ICS07080

A4049.

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中華人民共和國國家標準

GB/T32132—2015

動物性材料羊毛羊絨鴨絨鵝絨屬

(、、、)

性DNA鑒定方法實時熒光PCR法

DNAidentificationofwoolcashmereducksdownoosesdownanimal

,,’,g’

materials—Real-timefluorescencePCRmethod

2015-10-09發布2016-11-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

動物性材料(羊毛、羊絨、鴨絨、鵝絨)屬

性DNA鑒定方法實時熒光PCR法

GB/T32132—2015

*

中國標準出版社出版發行

北京市朝陽區和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區三里河北街號

16(100045)

網址

:

服務熱線

:400-168-0010

年月第一版

201511

*

書號

:155066·1-52011

版權專有侵權必究

GB/T32132—2015

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國生化檢測標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標準起草單位深圳市計量質量檢測研究院中國測試技術研究院珠海出入境檢驗檢疫局

:、、。

本標準主要起草人陳國培賴心田林霖周李華梁玉英莫秋華洪曉明唐復潤胡科新

:、、、、、、、、、

何永盛楊友紅楊志敏楊國武楊澤

、、、、。

Ⅰ

GB/T32132—2015

動物性材料羊毛羊絨鴨絨鵝絨屬

(、、、)

性DNA鑒定方法實時熒光PCR法

1范圍

本標準規定了羊毛羊絨鴨絨鵝絨動物性材料中成分實時熒光定性檢驗方法

、、、DNAPCR。

本標準適用于動物性材料中羊毛羊絨鴨絨鵝絨等動物源性成分的鑒定

、、、DNA。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

3原理

本標準使用十二烷基磺酸鈉異硫氰酸胍β巰基乙醇法或其他等效提取法獲得適用于實時

---DNA,

熒光檢測的同時依據多種動物的物種特異性基因片段設計成特異性熒光引物通過實時

PCRDNA。,

熒光反應檢測其中是否含有各種動物源性成分從而達到對動物性材料進行屬性成

PCR,DNA,DNA

分定性檢測的目的

。

4儀器設備及器具

41實時熒光儀

.PCR。

42超凈工作臺

.。

43離心機最高轉數g

.(15000)。

44微量移液器

.:0.2μL~2μL,1μL~10μL,2μL~20μL,20μL~200μL,200μL~1000μL。

45恒溫水浴鍋

.:(65±1)℃。

46超純水系統電阻率

.(>18.2MΩ·cm)。

47紫外分光光度計

.:230nm、260nm、280nm。

5試劑和材料

除非另有說明在分析中僅使用分析純試劑水應符合一級水要求

,,GB/T6682。

51溶液稱取十二烷基磺酸鈉粉末加入

.2%SDS:2gSDS(sodiumdodecylsulfate,sodiumsalt,),

三羥甲基氨基甲烷

5mL1mol/LTris-HCl(pH8.0)[Tris-:tris(hydroxymethyl)aminomethane,()]

及乙二胺四乙酸加水定容至

4mL0.5mol/LEDTA(pH8.0)(ethylenediaminetetraaceticacid,),

室溫保存

100mL,。

52異硫氰酸胍提取液稱取異硫氰酸胍氯化鈉

.:47.25g、1.75g、4gPVPK-40(Poly