34/34第十章胺類藥物的分析【考點進階詳解】一、鹽酸普魯卡因及其制劑的分析★★★1.結(jié)構(gòu)和性質(zhì)鹽酸普魯卡因是對氨基苯甲酸與二乙氨基乙醇的酯。Ｈ2NOONCH3CＨ3ＨＣl①芳伯氨基：具有重氮化反應(yīng)（定量）、重氮化-偶合反應(yīng)（定性)；②脂胺氮原子：堿性；③酯鍵：水解得二乙氨基乙醇和對氨基苯甲酸（定性）；④苯環(huán):紫外吸收(定量、定性)和紅外吸收(定性）；⑤氯化物：定性。2.鑒別(1）芳香第一胺反應(yīng)(重氮化—偶合反應(yīng)）芳香第一胺，在鹽酸中與亞硝酸鈉作用，生成重氮化鹽,可與—萘酚偶合，生成紅色或猩紅色沉淀。(２)水解反應(yīng)鹽酸普魯卡因遇氫氧化鈉即游離出普魯卡因白色沉淀（熱時為油狀物），加熱，酯鍵水解，產(chǎn)生揮發(fā)性的二乙氨基乙醇和對氨基苯甲酸鈉。前者使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍；水溶液放冷加鹽酸，生成對氨基苯甲酸白色沉淀，加入過量鹽酸,生成其鹽酸鹽而溶解。(３)氯化物反應(yīng)①沉淀反應(yīng)：供試液加硝酸，再加硝酸銀，生成白色沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解,再加硝酸，沉淀復(fù)析出。②氧化還原反應(yīng):本品加等量的二氧化錳,混勻，加硫酸濕潤,加熱，發(fā)生氯氣,使?jié)駶櫟牡饣浀矸墼嚰堬@藍色。（4）紅外光譜法波數(shù)(cm-1）振動類型歸屬３315，３200NH2氨基２５85NH＋氨基16９2c=ｏ羰基１6４5N-H氨基1604，1520C＝C苯環(huán)1271,1１70，111５C-Ｏ酯基3.特殊雜質(zhì)檢查鹽酸普魯卡因的雜質(zhì)檢查項目有：酸度、溶液的澄清度、干燥失重、熾灼殘渣、鐵鹽及重金屬。鹽酸普魯卡因注射液須檢查水解產(chǎn)物對氨基苯甲酸(滅菌時產(chǎn)生)。采用TＬC法：薄層板為硅膠Ｈ－ＣMC—Na；展開劑為苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1∶1∶４);顯色劑：對二甲氨基苯甲醛.結(jié)果：供試品如顯與對照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點，顏色不得更深。限量計算:L％=［（0.03mg/ｍl)／(2．５ｍg/mｌ）]×１0０％=1.2%4.含量測定鹽酸普魯卡因含有芳伯胺,故鹽酸普魯卡因及其注射液均采用亞硝酸鈉滴定法測定含量,用永停法指示終點。二、鹽酸利多卡因的分析★★★1。結(jié)構(gòu)和性質(zhì)鹽酸利多卡因具有脂烴胺側(cè)鏈,顯弱堿性。①脂烴胺側(cè)鏈:弱堿性(非水溶液滴定、生物堿沉淀反應(yīng)）；②芳酰胺：兩側(cè)甲基使之不活潑。2.鑒別①制備衍生物測熔點：與三硝基苯酚反應(yīng)，生成黃色沉淀（三硝基苯酚利多卡因）,洗滌,105℃干燥，熔點為22８℃~２3２℃(熔融同時分解）。②與硫酸銅試液反應(yīng)：在碳酸鈉試液中與硫酸銅反應(yīng)，生成藍紫色化合物；加氯仿,有色物轉(zhuǎn)溶于有機層顯黃色。③氯化物的反應(yīng):同鹽酸普魯卡因。④紅外光譜法：應(yīng)與對照圖譜一致。3．含量測定采用非水溶液滴定法測定含量.(1）原理:鹽酸利多卡因的脂烴胺側(cè)鏈為弱堿性,有機弱堿在醋酸介質(zhì)中堿性增強，用高氯酸滴定，結(jié)晶紫指示終點。(2)注意①鹽酸鹽用高氯酸滴定時產(chǎn)生氫鹵酸，反應(yīng)不能定量完成,故滴定前加入醋酸汞,使生成氯化高汞,排除干擾。②滴定前加入醋酐,增強有機堿的堿性,滴定突躍敏銳。三、對乙酰氨基酚及其制劑的分析★★★1。結(jié)構(gòu)和性質(zhì)①羥基：三氯化鐵反應(yīng)（定性)；②乙酰氨基:水解，生成對氨基酚和醋酸，前者的芳伯胺基有重氮化（定量）和重氮化-偶合反應(yīng)(定性）；③苯環(huán)：紫外吸收(定量和定性）和紅外吸收（定性）。2。鑒別①三氯化鐵反應(yīng):酚羥基與三氯化鐵生成藍紫色。②水解后的重氮化－偶合反應(yīng):在稀鹽酸中加熱水解，與亞硝酸鈉生成重氮鹽,再與-萘酚偶合，生成紅色偶氮染料.③紅外光譜法:酰氨基、酚羥基和苯環(huán)的特征吸收。3.特殊雜質(zhì)檢查①有關(guān)物質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì)：對氨基酚、對氯乙酰苯胺、偶氮苯、苯醌。來源：未反應(yīng)原料、中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。檢查方法:TＬC,對照品為對氯乙酰苯胺。②對氨基酚來源：副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。檢查原理：對氨基酚在堿性條件下與亞硝基鐵氰化鈉生成藍色配位物。檢查方法：限量檢查法。4．含量測定采用可見—紫外分光光度法測定對乙酰氨基酚的含量。①原理：對乙酰氨基酚中的苯環(huán)，在0．4％氫氧化鈉溶液中,于257nm有最大吸收。②方法:吸收系數(shù)法。含量計算含量（％)＝１00％525０１0式中，A：為吸收度;Ｗ：為供試品的稱樣量，ｍｇ.③應(yīng)用：對乙酰氨基酚的原料、普通片、咀嚼片、注射液、栓劑、膠囊劑顆粒劑及片劑的溶出度測定,均采用紫外分光光度法。５。對乙酰氨基酚制劑的分析（1)對氨基酚的檢查對乙酰氨基酚咀嚼片、泡騰片、顆粒基滴劑等需檢查對氨基酚。方法:反相高效液相色譜法，ODS為固定相；緩沖液—甲醇為流動相。限度為0。1％.（２）溶出度的測定對乙酰氨基酚片、顆粒劑與膠囊需檢查溶出度。方法：以稀鹽酸24mｌ加水至1000mｌ為溶出介質(zhì),采用紫外-可見分光光度法,在257nm的波長處測定，以吸收系數(shù)計算溶出量,經(jīng)30mｉn（膠囊４5mｉn)時取樣，測定，溶出量應(yīng)為標(biāo)示量的8０%。（3）高效液相色譜法用于泡騰片、滴劑及凝膠劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,０．0５mｏl／L醋酸銨溶液-甲醇（８5：1５)為流動相；檢測波長為25７ｎm，茶堿為內(nèi)標(biāo)。四、腎上腺素及其制劑的分析★★★1．結(jié)構(gòu)和性質(zhì)①烴胺側(cè)鏈：弱堿性(非水溶液滴定法）②手性碳原子：有旋光性③苯酚：有溴代反應(yīng)(定性);三氯化鐵反應(yīng)（定性)④鄰位酚羥基:易被氧化2。鑒別腎上腺素①三氯化鐵反應(yīng)：其鹽酸水溶液與三氯化鐵顯翠綠色;再加氨試液顯紫色,最終成紫紅色。②氧化反應(yīng):其鹽酸水溶液與過氧化氫試液共沸，顯血紅色（腎上腺素紅）。3．檢查項目（1)腎上腺素除檢查“干燥失重”、“熾灼殘渣”外,還需檢查“酸性溶液的澄清度與顏色”與“酮體"①酸性溶液的澄清度與顏色鄰位酚羥基不穩(wěn)定，與空氣接觸或受日光照射易氧化變質(zhì).氧化產(chǎn)物多顯色,且在酸性溶液中的溶解度下降.方法：取供試品，加鹽酸（9→20０)溶解并稀釋成每1mｌ中含２0mg的溶液，應(yīng)澄清無色；如顯色，與同體積的對照液(黃色3號標(biāo)準(zhǔn)比色液或橙紅色2號標(biāo)準(zhǔn)比色液５mｌ,加水５ml）比較，不得更深.②酮體的檢查來源：腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素均由其相應(yīng)的酮體氫化制得，若氫化不完全，則引入酮體。原理：酮體在310ｎm有最大吸收，主成分無吸收；限制310nm的吸收值達到限制酮體含量的目的。方法:取供試品,用鹽酸（9→2０00）配成每１mｌ中含2．0mg的溶液，在31０ｎm測定,吸收度不得大于0.0５,酮體限量為０．０6％。4.含量測定(１）腎上腺素非水溶液滴定法：腎上腺素的仲烴胺弱堿性.以冰醋酸作溶劑、結(jié)晶紫作指示劑、高氯酸作滴定劑，滴定結(jié)果用空白試驗校正。（2)鹽酸腎上腺素注射液高效液相色譜法：色譜柱為ODＳ;流動相為0．１4%庚烷磺酸鈉-甲醇；檢測波長為280nm；外標(biāo)法計算含量.庚烷磺酸鈉作為離子對試劑,和腎上腺素生成離子對，克服腎上腺素中堿性基團離解,改善峰形。【真題模擬與解析】一、A型題（最佳選擇題)1.芳香第一胺反應(yīng)又稱A。重氮化反應(yīng)B．與-萘酚的偶合反應(yīng)C.與亞硝酸鈉的反應(yīng)Ｄ．重氮化-偶合反應(yīng)Ｅ．與芳香醛的反應(yīng)答案［Ｄ]本題考點：重氮化-偶合反應(yīng)的定義。２．具有重氮化-偶合反應(yīng)的藥物是A．鹽酸普魯卡因B.對乙酰氨基酚C.鹽酸利多卡因D.鹽酸丁卡因E．腎上腺素答案[A]本題考點：上述藥物僅有鹽酸普魯卡因具有芳伯氨基,所以能發(fā)生重氮化—偶合反應(yīng)。3．取某藥物約50mg，加稀鹽酸1ml,必要時加熱溶解，放冷，加0。1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，加堿性—萘酚試液數(shù)滴，生成橙黃到猩紅色的沉淀.該藥物是Ａ.水楊酸Ｂ。阿司匹林C.苯甲酸鈉Ｄ．對氨基水楊酸鈉E.鹽酸丁卡因答案［D］本題考點:對氨基水楊酸鈉具有芳伯氨基，因此能發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)。4．某藥物加水溶解，加10％氫氧化鈉溶液,生成白色沉淀，加熱，變成油狀物，繼續(xù)加熱產(chǎn)生可使紅色石蕊試紙變藍的氣體,并油狀物消失；放冷，加鹽酸酸化，白色沉淀又析出，加過量的鹽酸沉淀可溶解。該藥是Ａ.腎上腺素B.對乙酰氨基酚C.對氨基水楊酸鈉D.鹽酸利多卡因E．鹽酸普魯卡因答案［E］答案解析：此乃鹽酸普魯卡因的水解反應(yīng)，鹽酸普魯卡因遇氫氧化鈉即游離出普魯卡因白色沉淀,加熱，酯鍵水解，產(chǎn)生揮發(fā)性的二乙氨基乙醇能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍,水溶液放冷加鹽酸后生成對氨基苯甲酸白色沉淀,加入過量鹽酸，生成其鹽酸鹽而溶解。5.《中國藥典》（2０05年版）規(guī)定鹽酸普魯卡因注射液應(yīng)檢查的特殊雜質(zhì)是A.氯化物B．水解產(chǎn)物C．對氨基苯甲酸D.二乙氨基乙醇Ｅ．對氨基水楊酸答案[C]本題考點：鹽酸普魯卡因注射液須檢查滅菌時產(chǎn)生的水解產(chǎn)物對氨基苯甲酸的含量。６.亞硝酸鈉滴定法中，加KBr的作用是Ａ.添加Br－Ｂ.生成ＮO+·Br－Ｃ.生成ＨBｒD．生成Br２E.抑制反應(yīng)進行答案[B］本題考點:亞硝酸鈉滴定法中，加KBr的作用是生成NＯ+·Br－，促使反應(yīng)進行。７。鹽酸普魯卡因和鹽酸利多卡因的共同鑒別反應(yīng)是A．芳香第一胺反應(yīng)Ｂ.苯環(huán)的取代反應(yīng)C．氯化物反應(yīng)D．與過氧化氫試液的反應(yīng)E。制備衍生物測定熔點答案[Ｃ］答案解析:兩種藥物共同的特點是均為鹽酸鹽，因此可以利用氯化物反應(yīng)加以鑒別.8。腎上腺素中酮體的檢查方法：取腎上腺素適量,加鹽酸溶液配成濃度為2．0ｍg/mｌ的溶液，于310nｍ波長處測得的吸收度不得大于0．05，酮體在31０nm的E1％1cm為453,計算酮體的限量是Ａ．０。６％B。0．060%C.０.5％D．0．０5％Ｅ．0。080％答案[Ｂ］答案解析：Ｌ=[(ＣV）/Ｓ]×100%=［(A/E×1/100×1０３×Ｖ)/２.0］×１０0%＝［(0.０5/453×１/１00×103×1)/2。0］×1００％=0.055％＝0.06%９．TＬC法檢查鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸時，顯色定位雜質(zhì)斑點采用Ａ。氨氣Ｂ．碘蒸氣C。－萘酚D.對二甲氨基苯甲醛E.硫酸銅溶液答案［D]本題考點:TＬC法檢查鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸雜質(zhì)的條件.薄層板為硅膠Ｈ-CMC－Na，展開劑為苯－冰醋酸-丙酮—甲醇（1４∶1∶1∶4)，顯色劑:對二甲氨基苯甲醛。10.下列藥物中不能用亞硝酸鈉滴定法測定含量者Ａ.乙酰水楊酸B．對氨基水楊酸鈉C。對乙酰氨基酚D.普魯卡因E．苯佐卡因答案[Ａ]本題考點：上述選項中僅有乙酰水楊酸不具有芳伯氨基或潛在芳伯氨基，因此不能用亞硝酸鈉滴定法測定含量其含量。１1．對乙酰氨基酚的含量測定方法為:取本品約40ｍｇ，精密稱定,置2５0mｌ量瓶中，加０。4％氫氧化鈉溶液５0ml溶解后,加水至刻度，搖勻,精密量取5ml，置10０ｍl量瓶中，加０.４%氫氧化鈉溶液10mｌ，加水至刻度，搖勻,照分光光度法,在257nm的波長處測定吸收度,按C8Ｈ9NO２的吸收系數(shù)（E１％１CM)為71５計算,即得。若樣品稱樣量為m(g）,測得的吸收度為Ａ，則含量百分率的計算式為Ａ.(A／71５）×（250/５）×（1/m）×100%Ｂ.（A/71５）×(1０0/5)×2５0×(1／ｍ)×100％C。Ａ×７15×（250/5）×（１/m)×1０0％D．A×7１5×（10０/５)×２５0×（1/m)×100%E。（A/71５）×(1/m)×100％答案［A]本題考點:紫外分光光度法的含量測定計算公式，C＝A/EL。1２。鹽酸利多卡因含量測定，用高氯酸滴定產(chǎn)生氫鹵酸，不利于反應(yīng)的定量進行.為消除這種干擾,可加入Ａ．氫氧化鈉B。硝酸汞C．硫酸汞D．醋酸汞E.高氯酸汞答案［D］本題考點：非水滴定中如含ＨX,則必須加入醋酸汞試液以消除氫鹵酸的干擾。B型題（配伍選擇題）[13—１7]下列藥物與所需檢查的雜質(zhì)相對應(yīng)的是Ａ。腎上腺素B．氫化可的松C．硫酸奎尼丁D．對乙酰氨基酚Ｅ．阿司匹林13．需檢查其他生物堿的藥物是1４。需檢查其他甾體的藥物是1５。需檢查酮體的藥物是1６．需檢查水楊酸的藥物是17.需檢查對氨基酚的藥物是答案［ＣBAED］本題考點：各種藥物的雜質(zhì)檢查項目。[18-21]藥物的含量測定方法為A。溴量法B．雙相滴定法C。亞硝酸鈉滴定法D.非水溶液滴定法Ｅ。高效液相色譜法１8．鹽酸普魯卡因19．鹽酸利多卡因２0。腎上腺素21．對乙酰胺基酚滴劑答案［CDＤＥ]答案解析:鹽酸普魯卡因含有芳伯氨基，因此可用亞硝酸鈉滴定法測定含量；鹽酸利多卡因和腎上腺素的烴胺側(cè)鏈具有弱堿性,故可采用非水溶液滴定法測定含量;對乙酰胺基酚泡騰片、滴劑及凝膠劑采用高效液相色譜法測定含量。[２２－25］下列藥物中應(yīng)檢查的雜質(zhì)是A.對氨基苯甲酸B．對氨基酚C．對苯二酚D.腎上腺酮Ｅ。游離水楊酸22．藥典規(guī)定阿司匹林23.藥典規(guī)定鹽酸普魯卡因注射液24．藥典規(guī)定對乙酰氨基酸２5．藥典規(guī)定腎上腺素答案[EＡBＤ］本題考點:各種藥物的雜質(zhì)檢查項目.26－29]與下列選項相對應(yīng)的是A.庚烷磺酸鈉Ｂ．醋酸汞試液C.永停終點法Ｄ．淀粉指示液E。溴化鉀固體２6．鹽酸普魯卡因及其注射液均采用亞硝酸鈉滴定法測定含量時的終點指示方法27.反相離子對HPＬＣ測定鹽酸腎上腺素注射液含量時,所用離子對試劑是28．亞硝酸鈉滴定法測定鹽酸普魯卡因含量時,需加入29．非水滴定法測定鹽酸利多卡因含量時，需加入答案[CAEB］答案解析：亞硝酸鈉滴定法測定含量時用永停法指示終點;反相離子對HＰＬＣ測定鹽酸腎上腺素注射液含量時,用庚烷磺酸鈉作為離子對試劑，和腎上腺素生成離子對，克服腎上腺素中堿性基團離解,改善峰形;亞硝酸鈉滴定法測定鹽酸普魯卡因含量時加入溴化鉀固體是為了加快反應(yīng)速度；非水滴定法測定鹽酸利多卡因含量時加入的醋酸汞試液是為了消除鹽酸的干擾。三、X型題（多項選擇題）30．鹽酸普魯卡因的鑒別試驗有A．重氮化—偶合反應(yīng)Ｂ.與芳醛縮合的反應(yīng)C．水解反應(yīng)Ｄ．氯化物反應(yīng)E.紅外光譜法答案［ABＣDE]本題考點：鹽酸普魯卡因的五種鑒別方法.3１．下列可能是鹽酸普魯卡因注射液雜質(zhì)的是A.對氨基苯甲酸B.二乙氨基乙醇C.苯甲酸D．苯酚E。普魯卡因答案［AB]本題考點:鹽酸普魯卡因注射液在加熱滅菌時容易發(fā)生水解，酯鍵斷裂,生成對氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇。32．可發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)的藥物有A.腎上腺素B。鹽酸去氧腎上腺素C。鹽酸普魯卡因Ｄ．鹽酸丁卡因E．撲熱息痛答案［CE］本題考點：本類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu),只有具有芳伯氨基和潛在芳伯氨基的化合物才能發(fā)生重氮化－偶合反應(yīng).33.鹽酸利多卡因含量測定中，測定前在供試品溶液中加入適量的醋酐,其作用是Ａ．可增強鹽酸利多卡因的堿性B。避免雜質(zhì)影響測定Ｃ。加速反應(yīng)進行D．增溶作用Ｅ.使滴定終點突躍敏銳答案[AE］本題考點：鹽酸利多卡因采用非水滴定法測定含量，滴定前加入醋酐，能增強有機堿的堿性，滴定突躍敏銳。34．下列藥物中不含酮體雜質(zhì)的是A．鹽酸普魯卡因B．鹽酸利多卡因C.腎上腺素D.對乙酰氨基酚Ｅ。鹽酸去氧腎上腺素答案［ABD]答案解析：腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素均由其相應(yīng)的酮體氫化制得，若氫化不完全，則引入酮體。35。可采用非水滴定法進行含量測定的藥物有A.鹽酸普魯卡因B．鹽酸利多卡因C。阿司匹林D。腎上腺素E．丙磺舒答案[AＢD］本題考點:AＢD的結(jié)構(gòu)中均有含有顯堿性的N原子，可以采用非水堿量法進行含量測定。36。中國藥典（2005年版）規(guī)定鑒別對乙酰氨基酚的試驗是A.紅外光譜法B.水解后重氮化法C．水解后重氮化-偶合反應(yīng)D．三氯化鐵反應(yīng)E．氧化反應(yīng)答案［AＣD］答案解析：對乙酰氨基酚具有潛在芳伯氨基和苯環(huán)，因此可以分別利用水解后重氮化－偶合反應(yīng)和三氯化鐵反應(yīng)進行鑒別。37．對乙酰氨基酚的特殊雜質(zhì)有A.對氨基酚B．對氯乙酰苯胺C．偶氮苯D。苯醌E．有關(guān)物質(zhì)答案[ＡBCDE］本題考點：對乙酰氨基酚的特殊雜質(zhì)為對氨基酚及有關(guān)物質(zhì)(對氨基酚、對氯乙酰苯胺、偶氮苯、苯醌）。38．紫外分光光度法可測定的藥物有A.對乙酰氨基酚B．對乙酰氨基酚片C．對乙酰氨基酚注射液D．鹽酸腎上腺素E。對乙酰氨基酚栓劑答案[ABCDＥ］本題考點:紫外分光光度法可以測定的條件是具有共軛基團,上述藥物的結(jié)構(gòu)中均具有苯環(huán)，因此有紫外吸收,可以用此法進行含量測定.39．對乙酰胺基酚片劑的檢查項目有Ａ。對氨基酚的檢查B．溶出度的測定Ｃ。釋放度的測定D．對氨基苯甲酸鈉的檢查Ｅ．鹽酸答案[AB］本題考點：對乙酰胺基酚制劑的檢查項目。第十章巴比妥類藥物的分析【考點進階詳解】【重點與難點提示】一、化學(xué)結(jié)構(gòu)★★丙二酰脲類常用藥物多為巴比妥酸的5,５—二取代物，少為１，5，５-三取代物.本章代表性的藥物有如下三種：二、苯巴比妥及其制劑的分析苯巴比妥的分析1。鑒別(1)與亞硝酸鈉-硫酸的反應(yīng)在硫酸存在下與亞硝酸鈉作用生成橙黃色產(chǎn)物，隨即轉(zhuǎn)為橙紅色。用于區(qū)別苯巴比妥與其他不含苯環(huán)的巴比妥類藥物。（２）與甲醛-硫酸的反應(yīng)在硫酸存在下與甲醛反應(yīng)生成玫瑰紅色產(chǎn)物，可用于區(qū)別苯巴比妥與其他巴比妥類藥物.（3)紅外光譜法具有羰基、酰胺和苯環(huán)結(jié)構(gòu)的特征紅外光譜。(4)丙二酰脲類的鑒別反應(yīng)在堿性條件下，可與某些重金屬離子反應(yīng),生成沉淀或有色物質(zhì)。:。化學(xué)性質(zhì)與鑒別反應(yīng)★★★1。母核反應(yīng)與重金屬離子如Ag、Hg、Cu、Co等形成可溶性或不溶性的有色物質(zhì).①(１）銀鹽反應(yīng)在Na2CO3堿性條件下與ＡgＮO3反應(yīng),生成可溶性一銀鹽,繼續(xù)加入ＡgNO3，則生成不溶二銀鹽（白色沉淀）。②(2）銅鹽反應(yīng)巴比妥類藥物能與吡啶—硫酸銅發(fā)生類似雙縮脲反應(yīng),溶液顯紫堇色或生成紫色沉淀（含硫巴比妥顯綠色，可用于區(qū)別）。以上兩個反應(yīng)可用于鑒別和含量測定.２.雜質(zhì)檢查《中國藥典》規(guī)定,除檢查“干燥失重”和“熾灼殘渣”外,還需檢查“酸度”、“乙醇溶液的澄清度”和“中性或堿性物質(zhì)”等項目,以限制相關(guān)雜質(zhì)的含量.酸度：：當(dāng)乙基化進行不完全時，會與尿素縮合生成苯丙二酰脲。該分子酸性較苯巴比妥強，能使甲基橙指示劑顯紅色。《中國藥典》采用指示劑法控制酸性物質(zhì)的量.乙醇溶液的澄清度：苯巴比妥酸雜質(zhì)在乙醇溶液中的溶解度較小，而主成分苯巴比妥的溶解度大.供試品1。０ｇ,加乙醇5ml,加熱回流3ｍiｎ，溶液應(yīng)澄清。中性或堿性物質(zhì)：主要是合成中間體的副產(chǎn)物或分解產(chǎn)物，這類物質(zhì)為中性或堿性物質(zhì)，不溶于氫氧化鈉試液而溶于醚,利用這一特性將它們與主成分分離，再以重量分析法確定是否超過規(guī)定的限量。3．含量測定苯巴比妥原料藥《中國藥典》采用銀量法測定苯巴比妥的含量，以電位法指示終點。滴定反應(yīng)的原理與丙二酰脲類鑒別反應(yīng)的銀鹽反應(yīng)相同。滴定過程中生成可溶性的一銀鹽，化學(xué)計量點稍過，過量的銀離子與藥物形成難溶的二銀鹽。實際操作時,利用二銀鹽混濁指示終點不易準(zhǔn)確判斷，采用電位法指示。每1ml硝酸銀滴定液（0。1moｌ/L）相當(dāng)于２３。２２ｍg的苯巴比妥.苯巴比妥片采用HPLＣ法測定含量。采用離子抑制反相分配色譜,三乙胺為掃尾劑。ODＳ柱，甲醇－磷酸鹽緩沖液(４0：60)為流動相，檢測波長2１5ｎm.理論塔板數(shù)按苯巴比妥計不低于2０00。苯巴比妥片的分析1．檢查項目（１）含量均勻度的測定苯巴比妥片劑有1５mg、３０mg、100mｇ等不同規(guī)格。對小劑量規(guī)格（15mg、30mg)檢查含量均勻度。利用堿性條件（ｐＨ９。６)下巴比妥類發(fā)生一級電離，離子型具有紫外吸收，用紫外－可見分光光度法測定。5。苯巴比妥片（2）溶出度的測定苯巴比妥為難溶性藥物,照《中國藥典》附錄“溶出度測定法"操作,轉(zhuǎn)速為每分鐘50轉(zhuǎn),經(jīng)45min時取樣；采用與含量均勻度測定相同的方法測定溶出量，規(guī)定限度為標(biāo)示量的7５%。2.含量測定HＰLC法測定苯巴比妥片的含量。因巴比妥類藥物可互變異構(gòu)成烯醇式，具有弱酸性,采用離子抑制反相分配色譜，三乙胺為掃尾劑。ＯDS柱，甲醇-磷酸鹽緩沖液(40:6０)為流動相,檢測波長215nｍ。理論塔板數(shù)按苯巴比妥計不低于２０00。2。取代基反應(yīng)（１）苯環(huán)取代基的反應(yīng)（苯巴比妥的反應(yīng)）苯巴比妥與NaＮO2和H2ＳO4混合即顯橙黃色;苯巴比妥與HCHO—H2SO4產(chǎn)生玫瑰紅色。（2）烯丙基的反應(yīng)（司可巴比妥的反應(yīng)）司可巴比妥結(jié)構(gòu)中含有不飽和雙鍵,可與碘試液、溴水、KMnO4發(fā)生加成反應(yīng),使其顏色褪去。(3)硫元素的反應(yīng)（硫噴妥鈉的反應(yīng))硫噴妥鈉加Pb（Ac）2產(chǎn)生白色沉淀，加熱，沉淀變?yōu)楹谏腜bS。三、特殊雜質(zhì)檢查★《中國藥典》在苯巴比妥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)立了“酸度”、“乙醇溶液的澄清度”、“中性或堿性物質(zhì)"檢查項，以限制相關(guān)雜質(zhì)的含量。四、含量測定★★★1。銀量法苯巴比妥及其制劑采用。將供試品溶于適當(dāng)?shù)膲A溶液中以ＡgNO3直接滴定，生成可溶性一銀鹽，繼續(xù)滴定至出現(xiàn)不溶性二銀鹽,出現(xiàn)渾濁即為終點。優(yōu)點：操作方便,適合巴比妥類藥物分析缺點：近終點反應(yīng)較慢，不易觀察,且溫度影響較大,溫度升高,二銀鹽溶解度降低，結(jié)果偏低，反之,結(jié)果偏高。用甲醇作溶劑，電位法指示終點(銀—玻璃電極系統(tǒng))，可消除這一缺陷，ＣｈP85,90,95，２00０均采用此法.三、司可巴比妥鈉的分析1。鑒別方法(1）制備衍生物測定熔點利用司可巴比妥鈉鹽易溶于水，而其游離酸難溶于水的特點，制備游離酸沉淀，過濾，干燥后,測定熔點，進行鑒別。熔點約為９7℃。（2）與碘試液的反應(yīng)結(jié)構(gòu)中含有烯丙基，可與碘試液發(fā)生加成反應(yīng)，使碘試液的棕黃色消失。（3）紅外光譜法具有羰基、酰胺和烯丙基結(jié)構(gòu)的特征紅外光譜。(４)丙二酰脲類的鑒別反應(yīng)反應(yīng)原理和方法同苯巴比妥鑒別項下。2.檢查《中國藥典》規(guī)定,本能品除檢查“干燥失重”和“重金屬"外，需檢查“溶液的澄清度”和“中性或堿性物質(zhì)”。溶液的澄清度：鈉鹽極易溶于水,其游離酸劑及其相關(guān)雜質(zhì)在水中難溶，可通過檢查水溶液的澄清度加以控制。:供試品1.0g,加新沸過的冷水1０ml溶解后，溶液應(yīng)澄清。中性或堿性物質(zhì)：方法和原理同苯巴比妥。3．含量測定2。溴量法司可巴比妥鈉含有烯丙基，可與溴定量反應(yīng),用于含量測定。1mol的Br相當(dāng)于1／2mol的司可巴比妥鈉，1ml溴滴定液（0。1mol/L）相當(dāng)于13。０１mg的藥物.含量=100%式中,V0和V——空白試驗和樣品測定時消耗硫代硫酸鈉滴定液的體積，mｌ;C——硫代硫酸鈉滴定液的濃度，mol／L;W——供試品的取樣量,g3。紫外分光度法：注射用硫噴妥鈉采用.樣品加NaOH溶解→λmax304nm處測定，對照品選用硫噴妥.四、注射用硫噴妥鈉的分析１.鑒別制備衍生物測定熔點：原理同司可巴比妥鈉的鑒別。沉淀在１05℃干燥后，測定熔點為1５7℃-~16１℃.與銅鹽反應(yīng):供試品的吡啶溶液與銅吡啶試液反應(yīng)生成綠色沉淀，反應(yīng)速度稍慢。用于區(qū)別硫噴妥鈉與不含硫的巴比妥類藥物。與硝酸鉛試液的反應(yīng):分子結(jié)構(gòu)中含有硫元素，可在氫氧化鈉試液中與鉛結(jié)合，生成白色沉淀；加熱后,沉淀轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏蚧U。鈉鹽的鑒別：注射用硫噴妥鈉為硫噴妥的鈉鹽與碳酸鈉的混合物,具有鈉鹽的特征反應(yīng)。鈉鹽在無色火焰中燃燒,火焰顯鮮黃色.2。檢查本品為注射用無菌粉末，應(yīng)符合《中國藥典》附錄柱設(shè)劑注射劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。此外,還需檢查“無菌”、“干燥失重”、“硫酸鹽”和“堿度”.本品中加有無水碳酸鈉，水溶液顯堿性,故應(yīng)控制堿度：攻供試品0。5g,加水10mｌ溶解后,按“pＨ值測定法”測定，pH值應(yīng)為9。5-11.2。３。含量測定硫代巴比妥類藥物在酸性或堿性溶液中均有紫外吸收，強堿性溶液中,載在３04ｎm波長處有吸收峰。《中國藥典》以硫噴妥為對照品，用紫外分光光度法測定注射用硫噴妥鈉的含量。取樣量中硫噴妥鈉的量（ｍg）=（AＸ/ＡR）×CＲ×1。091×Ｄ×１0—3式中,ＣR為硫噴妥對照品溶液的濃度(μｇ/mｌ）；AX與AＲ分別為供試品溶液和對照品溶液的吸光度;1．091為硫噴妥鈉與硫噴妥的分子量的比值;Ｄ為稀釋系數(shù)倍數(shù)；１０-3系將μｇ換算成ｍg.【真題模擬與解析】一、A型題(最佳選擇題）１．常用巴比妥類藥物多為巴比妥酸的A．５-取代物Ｂ．1，5-取代物C．5，5-取代物D.1，5,5-取代物E.Ｃ2位為硫取代的硫代巴比妥答案［C]本題考點：巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)2.可與碘試液發(fā)生加成反應(yīng)的是Ａ．苯巴比妥B。硫噴妥鈉Ｃ.異戊巴比妥D．司可巴比妥E.戊巴比妥答案［D］本題考點：司可巴比妥含有雙鍵，能與碘液發(fā)生加成反應(yīng),使其褪色。3。可在氫氧化鈉試液中與鉛離子反應(yīng)的是A。硫噴妥鈉B．苯巴比妥Ｃ。苯巴比妥鈉D。異戊巴比妥Ｅ。司可巴比妥答案［A］本題考點：硫噴妥鈉分子結(jié)構(gòu)中含有硫元素，可與鉛離子生成沉淀。4．苯巴比妥含量測定的終點指示方法為A．淀粉指示劑Ｂ.電位法Ｃ.甲基橙指示劑D．酚酞指示劑Ｅ.以上都不對答案［B]本題考點:用銀量法測定苯巴比妥含量,終點渾濁不易準(zhǔn)確判斷,故而采用電位法指示終點以消除這一缺陷。5．可以區(qū)別含硫的巴比妥類藥物與不含硫的巴比妥類藥物的反應(yīng)是Ａ.與銀鹽的反應(yīng)B。烯丙基的反應(yīng)C．與銅鹽的反應(yīng)D。與亞硝酸鈉-硫酸的反應(yīng)E.與甲醛-硫酸的反應(yīng)答案[C]本題考點：巴比妥類藥物與吡啶-硫酸銅發(fā)生類似雙縮脲反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物，除含硫巴比妥顯綠色外其余顯紫堇色或生成紫色沉淀。６。下列關(guān)于巴比妥類藥物銀鹽溶解性的說法正確的是A．一銀鹽可溶于水，二銀鹽不溶B.一銀鹽不溶于水，二銀鹽可溶C。一銀鹽、二銀鹽均可溶于水D．一銀鹽、二銀鹽均不溶于水E.不確定答案［A］本題考點：巴比妥類藥物銀鹽反應(yīng)用于鑒別和含量測定的原理７.以紫外分光光度法測定注射用硫噴妥鈉含量時所選用的對照品是A.乙醇B。硫噴妥Ｃ。苯巴比妥D.巴比妥酸Ｅ.水楊酸答案［B］本題考點：注射用硫噴妥鈉含量測定方法。８.含硫的巴比妥類藥物與銅鹽反應(yīng)生成的沉淀物顯A．紅色Ｂ。紫色C.黃色D.綠色E．藍色答案[Ｄ］本題考點：參見第5題9.司可巴比妥鈉（分子量為260。27)采用溴量法測定含量時,每1ｍｌ溴滴定液(0。1ｍol/L）相當(dāng)于司可巴比妥鈉的毫克(mg)數(shù)為Ａ.1.３０１B。2．６01C．１3。０１D．2６.0１E。１8.01答案［C]本題考點:司可巴比妥鈉與溴反應(yīng)化學(xué)計量關(guān)系為1：2（鹵素以原子計),因此1ｍol溴相當(dāng)于1/2mol司可巴比妥鈉，已知其分子量為26０.２7，所以1mｌ溴滴定液(0.1mol/Ｌ)相當(dāng)于１×1０-3×0。１×1/２×26０。２7×103=１３。01ｍg的藥物。１0。銀量法測定巴比妥類藥物含量時，指示終點的方法為A.采用熒光黃指示劑B.采用鉻酸鉀指示劑C。剛剛形成可溶性一銀鹽D。剛剛形成難溶性二銀鹽E．采用永停法答案[D］本題考點:參見第4題二、B型題（配伍選擇題）[１1—１４]藥物與特征反應(yīng)A．苯巴比妥Ｂ.巴比妥酸C.硫噴妥鈉Ｄ．司可巴比妥鈉Ｅ．異戊巴比妥11．與碘試液反應(yīng)1２.與甲醛-硫酸的反應(yīng)1３．在氫氧化鈉液中與鉛離子反應(yīng)14．與亞硝酸鈉－硫酸的反應(yīng)答案［DACＡ］本題考點：巴比妥類藥物的取代基反應(yīng)三、X型題（多項選擇題)15.丙二酰脲鑒別反應(yīng)包括A．與碘試液的反應(yīng)Ｂ。與銀鹽的反應(yīng)C.與銅鹽的反應(yīng)Ｄ．與亞硝酸鈉－硫酸的反應(yīng)E．與甲醛-硫酸的反應(yīng)答案[ＢC］本題考點:BC為母核反應(yīng)，ACE均為取代基反應(yīng)。1６．巴比妥類藥物的鑒別方法有Ａ。與鋇鹽反應(yīng)生成白色化合物B．與鎂鹽反應(yīng)生成紅色化合物C.與銀鹽反應(yīng)生成白色沉淀D.與銅鹽反應(yīng)生成有色產(chǎn)物E．與氫氧化鈉反應(yīng)生成白色沉淀答案［CD］本題考點:巴比妥類藥物與重金屬銀、銅的反應(yīng)可用于鑒別。１７.巴比妥類藥物的母核巴比妥酸的性質(zhì)，是該類藥物分析方法的基礎(chǔ)，這些性質(zhì)包括A．在乙醇中溶解度小B。與銅鹽、銀鹽生成配合物C.不溶于氫氧化鈉試液而溶于醚Ｄ．堿性溶液中煮沸即分解,釋出氮Ｅ.具弱酸性，可與強堿成鹽成烯醇式答案［BDE］本題考點：巴比妥類藥物的理化性質(zhì)17。以下方法可用于司可巴比妥鈉鑒別的是A。制備衍生物測定熔點B．與碘試液的反應(yīng)C.紅外光譜法Ｄ。與甲醛－硫酸的反應(yīng)E。水解后的重氮化—偶合反應(yīng)答案[ABC］本題考點:司可巴比妥鈉的鑒別方法。１8。關(guān)于司可巴比妥鈉含量測定方法，下列說法正確的是：Ａ。用溴量法進行含量測定B。至滴定終點時，加淀粉指示液,繼續(xù)滴定至藍色消失Ｃ。用萘作為內(nèi)標(biāo)溶液D．滴定結(jié)果用空白試驗校正Ｅ.1ml的Ｂr2滴定液﹙0.05ｍol/L﹚相當(dāng)于0。05×2６0.２7=13．０1ｍg的司可巴比妥鈉﹙分子量為26０．２7﹚答案[ABＤE］本題考點：司可巴比妥鈉的含量測定方法,《中國藥典》采用溴量法進行含量測定.１９.關(guān)于注射用硫噴妥鈉的分析，下列說法正確的是A．具有鈉鹽的特征反應(yīng)，可用于進行鑒別Ｂ．結(jié)構(gòu)中含有烯丙基,可與碘試液發(fā)生加成反應(yīng)進行鑒別C．本品為注射用無菌粉末，檢查項目應(yīng)符合《中國藥典》附錄注射劑項下有關(guān)的各項規(guī)定Ｄ。還需檢查“無菌”、“干燥失重”、“硫酸鹽”、“堿度”E．《中國藥典》采用紫外分光光度法測定含量答案［ACＤＥ]本題考點:注射用硫噴妥鈉的鑒別、檢查和含量測定方法。第十一章磺胺類藥物的分析【考點進階詳解】一、化學(xué)結(jié)構(gòu)★★兩個藥物均含有芳伯氨基，因此可以發(fā)生重氮化反應(yīng)和重氮化-偶合反應(yīng),用于含量測定和鑒別。磺酰胺基氮原子上的氫受磺酰基吸電子效應(yīng)的影響，比較活潑,可與銀、銅、鈷等金屬離子生成難溶性沉淀.二、磺胺甲噁唑及其制劑的分析1。鑒別★★★（1)芳香第一胺的反應(yīng)本類藥物具有芳伯氨基,可用重氮化－偶合反應(yīng)鑒別.供試品中加入稀鹽酸、NaNO2溶液，再滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴,生成橙黃色至猩紅色沉淀。(2）與CｕSO4反應(yīng)生成鹽磺胺甲惡唑生成草綠色沉淀。(3)紅外光譜法分子結(jié)構(gòu)中含有磺酰胺、芳胺、惡唑環(huán)及苯環(huán)，其紅外光譜中的特征吸收峰歸屬如下：波數(shù)(cm－1）震動類型歸屬3460,336０，３2８0υＮ-H胺，磺酰胺161５，15９2，1497,14６3υC=CυＣ=N噁唑，苯環(huán)１360υC-N芳胺1300，1１５0υS＝O磺酰胺９２0υＮ－Ｏ噁唑2。檢查酸度:供試品1。0g，加水1０ml,搖勻，pH值應(yīng)為4。0－6。0。堿性溶液的澄清度與顏色：檢查不溶于堿性溶液的雜質(zhì)和有色雜質(zhì)。供試品１。0g，加氫氧化鈉試液5ml與水2０ｍl溶解后,溶液應(yīng)澄清無色;如顯混濁，與1號濁度標(biāo)準(zhǔn)比較，不得更濃；如顯色，與對照液（黃色3號標(biāo)準(zhǔn)比色液，稀釋一倍)比較，不得更深。有關(guān)物質(zhì):取供試品,加乙醇-濃氨溶液（9：1）制成每1ml中含10mg的溶液,作為供試品溶液；精密量取適量,稀釋成每1ｍl含50μg的溶液，作為對照溶液。點硅膠板，以氯仿-甲醇—二甲基甲酰胺(20：2：１)為展開劑,乙醇制對二甲氨基苯甲醛為顯色劑,供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點,與對照液的主斑點比較,不得更深.熾灼殘渣：按“熾灼殘渣檢查法”檢查，遺留殘渣不得超過0.1%。3．含量測定★磺胺甲噁唑原料藥采用NaNO2滴定法測定含量，永停滴定法指示終點。在鹽酸酸性條件下進行，滴定前加KBr以加快反應(yīng)速度，滴定時將滴定管尖端插入液面下2/3處，用ＮaＮO２迅速滴至近終點，再將滴定管提出液面,用少量水沖洗尖端,洗液并入溶液中,繼續(xù)緩慢滴至終點。1mol的亞硝酸鈉相當(dāng)于1ｍｏl的磺胺甲噁唑，磺胺甲噁唑的分子量為253。28,所與滴定度為２5．３3g。磺胺甲噁唑片的含量測定也采用本法。4.復(fù)方磺胺甲噁唑片的分析復(fù)方磺胺甲噁唑片由磺胺甲噁唑(ＳMZ）和甲氧芐啶(TＭP)組成。OCＨ３Ｈ3COＨ3ＣOＮNNH2NH2甲氧芐啶（＿＿＿_＿＿_＿__＿＿１)。鑒別沉淀反應(yīng)：含氮雜環(huán)具有弱堿性，可與碘生成沉淀。本品細(xì)粉加稀硫酸微熱溶解后,放冷,濾過，濾液加碘試液即生成棕褐色沉淀。薄層色譜法：可同時鑒別兩種成分。磺胺甲噁唑和甲氧芐啶結(jié)構(gòu)中均具有苯環(huán)，在25４nm處有較強紫外吸收,因此在硅膠GF254薄層板上可形成熒光淬滅的暗斑，以供檢測：在硅膠GF2５4薄層板,三氯甲烷—甲醇-二甲基甲酰胺（20：2:1）為展開劑,254nm下檢視，供試品溶液所顯示兩種成分的主斑點的顏色與位置,應(yīng)與對照品溶液的主斑點相同。高效液相色譜法:用于測定含量，可同時進行鑒別。在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液兩主峰的保留時間應(yīng)與對照品溶液相應(yīng)的兩主峰的保留時間一致。芳香第一胺的反應(yīng):用于鑒別磺胺甲噁唑。原理和方法同原料藥。(2）．檢查除片劑的常規(guī)檢查項目外，《中國藥典》要求檢查本品的溶出度。（３).含量測定《中國藥典》采用高效液相色譜法測定復(fù)方磺胺甲噁唑片的含量。ＯDS柱，以水-乙腈-三乙胺（７9９：２00：1,調(diào)pH5。９）為流動相，檢測波長為240nｍ.理論塔板數(shù)按甲氧芐啶計不低于４0０0，磺胺甲噁唑峰與甲氧芐啶峰的分離度應(yīng)符合要求。三、磺胺嘧啶及其制劑的分析1.鑒別與硫酸銅試液的反應(yīng):磺胺嘧啶與硫酸銅反應(yīng)生成黃綠色沉淀,放置后變?yōu)樽仙磻?yīng)原理和方法均與磺胺甲噁唑相同。紅外光譜法:分子結(jié)構(gòu)中含有磺酰胺、芳胺、嘧啶環(huán)及苯環(huán),其紅外光譜中的吸收峰歸屬如下:波數(shù)（cm-1）震動類型歸屬3420，３350，32５５υN-H胺，磺酰胺1６50υN-H胺158０，1490，14４0υC=CυC=Ｎ嘧啶，苯環(huán)１３2５，１155υS=O磺酰胺芳香第一胺的反應(yīng):反應(yīng)原理及方法均與磺胺甲噁唑相同。2.檢查酸度：取供試品２．0ｇ，加水1０0ml，置水浴中振搖加熱１0ｍin，立即放冷,濾過;分取濾液2５ml，加酚肽指示液2滴與氫氧化鈉滴定液（0。1ｍｏl／L)0。2０ml，應(yīng)顯粉紅色。堿性溶液滴澄清度與顏色:取供試品2．０g，加氫氧化鈉試液1０ml溶解后，加水至25ml，溶液應(yīng)澄清無色;如顯色，與黃色3號標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深.此外,檢查氯化物（0.01%）、熾灼殘渣（0。１％)、重金屬(百萬分之十)。3.含量測定磺胺嘧啶原料藥采用亞硝酸鈉滴定法測定含量，《中國藥典》采用永停滴定法指示終點.每１mｌ亞硝酸鈉滴定液（0.1ｍoｌ/L）相當(dāng)于2５．03mg的磺胺嘧啶(C1０H10Ｎ4O2S）.磺胺嘧啶片也采用本法測定.４。磺胺嘧啶片溶出度的測定取本品，照溶出度測定法(第二法)，在254nm的波長出測定吸光度，按磺胺嘧啶的吸收系數(shù)(１％１ｃmＥ)為866計算每片的溶出量。限度為標(biāo)示量的70%，應(yīng)符合規(guī)定。【真題模擬與解析】一、A型題（最佳選擇題)1．磺胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)是Ａ．苯磺酰胺B.鄰氨基苯磺酰胺C。鄰硝基苯磺酰胺D。對氨基苯磺酰胺E。對硝基苯磺酰胺答案［D]本題考點：磺胺類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)2．磺胺嘧啶原料藥含量測定所用方法A．亞硝酸鈉滴定法B．雙相滴定法C。雙波長分光光度法D．非水滴定法Ｅ．紫外分光光度法答案［A］答案解析:磺胺嘧啶含有芳伯胺基，能與NａNO2定量反應(yīng).二、Ｂ型題(配伍選擇題）［3—6]磺胺甲噁唑紅外光譜特征吸收峰歸屬A。1615，1592,1497,1463Ｂ.1３60Ｃ.1300，１1５0Ｄ.920Ｅ．346０，3３6０，32803．芳胺4.噁唑5．磺酰胺6。噁唑，苯環(huán)答案［ＢDCA]三、X型題(多項選擇題)7．下列英文縮寫與漢語名稱對應(yīng)正確的是A。SMZ-甲氧芐啶B．SMZ-磺胺甲噁唑C．ＴMP－甲氧芐啶D.TMＰ-磺胺甲噁唑Ｅ。ＳD—磺胺嘧啶答案［BCE］８．《中國藥典》收載的磺胺制劑有A.復(fù)方磺胺甲噁唑片B．磺胺嘧啶片C．復(fù)方磺胺甲噁唑注射液D．復(fù)方磺胺嘧啶注射液Ｅ。磺胺甲噁唑片答案［ＡBE］９．關(guān)于磺胺嘧啶含量測定的終點指示，下列說法正確的是A．用永停滴定法指示終點B。終點前，電路上無電流通過C．近終點時,加入淀粉—碘化鉀指示劑D．終點時電路中有電路通過，電流計指針突然偏轉(zhuǎn)，不再回復(fù),而指示終點E。終點時溶液中微過量的亞硝酸及其分解產(chǎn)物NＯ為可逆電對，在電極上發(fā)生氧化還原反應(yīng)答案[ABDE］本題考點：磺胺嘧啶含量測定的終點指示原理１0．關(guān)于磺胺甲噁唑含量測定，下列說法正確的是A。在鹽酸酸性條件下進行B.使用亞硝酸鈉滴定液滴定C．近終點時，不可將滴定管提出液面Ｄ．為加快反應(yīng)速度,滴定前應(yīng)加入溴化鉀作催化劑Ｅ.為避免亞硝酸鈉在酸性條件下生成的亞硝酸揮發(fā)和分解,滴定時應(yīng)將滴定管尖端插入液面下2／3處答案[ABＤE］答案解析：近終點時須將滴定管提出液面,用少量水沖洗尖端，洗液并入溶液中,繼續(xù)緩慢滴至終點。11。關(guān)于復(fù)方磺胺甲惡唑片的含量測定方法，下列說法正確的是Ａ．制劑中的磺胺甲惡唑含量可不經(jīng)分離用亞硝酸鈉滴定法直接測定,但甲氧芐啶含量的測定受磺胺甲惡唑的干擾Ｂ。若采用非水溶液滴定法測定，由于磺胺甲惡唑也具有弱堿性，可干擾測定C．制劑中兩組分的紫外吸收圖譜彼此重疊，需采用雙波長法測定,但重現(xiàn)性較差D．《中國藥典》采用高效液相色譜法測定復(fù)方磺胺甲惡唑片的含量E．HPLC時,用磺胺甲惡唑?qū)φ掌泛图籽跗S啶對照品答案［AＢCＤE］本題考點:復(fù)方磺胺甲惡唑片的含量測定方法。第十二章雜環(huán)類藥物的分析【考點進階詳解】一、異煙肼的分析★★★1．結(jié)構(gòu)與性質(zhì)ＮCONHNH2結(jié)構(gòu)中有吡啶環(huán)，環(huán)上的氮原子具有弱堿性，可以和某些重金屬離子形成沉淀,也可以采用非水滴定法測定含量。異煙肼的酰肼基具有還原性，可以和氨制硝酸銀試液等氧化試劑反應(yīng),用于鑒別和含量測定,酰肼基還可以和某些含羰基的試劑發(fā)生縮合反應(yīng)。2．鑒別制備衍生物測定熔點：異煙肼的酰肼基可以和含羰基的試劑如香草醛發(fā)生縮合反應(yīng)，生成異煙腙衍生物,然后測定熔點。其熔點為2２８℃-231℃,熔融同時分解。香草醛異煙腙黃色與氨制硝酸銀試液的反應(yīng)：異煙肼的酰肼基具有還原性，可還原硝酸銀中的Ag+成單質(zhì)銀生成銀鏡.紅外分光光度法:《中國藥典》采用紅外分光光度法鑒別本品，要求本品的紅外光吸收圖譜與對照的圖譜一致。3。檢查一般雜質(zhì)檢查需檢查的項目有“溶液的澄清度與顏色"、“干燥失重"、“重金屬”等。游離肼的檢查:異煙肼中的游離肼可由合成時的原料引入，也可在儲存過程中降解產(chǎn)生。肼是一種致癌物質(zhì),因此國內(nèi)外藥典均要求對異煙肼原料藥及其制劑中的游離肼進行檢查。采用TLＣ法,在硅膠G板上，以異丙醇-丙酮(3：2)為展開劑，噴以乙醇制對二甲氨基苯甲醛試液，在供試品主斑點前方與對照品溶液主斑點相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點。異煙肼斑點呈棕黃色，Rf值約為0.2１,游離肼斑點呈鮮黃色，Rf值約為0。3,以不出現(xiàn)游離肼斑點為合格。肼的檢測限為0。1μｇ,控制限量為０。02%。4。含量測定《中國藥典》采用溴酸鉀法測定.操作:異煙肼在強酸性條件下用KＢrO３標(biāo)準(zhǔn)液滴定，甲基橙指示劑,終點為粉紅色到無色.等當(dāng)點后稍過量ＫBrO3:KＢrＯ3+5KBr+6HCl→Br2+６KＣl+3H2O討論:ａ．緩緩滴定并充分振搖，防止局部濃度過高,終點提前；ｂ．到終點后,補加一滴指示劑，如顏色褪去即到,否則未到終點；c．化學(xué)計量關(guān)系為3/2,每1ml的溴酸鉀滴定液(0.0１667moｌ/L)相當(dāng)于3.429mｇ的異煙肼（Ｃ６H７N3O);d。異煙肼的原料藥、片劑、注射劑均采用本法測定含量。二、硝苯地平的分析Ｈ3CNCH3H3ＣOOCＨ３NＯ2OOH硝苯地平１.鑒別方法與氫氧化鈉試液的反應(yīng):取本品25ｍg，加丙酮1mｌ熔解，加2０％氫氧化鈉溶液３－5滴，振搖,溶液顯橙紅色。紫外分光光度法:分子結(jié)構(gòu)中有共軛體系，有特征性的紫外吸收，可供鑒別：本品適量,三氯甲烷熔解,用無水乙醇制成每1ml含１５μg的溶液，紫外-可見分光光度法測定，在237nm波長處有最大吸收,在320-３５5nm的波長處有較大的寬幅吸收。紅外分光光度法：《中國藥典》采用紅外分光光度法鑒別本品,要求其紅外光吸收圖譜與對照的圖譜一致.2。檢查有關(guān)物質(zhì)檢查：硝苯地平遇光極不穩(wěn)定，分子內(nèi)部易發(fā)生光化學(xué)歧化作用,降解為硝苯吡啶衍生物（雜質(zhì)A）及亞硝苯吡啶衍生物（雜質(zhì)Ｂ）。本品在生產(chǎn)和貯存過程中均可能引入上述雜質(zhì),國內(nèi)外藥典均要求檢查該類雜質(zhì)。《中國藥典》采用高效液相色譜法：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇—水（3:２）為流動相，檢測波長為2３5ｎm.供試品中如有雜質(zhì)色譜峰，其峰面積不得大于兩雜質(zhì)對照品的面積;如有其他雜質(zhì)峰,單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照品中硝苯地平的峰面積；雜質(zhì)總量不得大于0.5％。按以上方法檢查，雜質(zhì)A和B的限量分別為0．2％,雜質(zhì)總量不得大于0．5%。檢查時,應(yīng)注意避光操作。3。含量測定硝苯地平具有還原性，可在酸性溶液中以鄰二氮菲為指示劑，用鈰量法直接測定。終點前,鄰二氮菲與指示液中的Ｆe2+形成鄰二氮菲亞鐵配位離子，顯橙紅色,終點時，Ce4＋將指示劑中的Fe2+氧化成Ｆe3+使橙紅色消失而指示終點。1mol的硝苯地平消耗2mol的硫酸鈰，硝苯地平的分子量為３4６.３４，所以1ｍl硫酸鈰滴定液（0．1mol/L）相當(dāng)于1７.32mg的硝苯地平(C17H18Ｎ2Ｏ6）.三、諾氟沙星及其制劑的分析１．結(jié)構(gòu)與性質(zhì)諾氟沙星為喹諾酮類藥物，具有4—喹諾酮—3—羧酸母核結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)中3位有羧基，吡嗪環(huán)4位上的氮原子顯堿性，故為兩性化合物.６位上有氟原子取代,經(jīng)有機破壞后，顯無機氟離子的特有反應(yīng)，可供鑒別。分子結(jié)構(gòu)中有共軛體系,對光、氧化劑均不穩(wěn)定,且在２78nｍ波長處有紫外特征吸收，可用于鑒別和含量測定。2.鑒別ＴLC法:取本品與諾氟沙星對照品適量,加三氯甲烷—甲醇（１：１)分別制成2．5mg/ｍｌ.吸取上述兩種溶液各1０μl,分別點于同一硅膠H薄層板上，以三氯甲烷—甲醇-濃氨溶液（１5:１0:3）為展開劑，展開,晾干，置紫外光燈（3６５nm)下檢視.供試品所顯主斑點的熒光和位置應(yīng)與對照品溶液的主斑點的熒光和位置相同.HPＬC法：供試品溶液主峰的保留時間應(yīng)與對照品溶液的主峰的保留時間一致。3．檢查有關(guān)物質(zhì)主要是在生產(chǎn)過程中引入的多種中間體雜質(zhì)。《中國藥典》采用ＨＰLC法檢查,方法為取本品適量,加０.1moｌ/L鹽酸溶液(每12．5mg加１ml）使溶解,用流動相稀釋制成每1ml中約含０.1ｍg的溶液，作為供試品溶液;精密量取適量,加流動相稀釋制成每1mｌ中約含諾氟沙星１μg的溶液作為對照品溶液。照含量測定項下的色譜條件，精密量取供試品溶液與對照品溶液各20μl,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主成份峰的保留時間的2。5倍，供試品溶液的色譜圖中如顯雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的（1。0％）.４。含量測定高效液相色譜法:十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,０。025mol/L磷酸溶液(用三乙胺調(diào)pH３。0±０.01）-乙腈(8７：１3)為流動相，流速0。８ml／ｍin，檢測波長278nm,理論板數(shù)按諾氟沙星峰計算應(yīng)不低于2000，與相鄰峰分離度符合要求。測定方法：取本品約25ｍg,精密稱定放置１00ml的量瓶中，加０．1mol/L鹽酸溶液2ｍl，使溶解后,加水稀釋至刻度,搖勻，精密量取5ｍｌ至5０ml量瓶中,加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取諾氟沙星，同法測定,按外標(biāo)法測定,以峰面積測定供試品中諾氟沙星的含量.諾氟沙星膠囊、滴眼液也采用本法測定。諾氟沙星軟膏和乳膏的含量測定采用紫外分光光度法。５.諾氟沙星膠囊溶出度檢查按溶出度測定法第二法（槳法）測定。四、鹽酸氯丙嗪和奮乃靜及其制劑的分析★★★1。結(jié)構(gòu)與性質(zhì)鹽酸氯丙嗪奮乃靜共同點：a.硫王氮雜蒽母核；b.含兩個雜原子的多環(huán)共軛體系，具有UV吸收,可用ＵV測定；c。S易被氧化,生成砜或亞砜，可用于分光光度或鈰量法測定;d。與金屬離子絡(luò)合,生成有色物，可用比色法測定不同點:Ｒ，Ｒ'取代基不同。2．鑒別（１）紫外分光光度法鹽酸氯丙嗪：濃度為5μg/ｍl時在2５4nm與306nm有最大吸收,在２54ｎm的吸收度約為0.４6。奮乃靜:濃度為7μｇ/ml時在258nｍ有最大吸收，吸收度約為0。65。（2）氧化反應(yīng)鹽酸氯丙嗪:加硝酸5滴,即顯紅色，漸變?yōu)榈S色。奮乃靜:加鹽酸加熱至8０℃,加氫氧化鈉，即顯深紅色。（3)Ｃｌ—的反應(yīng)鹽酸氯丙嗪：a。在硝酸酸性下與AgNO3反應(yīng)生成白色凝乳狀沉淀,分離，沉淀加氨試液即溶解,在加硝酸，沉淀復(fù)出現(xiàn).ｂ.與少量MnO2混勻,用硫酸潤濕,緩緩加熱，生成氯氣，使?jié)駶櫟牡饣浀矸墼嚰堬@藍色。（4）紅外分光光度法《中國藥典》規(guī)定鹽酸氯丙嗪和奮乃靜的紅外吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜一致。3．檢查鹽酸氯丙嗪①溶液的澄清度與顏色前者主要是控制其中游離的氯丙嗪,后者主要是控制其中氧化產(chǎn)物的量.檢查時配成以水為溶劑,濃度為5０．0mg／ｍl的溶液，如顯渾濁,濁度不能超過1號比濁液，顏色不能超過黃色３號或黃綠色３號標(biāo)準(zhǔn)比色液。②有關(guān)物質(zhì)檢查主要是控制合成的原料氯酚噻嗪和間氯二苯胺.采用TLC的高低濃度對比法檢查，規(guī)定雜質(zhì)的總量不得超過1。0％。奮乃靜①溶液的澄清度與顏色檢查時配成以水為溶劑,濃度為2０。0ｍg/ml的溶液,要求溶液應(yīng)澄清,其顏色不能超過黃色2號標(biāo)準(zhǔn)比色液。②有關(guān)物質(zhì)也采用TLC的高低濃度對比法檢查，規(guī)定雜質(zhì)的總量不得超過３.0％。4.含量測定（1）非水堿量法只能滴定1０位取代基上的N原子，母核上的N原子堿性極弱,不能被滴定。鹽酸氯丙嗪、奮乃靜原料藥采用.鹽酸氯丙嗪由于為鹽酸鹽，滴定前加入一定量的醋酸汞試液.奮乃靜注射液加ＮａOH堿化后，用氯仿提取然后揮干氯仿,再按原料藥的方法測定。（2）紫外分光光度法鹽酸氯丙嗪片加鹽酸(9→1０00)70ml溶解，配成一定濃度，于２5４nm處測定吸收度，按１％1ｃｍE＝915計算。鹽酸氯丙嗪注射液由于抗氧劑維生素Ｃ在2４3ｎm有最大吸收，對測定有干擾，故選擇測定波長為306nｍ，此時維生素Ｃ不干擾。奮乃靜片加鹽酸—乙醇溶液７0mｌ溶解,配成一定濃度，同時另取奮乃靜對照品配成5μｇ/ｍl的對照品溶液，取上述兩種溶液于2５８nm處測定吸收度。五、地西泮和奧沙西泮及其制劑的分析（1）．結(jié)構(gòu)與性質(zhì)二氮雜卓環(huán)上氮原子具有堿性,可用非水滴定法測定含量，也可以和某些有機堿沉淀試劑反應(yīng)。奧沙西泮堿性較弱。兩種藥物有較長的共軛體系，具有明顯紫外吸收,溶于硫酸后在36５nm紫外光下可顯示出不同顏色的熒光.（2).鑒別與硫酸的反應(yīng):硫酸溶解后,在紫外光燈(36５nm）下檢視，地西泮顯黃綠色熒光.紫外分光光度法：地西泮加0。5%硫酸的甲醇溶液,制成每1ｍl中含5μg的溶液,在242nm、28４nm、366nｍ的波長處應(yīng)有最大吸收;在242nｍ波長處的吸光度約為0.5１,在28４nｍ波長處的吸光度約為0.23.奧沙西泮在229nm的波長處有最大吸收，在31５ｎｍ的波長處有較弱的最大吸收。紅外分光光度法：本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜一致。氯化物:氯原子與苯環(huán)以共價鍵相連,結(jié)合較牢，須用氧瓶燃燒法破壞,使有機結(jié)合的氯轉(zhuǎn)化為游離的Cl－,以5％的氫氧化鈉溶液為吸收液，用稀硝酸酸化，并緩緩煮沸2ｍin,溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng).水解后的重氮化偶合反應(yīng):奧沙西泮在鹽酸酸性條件下,緩緩煮沸，可水解生成二苯甲酮衍生物,具有芳伯氨基,與亞硝酸鈉溶液和堿性β－萘酚試液發(fā)生重氮化—偶合反應(yīng)，產(chǎn)生橙紅色沉淀，放置色漸變暗。(3)．有關(guān)物質(zhì)的檢查地西泮：在合成過程中,若N1甲基化不完全，可能產(chǎn)生雜質(zhì)去甲基安定,分解又可產(chǎn)生2－甲氨基—５－氯二苯酮等雜質(zhì)。《中國藥典》用HＰLC法,采用不加校正因子的主成分自身對照法檢查上述有關(guān)雜質(zhì)。十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇—水（85:15）為流動相，檢測波長為254ｎm.供試品溶液色譜峰圖中如有雜質(zhì)峰,各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照液主峰面積的3／１0。奧沙西泮：《中國藥典》用薄層色譜法檢查,在硅膠ＨF25４薄層板上,以三氯甲烷—甲醇(１00：１0）為展開劑，置2５４nm紫外燈下檢視.采用供試品溶液自身稀釋對照法.(4)．含量測定地西泮：原料藥采用非水滴定法測定;地西泮片劑采用紫外分光光度法測定，用吸收系數(shù)法計算；地西泮注射劑處方中由于有苯甲酸、苯甲酸等鈉附加劑，對UV法測定有干擾,故而中國藥典采用HPLＣ法測定其含量。用ODS柱,甲醇-水(70：３０）為流動相,檢測波長為２54nｍ.理論塔板數(shù)按地西泮峰計算應(yīng)不低于150０，地西泮和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于１.5.在此色譜條件下藥物和分解產(chǎn)物、附加劑等可完全分離。以萘為內(nèi)標(biāo),用內(nèi)標(biāo)法加校正因子測定地西泮的含量。奧沙西泮:紫外分光光度法測定,本品1５ｍg精密稱定，置２0０ml量瓶中，加乙醇15０ml，置溫水浴中加熱，并振搖使奧沙西泮溶解，放冷，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻,在２２９nm的波長處測定吸光度；另精密稱取奧沙西泮對照品約15ｍg，同法測定；計算即得.奧沙西泮片測定和原料藥相同.（5)。地西泮片劑的檢查有關(guān)物質(zhì)：片劑中的有關(guān)物質(zhì)主要為降解產(chǎn)物,如2－甲氨基—５-氯二苯酮等，采用薄層色譜自身稀釋對照法檢查.硅膠GF254薄層板，乙酸乙酯-己烷（1：1)為展開劑,２54nm紫外燈下檢視,供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點，于對照溶液的主斑點比較不得更深。雜質(zhì)限量為0.５％.地西泮注射劑中２—甲氨基-5-氯二苯酮采用HPLC法檢查含量均勻度:采用紫外分光光度法測定每片的含量，按“含量均勻度檢查法”,分別計算A和S值，按判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷，應(yīng)符合要求.溶出度測定:照“溶出度測定法”第一法（轉(zhuǎn)籃法)檢查,以鹽酸溶液（9→10００）800ml作為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速為每分鐘１０0轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)２0mｉｎ時,取溶液約１０mｌ，濾過，取續(xù)濾液在２４2nm波長處測定吸光度,按地西泮的吸收系數(shù)（1％1cmE)為１0１8計算每片的溶出量.限度為標(biāo)示量的７5％，應(yīng)符合規(guī)定。(6).奧沙西泮片劑的檢查溶出度:照“溶出度測定法”第二法﹙槳法﹚測定，以鹽酸溶液﹙９→10０0﹚１0０0mｌ為溶出介質(zhì)，經(jīng)６０ｍiｎ時取樣,用紫外分光光度法測定藥物的溶出量，限度為標(biāo)示量的７０％。【真題模擬與解析】一、Ａ型題（最佳選擇題）1.下列藥物能通過氯化物的鑒別反應(yīng)鑒別的是A．硝苯地平B．諾氟沙星C．地西泮D。異煙肼E．司可巴比妥答案［C]本題考點:地西泮的鑒別方法。2．異煙肼中游離肼的控制限量為A。０。０2%B。0。05％C.０.０5μgＤ.0.1μgＥ．０.２μg答案［A］3。下列藥物中，哪一個藥物加氨制硝酸銀能產(chǎn)生銀鏡反應(yīng)A．地西泮B．阿司匹林C。異煙肼Ｄ.苯佐卡因E。苯巴比妥答案[C］本題考點：異煙肼的酰肼基具有還原性.４。下列藥物的鑒別或含量測定時沒有利用其還原性的是A.硝苯地平B。異煙肼Ｃ.奮乃靜D．鹽酸氯丙嗪E。奧沙西泮答案［E］本題考點:本章重點藥物的鑒別方法和含量測定方法。5．硫酸—熒光反應(yīng)為地西泮的特征鑒別反應(yīng)之一,地西泮加硫酸溶解后，在紫外光下顯A.紅色熒光B。澄色熒光C．黃綠色熒光D．淺藍色熒光E．紫色熒光答案［Ｃ］本題考點：地西泮的硫酸—熒光反應(yīng)顏色特征。6．中國藥典(20０5版）地西泮原料藥中2—甲氨基－５－氯二苯酮的檢查方法為Ａ.薄層色譜法B．高效液相色譜法Ｃ.氣相色譜法Ｄ。沉淀法Ｅ．顯色法答案［A]本題考點：原料藥中2－甲氨基-5－氯二苯酮的檢查方法為TLC法,注射液中2-甲氨基－５－氯二苯酮的檢查方法為ＨＰLＣ法。二、B型題（配伍選擇題）［7—1０]藥物與含量測定法Ａ。直接滴定法B.非水溶液滴定法C．氧化還原滴定法D．紫外分光光度法E.高效液相色譜法7.異煙肼8。奮乃靜注射液9。鹽酸氯丙嗪片1０。地西泮注射液答案［CBDＥ]三、X型題(多項選擇題)1１．諾氟沙星的雜質(zhì)檢查項目包括A．有關(guān)物質(zhì)Ｂ．溶液的澄清度C.干燥失重D．熾灼殘渣E．重金屬答案［ABCDＥ］本題考點:諾氟沙星的雜質(zhì)檢查項目包括有關(guān)物質(zhì)和一般雜質(zhì)檢查。12。異煙肼可采用氧化還原滴定法測定含量，常用的方法有A.剩余溴量法Ｂ.剩余碘量法C．四氮唑比色法D．汞量法E。溴酸鉀法答案[AＢＥ]本題考點:異煙肼的酰肼基有還原性，可采用氧化還原滴定法測定含量。四氮唑比色法、汞量法分別為甾體激素、青霉素的含量測定方法。13．可用薄層色譜法進行雜質(zhì)檢查的是Ａ.異煙肼B．奮乃靜Ｃ．地西泮片劑D.奧沙西泮E．鹽酸氯丙嗪答案［ABCＤE]本題考點：雜環(huán)類藥物的雜質(zhì)檢查方法14．溴酸鉀法測定異煙肼含量的方法是A．屬于氧化還原滴定B．在鹽酸酸性條件下進行滴定C．采用永停滴定法指示終點Ｄ．１mol的溴酸鉀相當(dāng)于3/2mｏl的異煙肼E.還可以用于異煙肼制劑的含量測定答案［ABDE]答案解析：溴酸鉀法測定異煙肼含量使用甲基橙作指示劑，溴酸鉀氧化甲基橙使粉紅色消失而指示終點。第十三章生物堿類藥物的分析【考點進階詳解】一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)★★1.苯烴胺類N原子連接在苯環(huán)的烴鏈上，堿性較強，易與酸成鹽。以鹽酸麻黃堿為例：麻黃堿的N原子在側(cè)鏈上，堿性較強，易與酸成鹽,可采用非水滴定法測定含量.分子中有不對稱C原子，因此具有旋光性。麻黃中存在的麻黃堿為左旋體,鹽酸麻黃堿的比旋光度為－33o～－35.5o。２．托烷類以硫酸阿托品為例:阿托品是由托烷衍生的醇（莨菪醇)和莨菪酸縮合而成的酯類生物堿。具有酯類結(jié)構(gòu)，易水解，水解產(chǎn)物可用于鑒別。分子結(jié)構(gòu)中,N原子位于橋環(huán)上,堿性較強，易與酸成鹽；雖具有不對稱C原子，但為外消旋體,故無旋光性。３。喹啉類以硫酸奎寧為例：奎寧為喹啉衍生物，其結(jié)構(gòu)可分為喹啉環(huán)和喹核堿兩個部分.喹核堿含脂環(huán)氮，堿性強，可與硫酸成鹽；喹啉環(huán)上的氮系芳環(huán)氮，堿性較弱,不能與硫酸成鹽.硫酸奎寧在稀硫酸溶液中顯藍色熒光;具旋光性，為左旋體。４。異喹啉類以鹽酸嗎啡為例：鹽酸嗎啡為異喹啉類生物堿，分子中含有酚羥基和叔胺基團,屬兩性化合物，但堿性略強。５。吲哚類以硝酸土的寧為例：士的寧分子中含有兩個堿性強弱不同的氮原子,與羰基碳相連的的Ｎ原子堿性較弱，故士的寧堿基與一分子硝酸成鹽.二、鑒別★★★１．雙縮脲反應(yīng)芳環(huán)側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)的特征反應(yīng)鹽酸麻黃堿在堿性條件下與ＣuSO4反應(yīng)，Cu2+與仲胺基形成紫堇色配位化合物,加乙醚后,醚層顯紫紅色，水層顯藍色.方法:取本品約10mg，加水1ｍｌ溶解后，加硫酸銅試液2滴與20％的氫氧化鈉溶液1ｍl,即顯藍紫色；加乙醚1ml,振搖后，放置,乙醚層即顯紫紅色，水層變?yōu)樗{色.2．Vｉtaｌi反應(yīng)托烷類生物堿的特征反應(yīng)托烷類生物堿（硫酸阿托品、氫溴酸山莨菪堿)與發(fā)煙硝酸共熱，即得黃色的三（或二）硝基衍生物,冷后，加醇制KOＨ溶液或固體少許，即顯深紫色。３．綠奎寧(thａlleiaqllin）反應(yīng)含氧喹啉衍生物的特征反應(yīng)該反應(yīng)為硫酸奎寧的專屬鑒別反應(yīng)。反應(yīng)在微酸性水溶液中進行，加溴試液和氨溶液，即顯翠綠色.4.與甲醛—硫酸試液的（Marquiｓ）反應(yīng)嗎啡生物堿的特征性反應(yīng)Mａrｑuiｓ反應(yīng)系含酚羥基的異喹啉類生物堿的專屬鑒別反應(yīng)。改類藥物遇甲醛—硫酸試液可形成具有醌式結(jié)構(gòu)的有色化合物。5。與鉬硫酸試液的反應(yīng)嗎啡生物堿的特征性反應(yīng)鹽酸嗎啡加鉬硫酸試液，即顯紫色，繼變?yōu)樗{色，最后變?yōu)樽鼐G色。６.與鐵氰化鉀試液的反應(yīng)嗎啡具有弱還原性,其水溶液加稀鐵氰化鉀試液，嗎啡被氧化生成偽嗎啡，而鐵氰化鉀被氧化還原為亞鐵氰化鉀,亞鐵氰化鉀再與試液中的三氯化鐵反應(yīng)生成普魯士藍。(注:可待因無還原性,不能還原鐵氰化鉀，故此反應(yīng)可以用來區(qū)分嗎啡和可待因。）7。與重鉻酸鉀的反應(yīng)硝酸士的寧的反應(yīng)取硝酸士的寧約０.5ｍg置蒸發(fā)皿中，加硫酸1滴溶解后，加重鉻酸鉀結(jié)晶一小粒,周圍即顯紫色。8。鹽根的反應(yīng)(可以利用鹽根Ｃl—、ＳO42—、NO３－的反應(yīng)來鑒別）①SO4２—的反應(yīng)：1)取供試品試液，加BａＣl2試液，即生成白色沉淀ＢaSO４↓，分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。２）取供試品試液，加Pb(AC)2試液，即生成白色沉淀PｂSO4↓,分離，沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。3)取供試品試液，加鹽酸，不生成白色沉淀,與S２O32-相區(qū)別.②NO3-的反應(yīng):1）取供試品試液，置試管中,加等量的硫酸，注意混合，冷卻，沿管壁加FｅSO4試液,使成兩液層,接界面顯棕色。(NO3－被Ｆe2+還原成NO,ＮO與FeSO4作用形成棕色產(chǎn)物.）2）取供試品試液，加硝酸與銅絲(或銅屑）,加熱，即發(fā)生紅棕色的蒸氣。（HNO3被金屬銅還原產(chǎn)生ＮO，NＯ進一步被空氣中的氧氧化成NO2而顯棕色。)3）取供試品試液,滴加KＭnＯ4試液，紫色不應(yīng)褪去，與NＯ2—相區(qū)別。三、雜質(zhì)檢查★★★1.硫酸阿托品①莨菪堿：阿托品為莨菪堿的外消旋體，莨菪堿因消旋不完全而引入。莨菪堿具有旋光性,為左旋體,因此可以采用旋光度法進行檢查。規(guī)定：檢查的供試品溶液濃度為５0mg/ｍl時，旋光度不得過－0。40°②其他生物堿：系指在硫酸阿托品的制備過程中，可能引入的莨菪堿、顛茄堿等生物堿雜質(zhì)。可利用其他生物堿堿性弱于阿托品的性質(zhì)來進行檢查,當(dāng)在硫酸阿托品的鹽酸溶液中,加入氨試液時，若有其他生物堿則立即游離,發(fā)生渾濁。規(guī)定:不得立即發(fā)生渾濁.2．硫酸奎寧①三氯甲烷－乙醇中不溶物的檢查：本檢查主要是控制在制備硫酸奎寧過程中，可能引入的醇中不溶性雜質(zhì)或無機鹽類等。規(guī)定:10５℃干燥至恒重后遺留殘渣不得超過２mg。方法：取供試品2g，加三氯甲烷－乙醇（2：１）混合液15mｌ中，在５0℃加熱１0分鐘后,用稱定重量的垂熔坩堝濾過，殘渣用上述混合液分5次洗滌,每次10ml，在105℃干燥至恒重后,遺留殘渣不得過2mg。②其他金雞納堿的檢查:在制備硫酸奎寧過程中，可能存在有金雞納的其他生物堿,采用薄層色譜法進行檢查.規(guī)定：供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點，與對照溶液的主斑點比較，不得更深（限度為０。5％)3．鹽酸嗎啡①阿撲嗎啡：如含有阿撲嗎啡,其水溶液在碳酸氫鈉堿性條件下，經(jīng)碘試液氧化,生成水溶性綠色化合物，此產(chǎn)物能溶于乙醚,顯寶石紅色，水層仍顯綠色。規(guī)定藥物經(jīng)檢查醚層和水層均不得顯色。②罌粟酸:罌粟酸在微酸性溶液中遇三氯化鐵生成紅色的罌粟酸鐵。規(guī)定遇三氯化鐵試液，不得顯紅色。③其他生物堿的檢查:指除嗎啡以外，在提取過程中可能帶入的可待因，蒂巴因，罌粟堿，那可汀等生物堿.采用薄層色譜法檢查,以7０%乙醇-甲苯－丙酮—濃氨溶液(３5：35：32.5：2。５)為展開劑，展開,晾干，噴以碘化鉍鉀試液，放置15分鐘,再噴以過氧化氫試液顯色.供試品溶液如顯可待因斑點，與對照品溶液的可待因斑點比較，不得更深；如有其他雜質(zhì)斑點,其顏色與對照品溶液所顯示的嗎啡斑點比較，不得更深。４.鹽酸嗎啡片１）含量均勻度的測定照紫外—可見分光光度法,在２5０ｎm的波長處測定吸光度，計算每片的含量及Ａ、S兩個量，依法判斷，應(yīng)符合規(guī)定。2）溶出度的測定照溶出度測定法(第三法),以水１2５mｌ(5mg規(guī)格)或200ml(10ｍg規(guī)格）為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速為每分鐘50轉(zhuǎn)，依法操作.照紫外—可見分光光度法,在2５０nm的波長處測定吸光度。計算每片的溶出量,結(jié)果乘以換算因數(shù)1.317，即得鹽酸嗎啡（C17Ｈ１９NO３·HCl·3H2Ｏ）的溶出量。（換算因數(shù)系鹽酸嗎啡的分子量和嗎啡分子量的比值,即：f＝375.8５／285.34=１.317)5。硝酸士的寧馬錢子堿：馬錢子堿經(jīng)硝酸與水的等容混合液作用后,得紅色或淡紅色的硝化產(chǎn)物。規(guī)定：除顯黃色外，不得顯紅色或淡紅棕色。四、含量測定★★★1。非水滴定法在水以外的溶劑中進行滴定的方法。溶媒的要求:能提高樣品堿性;能溶解樣品及其產(chǎn)物;溶劑、樣品及滴定劑三者間無副反應(yīng).pKb８～１0,可選用gHＡcpＫｂ10～１2,可選用ｇHAc+Ac２Ｏ或CH3NO2+Ａc2OpKb＞１２，可選用Ａc２O酸根的影響：無機酸類在醋酸中的解離常數(shù)依次為HCｌＯ４〉ＨBr〉H2ＳＯ4>ＨCl＞HＮO3（1）測定生物堿氫鹵酸鹽因釋放出酸性相當(dāng)強的氫鹵酸，影響滴定終點，排除方法是加一定量的HgAｃ2的ｇHAc溶液.2［Ｂ]HX+ＨgAc２→2［B]．HAc+ＨgＸ2HｇAc2量不足時，影響滴定終點，過量（1~3倍)不影響測定結(jié)果。(2）測定生物堿為硝酸鹽釋放出的HNO３可氧化破壞指示劑，妨礙終點觀察，可改用電位法指示終點，或加入VＣ，加熱至沸用空氣流將HNO２氣體除去。（３）測定生物堿為有機酸鹽或磷酸鹽時，因其酸性較弱，對滴定無妨礙。(４)測定生物堿為硫酸鹽時,硫酸在gHAC中顯一元酸,處理方法有三種形式。直接滴定法：如硫酸奎寧喹啉環(huán)上的Ｎ原子堿性極弱,不與硫酸成鹽，而用ＨClO4滴定時則與HClＯ4成鹽，化學(xué)計量關(guān)系為1：３加入BaＡC2后滴定:使SO４2-生成難解離的BaＳO4，化學(xué)計量關(guān)系為1:4加入Ba（ClO4）2后滴定：使SＯ４2-生成難解離的ＢaSＯ4，過量的Ba(ClO4)2在gＨAC中為中性鹽,不干擾下步測定，化學(xué)計量關(guān)系為１：２指示劑:常用結(jié)晶紫。鹽酸麻黃堿、硫酸阿托品、硫酸奎寧(片，經(jīng)三氯甲烷提取后非水測定）、鹽酸嗎啡、硝酸士的寧原料均采用非水滴定法。具體例子如下：①鹽酸麻黃堿：由于本品為鹽酸鹽,因此滴定前應(yīng)預(yù)先加入醋酸溶液，使其形成在醋酸中難解離的鹵化汞，從而可消除氫鹵酸對滴定的干擾.《中國藥典》測定鹽酸麻黃堿的方法為:取鹽酸麻黃堿０.15ｇ，精密稱定，加冰醋酸10ml,加熱溶解后,加醋酸汞試液4ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0。１ｍol／L)滴定至溶液顯翠綠色，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每1ｍl的高氯酸滴定液（0.1mｏl/L）相當(dāng)于2０.1７mg的鹽酸麻黃堿。含量計算公式如下：式中V和V０分別為樣品滴定時所消耗滴定液的體積（ml）;F為濃度換算因數(shù)，Ｆ=C／0。1，其中C為高氯酸滴定液的濃度(mol/L）；W為稱樣量（g)。②鹽酸麻黃堿注射液：因注射液中的水會干擾測定,所以把樣品先置水浴上蒸干,并在105℃干燥一小時后測定。依法測定,每1ml的高氯酸滴定液（0。1mol／Ｌ)相當(dāng)于20.１7mg的鹽酸麻黃堿。③硫酸阿托品：依法測定，由于硫酸的酸性強，因此生物堿的硫酸鹽在冰醋酸的介質(zhì)中只能被滴定至生物堿的硫酸氫鹽。1mｏｌ硫酸阿托品的消耗1ｍｏｌ的高氯酸，無水硫酸阿托品的分子量為6７6．8２，所以1mｌ的高氯酸滴定液（０。１mol/L）相當(dāng)于67.68mg的無水硫酸阿托品［(C１7H2３NO２）２·H２ＳO4].④硫酸奎寧：依法測定,由于喹核堿的堿性較強可與硫酸成鹽，而喹啉環(huán)的堿性極弱，不能與硫酸成鹽而始終保持游離狀態(tài)。其結(jié)構(gòu)簡式可表示為(QH+)２SＯ42—，用高氯酸滴定液滴定時,反應(yīng)式為:（QＨ+）２·SO42-+３HCｌO4→QH２2+·2CｌO４-+QH22+·ClＯ4-·HSO4－從以上可知，1ｍol的硫酸奎寧可消耗3mｏl的高氯酸。無水硫酸奎寧的分子量為７46.93，所以１ml的高氯酸滴定液（0.1moｌ/L)相當(dāng)于2４.90mg的無水硫酸奎寧[(C２0H24N２O2）2·H2SO４］。⑤鹽酸嗎啡:為消除鹽酸對滴定的影響，需在滴定前先加入醋酸汞試液，依法測定。本法中1mol的HClO4相當(dāng)于1mol的鹽酸嗎啡，無水鹽酸嗎啡的分子量為３21。80，因此1ml的高氯酸滴定液（0。1moｌ/L)相當(dāng)于３2。１8ｍg的鹽酸嗎啡（Ｃ17H19N0３·HCｌ）。⑥硝酸士的寧：滴定產(chǎn)物硝酸在冰醋酸介質(zhì)中雖為弱酸，但它具有氧化性,可以破壞指示劑,故采用電位法指示終點。方法如下:取本品約0。3g，精密稱定，加冰醋酸20ml，振搖使溶解,用高氯酸滴定液（０。1ｍol／Ｌ）滴定，以電位法（玻璃—飽和甘汞電極系統(tǒng))指示終點。每1ｍl的高氯酸滴定液相當(dāng)于３9。7４mg的硝酸士的寧（Ｃ21H22Ｎ2O2·HN03)。２.比色法:麻黃堿有氨基醇的結(jié)構(gòu)，類似于氨基酸，可以和茚三銅反應(yīng)呈色.據(jù)此，鹽酸麻黃堿滴鼻液采用比色法測定含量。方法：精密量取本品2ml，置100ml量瓶種，加水稀釋置刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品適量，精密稱定,加水溶解并定量稀釋成每1ml中含0．2ｍg的溶液，作為對照品溶液。精密量取對照品溶液與供試品溶液各1ml,分別置試管中,精密加茚三銅溶液1ml，置水浴中加熱1０分鐘速冷，精密加水７mｌ搖勻，立即在570nｍ的波長處分別測定吸光度,計算，即得。含量測定結(jié)果的計算公式為:標(biāo)示量含量占標(biāo)示量百分率(）式中,AX、AR分別為供試品溶液和對照品溶液的吸光度，CR為對照品溶液的濃度(mg/ml)；2為取樣量(ml）,標(biāo)示量的單位為ｍg/ｍl.３。紫外法鹽酸嗎啡片（２50ｎm最大吸收）、硝酸士的寧注射液（２5４nm最大吸收）,《中國藥典均》均采用紫外分光光度法測定其含量.【真題模擬與解析】一、A型題(最佳選擇題)1.生物堿類藥物含量測定時，為消除氫鹵酸對滴定反應(yīng)的不良影響可加入Ａ.硝酸B。醋酐C．冰醋酸D．醋酸汞E．硝酸汞答案［D］答案解析:醋酸汞與氫鹵酸生成在冰醋酸中難解離的鹵化汞，從而消除氫鹵酸對非水滴定的影響２．非水堿量法測定藥物含量時,一般消耗0。1ｍol/L高氯酸溶液為A．5mlＢ．８mｌC．