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文檔簡介

溶血性鏈球菌檢驗革蘭氏陽性球菌檢樣處理增菌培養檢樣處理固體樣品：25g（電子天平）液體樣品：25mL（25mL吸量管）+

225mL生理鹽水（量筒），混勻。注意：液體樣品先用無菌NaOH或HCl調節PH至7.0。稀釋瓶或具塞廣口瓶增菌取上述混合液5mL（吸量管）

50mL葡萄糖肉浸液肉湯培養（于36℃±1℃培養24h）葡萄糖肉浸液肉湯培養

1.取已培養好的增菌液1環血平板劃線培養（于36℃±1℃培養24h）葡萄糖肉浸液肉湯（陽性）血平板平板劃線示意圖開始處開始處

2.取有典型菌落的陽性血平板（在放陽性物品處）灰白色，半透明或不透明，表面光滑，周圍有透明圈血平板劃線（分純）血平板涂布貼桿菌肽試紙（2~3片）革蘭氏染色典型菌落（同一菌落）于36℃±1℃培養18~24h于36℃±1℃培養18~24h在無菌室中固定，到微生物實訓室染色革蘭氏染色步驟：涂片——火焰固定——結晶紫初染——水洗——碘液媒染——乙醇脫色——水洗——吸干——番紅或沙黃復染——水洗——干燥——鏡檢涂片：在載玻片中央滴一滴生理鹽水，用無菌操作法挑取菌種于生理鹽水中，調勻并涂成薄膜。注意：生理鹽水不宜過多；涂片必須均勻?；鹧婀潭ǎ狠d玻片通過火焰1~2次固定，不可過熱，以載玻片不燙手背為宜。結晶紫初染：涂片置于水平位置。涂片薄膜上加結晶紫1滴，染色1min。水洗：用自來水沖洗至沖下的水無色為止。碘液媒染：加碘液媒染1min，然后用水沖洗至沖下的水呈無色為止。乙醇脫色：用吸水紙將載玻片上的水吸凈，用95%的乙醇滴于涂片薄膜上，滴洗至流出的乙醇不出現紫色為止，大約需要20~30s。立即用自來水沖洗乙醇約30s，用吸水紙吸干水分。番紅或沙黃復染：在涂片薄膜上滴加番紅1滴，染色1~2min。水洗：用水沖洗至沖下的水呈無色為止。干燥：于室溫下自然干燥。觀察：干燥后，于涂片薄膜上滴香柏油1滴，置油鏡下觀察。結果:

革蘭氏陽性菌——紫色；

革蘭氏陰性菌——紅色。桿菌肽敏感試驗結果：試紙周圍有抑菌帶出現為陽性血平板純化結果：

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