薄層色譜鑒別法薄層色譜法又稱薄層層析法，簡稱TLC。將供試品溶液，點于薄層板上，在展開容器內用展開劑展開，使供試品所含成分分離，所得色譜圖與標準物質按照相同方法所得色譜圖對比。特點：專屬性較強，設備簡單、分析速度快、分離效率高、結果直觀。薄層板展開容器供試品溶液概念：薄層色譜法是目前應用最廣泛的薄層色譜法。吸附薄層色譜法：原理：將固定相吸附劑均勻的涂鋪在光潔的玻璃板、塑料板或金屬板上，各組份在此薄層上進行色譜分離的方法。薄層色譜法b

將樣品AB，兩個組份的溶液分別點在薄層板的一端，在密閉容器中用適當的溶劑展開，吸附系數大的組分在薄層板上的遷移速度慢，而吸附系數小的組分在薄層板上遷移速度快，經過一段時間后被完全分離，在薄層板上形成兩個斑點。00caAB吸附薄層色譜法：例：薄層色譜法薄層色譜系統組成①按照固定相類型：正相薄層板、反相薄層板、高效薄層板。硅正相薄層板：常用的如硅膠薄層板；反向薄層板:如碳18鍵合相薄層板。高效薄層板:目前硅膠薄層板是使用最廣的薄層板，如硅膠g、硅膠GF、硅膠h和硅膠HF等。硅膠薄層板②目前使用的薄層板有市售薄層板和自制薄層板兩種。一般市售薄層板分離效果較自制薄層板效果好，如果需要特殊薄層板時，可采用自制薄層板。一、薄層板：

涂布器應能使固定相或者載體在玻璃板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。分為無黏合劑和粘合劑兩種。等。（1）無粘合劑：將固定相直接涂布于玻璃板上。（2）有粘合劑：應在固定相中加入一定量的粘合劑，一般常用10%~%15的燒石灰混合后加水適量使用，或用0.2%~0.5%的羧甲基纖維素鈉水溶液，調成糊狀，均勻涂布于玻板上。二、薄層涂布：（1）手動點樣：主要用微升毛細管、微量注射器或與之相應的手動點樣儀。（2）自動點樣：采用半自動點樣儀或全自動點樣儀，按預設程序自動點樣。點樣分為手動點樣或者自動點樣。微升毛細管微量注射器點樣儀三、點樣：

對于有色物質的分離，展開后直接觀察斑點顏色，對于有熒光極少數具有紫外吸收的物質，可在紫外燈下觀察有無暗斑或熒光斑點，并劃出斑點位置，記錄其顏色強弱，再進行定性或定量分析。又稱展開缸，為大小適宜的密閉展開容器，并有嚴密的蓋子。四、展開容器：

顯色設備包括噴霧顯色、浸漬顯色以及蒸汽熏蒸顯色等。五、顯色設備：薄層色譜法鑒別的常用方法①采用與供試品濃度相同的對照溶液，在同一塊薄層板上點樣展開與檢視。薄層色譜法鑒別的常用方法供試品溶液所顯主斑點的顏色或熒光與位置，應和對照溶液的主斑點一致，而且兩者主斑點的大小與顏色深淺也大致一致。則可判定為兩者為同一物質。薄層色譜法鑒別的常用方法②將供試品溶液與對照品溶液等體積混合，應顯單一緊密的斑點。③選用與供試品化學結構相似的藥物，對照品溶液與供試品溶液的主斑點比較，兩者位置應不同。④將與供試品化學結構相似的藥物對照品溶液與供試品溶液等體積混合，顯現兩個清晰分離的斑點。薄層色譜法①采用與供試品濃度相同的對照溶液，在同一塊薄層板上點樣展開與檢視，供試品溶液所顯主斑點的顏色或熒光與位置，應和對照溶液的主斑點一致，而且兩者主斑點的大小與顏色深淺也大致一致。則可判定為兩者為同一物質。鑒別的常用方法薄層色譜法②將供試品溶液與對照品溶液等體積混合，應顯單一緊密的斑點。③選用與供試品化學結構相似的藥物，對照品溶液與供試品溶液的主斑點比較，兩者位置應不同。④將與供試品化學結構相似的藥物對照品溶液與供試品溶液等體積混合，顯現兩個清晰分離的斑點。鑒別的常用方法鹽酸洛美沙星片的鑒別【實例】①取本品的細粉適量，加0.1mol每升的鹽酸溶液并稀釋制成500ug每毫升的含洛美沙星溶液。振搖過濾，取續濾液作為供試品溶液。鹽酸洛美沙星片的鑒別【實例】②另取洛美沙星對照品適量，用相同的方法制備成對照品溶液。鹽酸洛美沙星片的鑒別【實例】③照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一GF254，薄層板上，并且以三氯甲烷，甲醇銨制氯化氨溶液為展開劑展開晾干。鹽酸洛美沙星片的鑒別【實例】④置于紫外燈下檢視，供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色，應與對照品溶液主斑點的位置和顏色相同。薄層色譜法鑒別時需考慮比移值、分離度、檢出限及相對標準偏差是否符合統適應性試驗的要求。可移值供試品溶液主斑點與對照品溶液主斑點的比移值進行比較。除另有規定外，雜質檢查時，比值應在0.2~0.8之間。鑒別時，供試品與標準品的斑點均應清晰分離，檢查及含量檢測時，除另有規定分離度應大于1.0。系統適應性試驗薄層色譜法檢出限：一般采用已知濃度的供試品溶液和對照品溶液，與稀釋若干倍的自身對照標準溶液，在規定的色譜條件下，在同一薄層上點樣展開檢視，后者顯示清晰可辨斑點的濃度或量作為檢出限。相對標準偏差：同一供試品溶液在同一薄層板上平行點樣，待測成分的峰面積測量值的相對標準偏差應小于等于5.0%，顯色后測定的相對標準偏差應小于等于10%。注意事項自制薄層板和市售薄層板在使用前均應進行活化，活化后的薄層板應立即至于有干燥劑中保存，最好隨用隨制。1供試液的制備，溶劑選擇是否適當影響點樣圓點以及分離后斑點的形狀，一般應選擇極性小的溶劑。2薄層色譜法三、注意事項點樣量不宜過多，否則容易產生斑點拖