熒光葉室講解姚軍朋基因有限公司農業環境科學部北京力高泰科技有限公司2010年基本原理熒光與光合作用的關系葉綠素熒光能做什么？1、葉綠素熒光可以研究植物光合生理狀況2、葉綠素熒光是研究植物與逆境脅迫關系的理想探針3、葉綠素熒光技術能夠快速靈敏、無損傷地反映光系統II對光能的吸收、傳遞、耗散、分配等方面的狀況4、光合氣體交換的指標反應植物光合生理“表觀性”，而葉綠素熒光參數更具有反映植物光合機構的“內在性”。葉綠體結構之被膜CO2、O2、H2OCO2、O2、H2O外膜內膜CO2、O2、H2ORuBPRubiscoNADP+碳同化場所蔗糖（淀粉粒）、磷酸丙糖磷酸丙糖磷酸丙糖類囊體類囊體膜間隙膜間隙基質chloroplast葉綠體結構之類囊體一葉綠體基質基粒類囊體基質類囊體葉綠體被膜encephaloid葉綠體結構之類囊體二光系統II光系統IATP合成酶細胞色素Cytb6/f堆疊區非堆疊區encephaloid光合電子傳遞鏈（Z鏈）遠紅光3ps250-300ps100-200us秒s，毫秒ms，微秒us，納秒ns，皮秒ps熒光發射的基本原理PSII反應中心基態三線態1單線2單線葉綠素分子吸收紅光或藍光后，其電子被激發熒光1、光能：使基態Chl變成激發態2、一些電子從基態躍遷至激發態（S1,S2）3、電子從第一激發態落回基態熱耗散熱耗散開放的反應中心和關閉的反應中心“關閉”RC：當反應中心的初級醌受體（QA）接受電子，全部處于還原狀態時，不能再接受電子，我們稱之為關閉的RC。“開放”RC：如果QA的電子傳出，RC的電子可以完全傳遞給QA，則此時RC稱為開放的RC。

葉綠素熒光參數測定時間熒光FoFmFm’Fo’Fs暗適應光活化后測量光飽和閃光活化光飽和閃光遠紅光用來計算NPQ計算φPSII和qP熒光參數LI–6400光合熒光儀測定的參數直接測定熒光參數（一）F0：最小初始熒光，又稱基底熒光或暗熒光。指經過充分暗適應的光合機構光系統II（PSII）反應中心全部開放時的葉綠素（Chl）熒光發射強度。Fm：最大熒光。指經過充分暗適應的光合機構PSII反應中心完全關閉時的Chl熒光發射強度。LI–6400光合熒光儀測定的參數直接測定熒光參數（二）F0`：光下最小熒光。在光適應狀態下PSII反應中心完全開放時的Chl熒光發射強度。為了使照光后所有的PSII反應中心迅速達到最大開放程度，在測定前先用遠紅光進行照射。Fm`：光下最大熒光。在光適應狀態下PSII反應中心完全關閉時的熒光發射強度。Fs：穩態熒光。又稱Ft。LI–6400光合熒光儀測定的參數間接計算熒光參數（一）Fv/Fm：光化學量子效率，指沒有遭受任何環境脅迫并經過充分暗適應葉片，其PSII最大的（潛在）光化學量子效率。一般植物恒定在0.75~0.85。也被稱為開放的PSII反應中心的能量捕獲效率。Fv/Fm=（Fm–F0）/FmFv`/Fm`：光下開放的PSII反應中心的激發能捕獲效率。Fv`/Fm`=（Fm`-F0`）/Fm`Fv`/Fm`LI–6400光合熒光儀測定的參數間接計算熒光參數（二）ΦPSII：作用光存在時PSII實際的光化學量子效率，即PSII反應中心電荷分離實際量子效率，反映了被用于光化學途徑激發能占進入PSII總激發能的比例，植物光合能力的一個重要指標。

ΦPSII=（Fm`-Fs）/Fm`ETR：電子傳遞速率。ETR=PPFD×ΦPSII×0.84×0.5LI–6400光合熒光儀測定的參數間接計算熒光參數（三）qP：光化學淬滅系數。反映了PSII反應中心中開放程度，1–qP則反映了反應中心關閉程度，反映了QA的還原程度。

qP=（Fm`-Fs）/（Fm`-F0`）NPQ：非光化學淬滅系數。反映了植物熱耗散的能力的變化,數值范圍在0~n(1,2,3,4,5……)。

NPQ=（Fm–Fm`）/Fm`=Fm/Fm`-1qN：非光化學淬滅系數。與NPQ相同，現在使用較少。數值范圍為0~1。qN=(Fm–Fm`)/(Fm–F0`)熒光葉室的安裝使用鑷子取下內置光量子傳感器連接線。排氣管和熱偶電極。卸下四個螺絲，六個O形密封圈。更換上下蓋。連接熒光葉室與分析器之間的電源連接線。連接輔助連線。白色密封圈的更換。暗適應夾子的使用方法。配置軟件的安裝。軟件介紹標記含

義g行Prss_KPa

ParIn_μm%BlueParOutμm%Blue藍色光化學光在內部ParIn_μm中所占的百分比m行FdF/dt

FlrCV_%FlrEvent

F熒光強度dF/dt熒光強度變化率FlrCV_%熒光強度變異系數FlrEvent熒光事件n行F0FmFv/FmF0充分暗適應條件下的最小熒光Fm充分暗適應條件下的最大熒光Fv/Fm充分暗適應條件下光化學量子效率o行Fo1Fm1Fv1/Fm1FsFo1光照下的最小熒光Fm1光照下的最大熒光Fv1/Fm1開放的PSII反應中心的激發能捕獲效率Fs穩態熒光p行PhiPS2ETRqP

qNPhiPS2（ΦPSII）作用光存在時PSII實際的光化學量子效率ETR電子傳遞速率qP光化學猝滅系數qN非光化學猝滅系數新增參數行介紹功能行F1F2F3F4F58Flr

QuikPik選擇熒光設置文件FlrEditor編輯熒光設置DefineActinic定義作用光FlrAdjust設置熒光RcrdingON/OFF記錄熒光9MeasisON/OFF測量光開/關Flash飽和閃光DarkPulse暗脈沖Actinic光化學光開/關FarRedIsON/OFF遠紅光開/關0DoFo測量最小熒光DoFm測量最大熒光DoFoFm測量最小熒光和最大熒光ViewFsh/Drk查看強閃光或暗脈沖0DoFo1測定Fo1DoFs測定FsDoFsFm1測定Fs和Fm1DoFsFm1Fo1測定Fs，Fm1和Fo1ViewFsh/Drk查看強閃光或暗脈沖新增功能行介紹基本實驗1、測量F0&Fm。2、測量F0`、Fm`&Fs

。3、測量ΦPSII、qP&qN&NPQ。4、熒光和氣體交換參數同時測量。熒光測量的基本步驟實驗1實驗2實驗3實驗1：

植物暗適應狀態的F0、Fm、

Fv/Fm打開一個文件（1，f1），輸入文件名，添加備注。設置測量光、飽和閃光（8，f2），保存設置。夾好葉片。等待dF/dt

絕對值<5或FlrCV%<1。記錄數據（按0，f1/f2/f3/f4）。查看數據（1，f2）。關閉文件（1，f3）。傳輸文件（同光合操作）。實驗2：

植物光適應狀態的F0`、Fm`、Fs、

Fv`/Fm`打開一個文件（1，f1），輸入文件名，添加備注。設置測量光、飽和閃光和遠紅光（8，f2），保存設置。設置活化光強度（8，f3）。打開活化光（9，f4）夾好葉片。等待dF/dt

絕對值<5或FlrCV%<1。記錄數據（按0，f1/f2/f3/f4）。查看數據（1，f2）。關閉文件（1，f3）。傳輸文件（同光合操作）。實驗3：

猝滅研究，測量ΦPSII、qP&qN&NPQ1、打開一個文件（1，f1），輸入文件名，添加備注。2、設置測量光、飽和閃光和遠紅光（8，f2），保存設置。3、設置活化光強度（8，f3）。4、夾好暗適應好的葉片。5、等待dF/dt

絕對值<5或FlrCV%<1。記錄數據（按0，f1/f2/f3/f4）。6、打開活化光（9，f4），等待植物適應光環境。7、等待dF/dt

絕對值<5或FlrCV%<1。記錄數據（按0，f1/f2/f3/f4）。8、查看數據（1，f2），關閉文件（1，f3）。9、傳輸文件（同光合操作）。測量光的設置（8，f2）Intensity：1/0.8;Modulation:0.25;Filter:1;Gain:10.飽和閃光的設置（8，f2）Duration:0.8;Intensity:7/8;Blu:Nochange;Modulation:20;Filter:50.遠紅光的設置（8，f2）測量光、光化光和遠紅光的設置

FlrEditor與FlrAdjust的區別按8,f2，進入FlrEditor（編輯熒光設置）按8,f4，進入FlrAdjust（設置熒光）區別和聯系：第一種，修改完后，執行；第二