解提升生活質量，比如：緩解腫瘤引發咳嗽，咯血，疼痛等?；颊呱媾c恩度使用周期相關，臨床可推薦患者盡早使用恩度、且在能耐受情況下盡可能延長使用時間。走進恩度專題知識專家講座第46頁總結

恩度與化療聯合是一安全、有效晚期NSCLC治療方案，也是化療與抗腫瘤血管生成靶向治療藥品聯合應用成功典范，不但提高了療效，而且顯著提升了患者生存率，含有令人鼓舞臨床應用前景。走進恩度專題知識專家講座第47頁恩度TM國外報道（一）NatureBiotechnology,,24(2):117-118.走進恩度專題知識專家講座第48頁JudahFolkman,whoisfamiliarwithEndostatin,sinceitwasdiscoveredinhislaboratoryattheChildren’sHospitalinBostonsays,“[Medgenn]hasimprovedonthefunctionofendostatin.”Hecitestestsinhislaboratorythatshow

endostarisatleasttwiceaspotentasendostatininanimaltumormodels(Folkman教授證實，恩度在動物試驗上抑瘤效果最少是Endostatin兩倍).NatureBiotechnology,,24(2):117-118.恩度TM國外報道（一）走進恩度專題知識專家講座第49頁恩度TM國外報道（二）走進恩度專題知識專家講座第50頁

“ThedevelopmentsinChinarepresentaveryimportantadvance,”saysFolkman.“MostoftheangiogenesisinhibitorscurrentlyapprovedintheU.S.,andin28othercountries,blockasingleangiogenicfactorproducedbytumors,suchasAvastin’sblockageofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF).

TheChinesehavetakenthenextstep,makingavailableabroad-spectrumangiogenesisinhibitorthatsup