體內藥物分析中的樣品預處理技術【摘要】本綜述主要闡述近年來體內藥物分析中樣品預處理技術的幾種常用方法技術，包括有機破壞、分離蛋白法液—液萃取法、固相萃取法固相微萃取技術和超臨界流體萃取技術等。關鍵詞】樣品預處理技術；有機破壞；分離蛋白法；液—液萃取法；固相萃取法；固相微萃取法；超臨界流體萃取法；體內藥物分析【正文】在體內藥物分析中常采用的生物樣品包括血液、尿液、唾液、乳汁、精液、淚液、胃液、膽汁、糞便等樣品。其中最常用的是血漿或血清，因為二者更能體現藥物濃度與治療作用之間的關系。測定體內藥物及其代謝物時，常常不能進行直接測定，需要實施分離、凈化、濃集、化學衍生等，這些處理技術即為樣品預處理技術。樣品預處理是體內藥物分析中極為重要的環節，也是最困難，最繁瑣的工作。在分析過程中如何方便、快捷地對樣品進行預處理，將少量的藥物從大量復雜的生物基質中分離出來，以便準確定性、定量，是體內藥物分析面臨的首要問題。常用的樣品預處理技術有有機破壞法、蛋白分離技術、萃取技術等。近幾年研究表明：采用固相微萃取技術及超臨界流體萃取技術處理生物樣品具有快速簡便，選擇性好、回收率高、無需使用大量有機溶劑等優點，因此成為當今體內藥物分析中最有發展潛力的兩種樣品預處理技術。1.有機破壞技術有機破壞包括濕法破壞、干法破壞以及氧瓶燃燒法三種技術。濕法破壞是以硝酸為消解液，與生物樣品共熱，生物樣品被氧化破壞游離出待測組分；干法破壞是將生物樣品高溫熾灼，生物介質被灰化，經水或酸溶解后測定；氧瓶燃燒法是采用燃燒分解有機物的簡單技術，能將待測元素定量分解成離子型。2．分離蛋白質法蛋白質分離技術包括容劑解法、中性鹽鹽析法、強酸破壞、金屬鹽沉淀、超濾法、酶解法、加熱法使蛋白質變性沉淀等。前兩者主要是破壞蛋白質表面電荷及水化膜是蛋白質沉淀；金屬鹽能與蛋白中的特定離子生成沉淀達到分離效果；超濾法是運用半透膜的原理來分離蛋白質；待測組分對熱穩定時可采用加熱方法是蛋白質變性，從而與待測組分分離。3．分離、純化與濃集技術主要采用萃取技術達到預處理的目的。常用的萃取方式有：液—液萃取法、固相萃取法、固相微萃取法、超臨界流體萃取法等。3?1液一液萃取法（LLE）是利用待測藥物與內源性干擾物油水分配系數不同而進行的液相分離技術。多數藥物是親脂性的，而血樣或尿樣等內源性物質多數是極性強的水溶性物質，用有機溶劑可將其萃取分離。3?2固相萃取法（SPE）SPE又稱液一固萃取技術，其原理是將不同填料作為固定相裝入微型小柱，當含有藥物的生物樣品通過小柱時，由于受到吸附、分配、離子交換或其他親和力作用，藥物或干擾物質被保留在固定相上，用適當溶劑洗除干擾物質，再用適當溶劑洗脫藥物。3.3固相微萃取(SPME)是80年代后期發展起來的樣品預處理方法，其裝置簡單，操作方便，已實現自動控制，適用于現場分析。它用一個類似于氣相色譜微量進樣器的萃取裝置，從樣品中萃取出待測物質，并直接與氣相色譜(GC)或高效液相色譜(HPLC)聯用，在進樣口(GC即為氣化室)將萃取的組分解吸附后進行色譜分離檢測。SPME集萃取、濃縮、進樣于一身，極大地提高了分析速度。萃取模式可分為直接固相微萃取和頂空固相微萃取兩種。直接固相微萃取將涂有高分子固相液膜的石英纖維直接伸入樣品基質中進行萃取，經過一定時間達到分配平衡，即可取出進行色譜分析。頂空固相微萃取則將石英纖維放在樣品溶液上方進行頂空萃取，避免了基質的干擾，提高了分析速度。3?4超臨界流體萃取法超臨界流體(SF)是指溫度與壓力均在其臨界點之上的流體在研究過的超臨界流體體系中,C02因其價格低廉且無毒，應用最為廣泛。超臨界流體同時表現出液體與氣體的優點，既有與液體相近的密度，又有與氣體相近的粘度及高的擴散系數。故具有很高的溶解能力和良好的流動、傳遞性能，可代替傳統的有毒、易揮發、易燃的有機溶劑。超臨界流體萃取技術(SFE)對熱敏感物質和復雜樣品中微量組分萃取的有效性已引起人們關注，目前已用于體內分析?！窘Y束語】綜上所述，樣品預處理技術是體內藥物分析中十分關鍵的操作技術之一。隨著科學技術的發展，樣品預處理技術也得到不斷的改進。然而，尋找快捷安全、易于實現自動化的新型樣品預處理技術，在體內藥物分析中也顯得尤為重要?？梢姡瑯悠奉A處理技術有著良好地發展前景。參考文獻童珊珊，余江南，劉文英，安登魁，等.體內藥物分析中的樣品預處理技術J].藥學雜志，2001,1(25)李好枝.體內藥物分析.北京：中國醫藥科技出版社，2003徐銘，李范珠。微透析技術及其在體內藥物分析中的應用.藥學雜志，2006,34(2):165-168楊新磊，羅明