T/CSBT

0092021 II

DNA

10 11T/CSBT

0092021

WS/T

203

WS/T

420

WS/T

3.1

[來源：WS/T

3.2

red

cell

system根據紅細胞表面抗原的遺傳關系所劃分的類別。由1個基因座或相同功能的2～3個基因座控制的不[來源：WS/T

3.3

quality

control[來源：WS/T

3.4

quality

assessment；EQA家實室分同一本或考樣盤并外部獨立構收和反實驗上報結果此評過程稱為實驗室間比對（inter-laboratory

comparison）；由權威機構發放樣本或參考樣本盤，利用

（proficiency[來源：WS/T

4.1

00920214.2

性別、種族/民族、年齡、聯系電話）、臨床資料（臨床診斷、既往史、輸血史、孕產史、用藥史、干

4.3

4.4

24

DNA

在室溫運輸。待測核酸為

RNA

的標本，預計

小時內到達實驗室可室溫運輸；當運輸時間>1

小時，則

RNA

4.5

制定并實施標本交接和驗收程序，做好交接和驗收記錄。標本應標識清楚、運輸方式正確、容

標本驗收不合格的情形包括檢測申請單信息缺失或不符，標本管標識不清或者不正確，標本管

4.6

核酸提取步驟時，則標本應盡快提取核酸，避免長期保存及反復凍融原始標本。用于DNA分型時，全血于-70℃及以下保存。當選擇含特定添加劑試管或基因分型方法無需獨立核酸提取步驟，則參照試管說

00920215.1

5.2

液內的DNA樣本，不超過1年保存可在2-8℃，超過1年則宜置于-20℃及以下保存；RNA標本直接于-70℃

質為

DNA

時，A260/A280

比值一般宜在1.6-1.8之間；待測物質為RNA

時，A260/A280

比值一般宜在1.8-2.0之間。核酸完整性要求是在目的核酸分子量通過凝膠電泳在對應位置上應觀察到清晰的條帶，

5.3

5.3.2.1

各種分子生物學技術均可應用于紅細胞血型基因分型，但不同技術和方法特性存在區別。可5.3.2.2

寡核苷酸雜交（PCR-SSOP）、聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性（PCR-RFLP）、實時熒光定量

PCR5.3.2.3

NGS

5.3.3.1

5.3.3.2

PCR-SBT

0092021

NGS

基因可能存在大片段缺失、重組、拷貝數變異等情況時，在采用上述分型方法基礎上，按5.3.3.3

紅細胞血型的篩選與鑒定、待檢標本的血清學表型為常見表型或未知表型，需要以基因分

基因分型初步結果與血清學表型不符的標本，需要進一步明確基因型結果以預測該血型系

ABO

NGS

對疑為新等位基因、一些罕見等位基因或部分疑難標本的分析或確認，宜選用

PCR-SBT、NGS

PCR-SSP

5.4

5.4.2.1

5.4.2.2

5.4.2.3

自制試劑應制定試劑制備的操作規程，包括試劑均一性和穩定性等指標的評估程序，以及相5.4.2.4

5.4.2.5

不同的方法檢測堿基范圍存在差異。應明確分型試劑可檢測堿基的范圍，商品化試劑應在說明書中體現，自制試劑宜在操作規程中體現。PCR-SSP、PCR-SSO、MLPA

等基于某些序列特性而設計并

5.4.4.1

基于

PCR

應、重復性等。Sanger

NGS

5.4.4.2

性能驗證時所使用的標準品或參考物質可為各種突變型和野生型質粒或細胞株。常見紅細胞

DNA

5.4.4.3

干擾物考慮外源性和內源性物質，至少包括但不限于：抗凝劑、核酸提取試劑的殘留物、標

00920215.4.4.4

PCR

NGS

WS/T

5.5

5.6

6.1

因*數字（或字母、小數點等）表示，可參見ISBT網站紅細胞免疫遺傳和血型命名委員會更新的血型等

6.1.4.1

6.1.4.2

6.1.4.3

按照分型結果無法判定待檢標本基因型，或判定的基因型與血清學表型不符合，應在報告中6.2

報告應完整、明晰。報告至少應包括但不限于標本唯一性標識、送檢單位名稱、分型實驗室名

分型結果應對檢測的紅細胞血型系統等位基因多態性信息進行描述，主要包括核苷酸在參考序

0092021

分型結論應對分型結果進行適當注釋或解讀，包括紅細胞抗原或表型預測、結論解釋性描述，

DNA

6.3

6.4

6.5

完成分型后的DNA標本保存期限在-20℃以下應不少于1年，信息和資料的保存期限應不少于10年。

7.1

粒等、空白對照為反應體系中不加標本核酸物質。

7.1.3.1

7.1.3.2

當分析多個堿基突變點時，宜根據實驗室自身的條件，設立能敏感反應分型問題的

個或

0092021

7.2

證/（PT/EQA

組織能夠提供對該項目的室間質量評價，實驗室可與其他實驗室建立分型比對，至少每

個月

ABOABOc.467C>Tc.297A>Gc.526C>Gc.657C>Tc.703G>Ac.796C>Ac.803G>Cc.930G>Ac.802G>AMNSGYPAc.59C>Tc.71G>Ac.72T>GM/NGYPBc.143T>Cc.230C>Tc.270+5G>T(

S/sU+RHRHDExon

RHDc.845G>AWeak

partial

type

15c.1227G>A“Asian

DELRHCE

c.307T>CC/cc.676C>GE/ec.122A>G

-/C

c.106G>A

-/C

c.733C>GV-VS-/V+VS+

LULUc.230A>G

Lu

/LuKELKELc.578T>CK/kc.841T>C

Kp

/Kp

Js

/JsFYFYc.125G>A

Fy

/Fyc.-67T>C

(GATA)Fy(a-b-)c.265C>TFy

A.1

DNA

T/CSBT

0092021

JKJK

Jk

/JkDIDI

Di

/DiYTYT

Yt

/YtSCSCSc1/Sc2DODO

Do

/DoHy+/Hy-COCO

Co

/CoLWLW

LW

/LWCROMCRKNKN

Kn

/Kn

McC

/McCKCAM+/KCAM-Yk(a-)ININ

In

/InOKOK

T/CSBT

T/CSBT

0092021T/CSBT

0092021

B.1

陰性標本至少5例、陽性標本不少于10例）進行分析，然后將不同方法得到的結果進行對比分析，判斷B.2

將一份已知定值的標準品稀釋至廠家聲明的檢出限濃度檢測5次，5次檢測應全部陽性。B.3

終濃度與廠家聲明的濃度相同，與常規標本一樣處理，至少重復測定

次以上。弱陽性標本檢測仍為

B.4

的方法，應選擇261位不缺失標本進行評估)。測3次，結果應為陰性。B.5

至少選擇5例陰性和5例陽性標本