ICS11220

CCSB.41

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T41699—2022

獸用生物制品外源支原體檢驗方法

Detectionofmycoplasmacontaminationinveterinarybiologicalproduct

2022-10-12發(fā)布2023-05-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T41699—2022

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任

。。

本文件由全國質(zhì)量監(jiān)管重點產(chǎn)品檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC374)。

本文件起草單位中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所

:。

本文件主要起草人羅玉峰沈青春孟杰鄭存哲曲鴻飛王芳劉博耿仁浩魏津馬欣王德麗

:、、、、、、、、、、、

肖璐陳冬陽

、。

Ⅰ

GB/T41699—2022

引言

當(dāng)前我國獸用活疫苗制品的支原體檢驗方法存在檢測周期長檢測結(jié)果受培養(yǎng)基質(zhì)量影響較大等

、

問題本文件參考現(xiàn)行中國獸藥典中國藥典等收錄的生物制品支原體檢驗方法結(jié)合生物信息技

。《》《》,

術(shù)研究制定了支原體檢測聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的檢驗方法并對支原體檢驗培養(yǎng)法進行了改進本

(PCR),。

文件的制定可以規(guī)范我國獸用生物制品的生產(chǎn)和檢驗中的支原體檢驗

。

Ⅱ

GB/T41699—2022

獸用生物制品外源支原體檢驗方法

1范圍

本文件描述了用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法培養(yǎng)法檢驗獸用生物制品外源支原體的原理方法和綜

(PCR)、、

合判定

。

本文件適用于獸用生物制品中外源支原體的檢驗

。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件

。

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

支原體mycoplasma

一種類似細菌但無胞壁直徑能通過細菌濾器的原核微生物

、50nm~300nm、。

注支原體是能在人工培養(yǎng)基上獨立生長繁殖的結(jié)構(gòu)最簡單的微生物能通過細菌濾器是引起獸用生物制品污染

:,,

的重要微生物

。

32

.

16SrRNA基因16SrRNAgene

細菌細胞內(nèi)編碼相對應(yīng)的序列

rRNADNA。

4原理

通過物理和化學(xué)方法使樣品脫氧核糖核酸從各組分中分離出來利用苯酚三氯甲烷氯

(DNA),、(

仿異戊醇等除去樣品中的蛋白質(zhì)脂肪多糖及其他次生代謝物然后采用乙醇沉淀和洗滌核酸樣品

)、、、,,

獲得純化的對現(xiàn)有已公布支原體種類的基因序列進行分析設(shè)計能夠檢測支原體及

DNA。16SrRNA,

甾原體的通用引物建立獸用生物制品產(chǎn)品及細胞的外源支原體檢驗聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法

,(PCR)。

使用支原體培養(yǎng)基通過分離培養(yǎng)的方法對可能污染支原體的獸用生物制品產(chǎn)品及細胞進行人工

,,

培養(yǎng)再通過是否有支原體生長判斷樣品是否存在支原體污染

,,。

5支原體檢驗聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR法

()

51試劑和材料

.

除非另有規(guī)定僅使用分析純試劑

,。

511平衡酚配制按照附錄中的方法

..:AA.1.1。

512苯酚氯仿異戊醇體積比配制按照的方法

..∶