創作時間：二零二一年六月三十天華南師范大年夜學實驗陳述之老陽三干創作創作時間：二零二一年六月三十天液相色譜剖析混淆樣品中的苯和甲苯一、實驗目的1、掌握高效液相色譜定性和定量剖析的原理及方法；2、了解高效液相色譜的結構、原理及把持技術.二、實驗原理高效液相色譜由儲液器,泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部份構成,儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱內,因為樣品溶液中的各組分在兩相中擁有分歧的分派系數,在兩相中作相對運動,經過頻頻頻頻的吸附—解吸的分派過程,各組分在挪動速度上發生較大年夜的分歧,被分別成單個組分挨次從柱內流出,經過檢測器時,樣品濃度被變換成電信號傳遞到記錄儀.三、主要儀器和試劑主要儀器：島津液相色譜儀(LC-10AT)[配有紫外檢測器,PhenomenexODS柱]；10μL微量注射器創作時間：二零二一年六月三十天創作時間：二零二一年六月三十天試劑：苯標準溶液：10.0μL/mL；甲苯標準溶液：10.0μL/mL；苯、甲苯混淆標準溶液：1；甲醇：80%；苯和甲苯混淆待測溶液；四、實驗步伐1、標準溶液的配制系列用100μL的微量注射器分別量取10μL、20μL、50μL、100μL的苯和甲苯的混淆標準溶液（10.0μL/mL）,再分別加入90μL、80μL、50μL、0μL甲醇將其稀釋,作為待測液,其濃度分別為1μL/mL、2μL/mL、5μL/mL、10μL/mL2、色譜條件優化①按把持規程開機,并調好色譜條件,使儀器處于工作狀態.控制流動相流速為甲醇：0.8mL/min、水：0.2mL/min；柱溫30℃；檢測波長254nm；察看記錄保存時間,經過軟件剖析兩峰分別成效.②改變色譜條件,控制流動相流速為甲醇：0.95mL/min、水：0.05mL/min；柱溫30℃；檢測波長254nm；察看記錄保存時間,經過軟件剖析兩峰分別成效.創作時間：二零二一年六月三十天創作時間：二零二一年六月三十天③經過察看兩種色譜條件下的峰分別成效,選擇最正確的色譜條件.若還不可以抵達最正確的分別成效,能夠再設定分歧的色譜條件,而后依據峰分別成效,選擇最正確的色譜條件.3、苯、甲苯定性剖析在最正確條件下,待基線走穩后,用10μL微量注射器分別進樣5μL苯和甲苯混淆待測溶液,5μL苯標準溶液（10.0μL/mL）和5μL甲苯標準溶液（10.0μL/mL）(微量注射器用甲醇潤洗3～5遍),察看并記錄色譜圖上顯示的保存時間,確立苯和甲苯的峰.4、苯、甲苯定量剖析最正確條件下,待基線走穩后,用10μL微量注射器分別進樣1.0μL/mL、5μL.察看并記錄各色譜圖上的保存時間和峰面積.繪制苯和甲苯混淆標準溶液峰面積與相應濃度的標準曲線.5、苯和甲苯混淆待測溶液剖析最正確條件下,待基線走穩后,用10μL微量注射器進樣苯和甲苯混淆待測液5μL,察看并記錄各色譜圖上的保存時間和峰面積.依據峰面積在工作曲線上查出苯和甲苯待測液的濃度,并計算試樣中苯和甲苯的含量.五、實驗數據及剖析創作時間：二零二一年六月三十天創作時間：二零二一年六月三十天高效液相色譜數據陳述一、色譜條件優化μV(x100,000)2.0色譜1.595%1.080%0.50.0min二、定性剖析苯三、定分

樣品苯甲苯量保存時間析苯、甲苯混淆標準溶液濃度分別為：1ul/ml,2ul/ml,5ul/ml,10ul/ml.10ul/ml苯甲苯面積(x1,000,000)面積(x1,000,000)2.03.01.52.51ul/ml2.01.01.50.51.00.50.0濃度0.07.50.0濃度濃度峰面積濃度峰面積1ul/ml2126851ul/ml3877102ul/ml4292912ul/ml7479835ul/ml9545375ul/ml153389210ul/ml190534310ul/ml2928373Y=aX+bY=aX+b創作時間：二零二一年六月三十天創作時間：二零二一年六月三十天四、未知樣品濃度未知樣品苯甲苯濃度2濃度12.9ul/ml六、實驗議論①因為實驗中待測溶液的組分只有苯和甲苯兩種物質,組分比力簡單,只需在實驗過程中,嚴格控制且定量進樣,就能采用把持、計算簡易的標準曲線法得出正確的實驗結果,因此采用標準曲線法.若采用歸一化法或內標法,固然能獲取正確更高的實驗結果,但因為實驗把持及計算均較為復雜,實驗及數據處理的時間長,效率相對不高,故實驗中采用標準曲線法作為定量的方法.②最正確色譜條件的選擇是本實驗正確度的重點.若苯與甲苯的峰分別成效過小,苯與甲苯的峰未能完整分別,一定影響其保存時間和峰面積的計算,是實驗正確度減小,數據偏差加大年夜；若苯與甲苯的峰分別成效過好,固然能將苯與甲苯的峰完整分別,實驗正確度好,但是耗資的實驗時間較長,效率不好.因此,應選擇適合的色譜條件.創作時間：二零二一年六月三十天創作時間：二零二一年六月三十天③為了提升標準曲線的擬合度,能夠重復進樣頻頻,