新生化檢測系統的

校準程序北京普朗新技術有限公司普概述：《全國臨床檢驗操作規程》第3版指出：“不同檢測系統對同一份檢測標本的同一檢測項目的檢測結果應具有可比性，這樣的檢測結果才有臨床價值”。為了確保生化儀檢測系統的檢測結果準確，并具有與公認參考系統的可比性，現參考上海臨檢中心馮仁豐教授的有關文章，制定了本公司生化儀檢測系統的校準程序，目的是建立一個完整的生化檢測系統提供給我們的客戶（尤其是原來沒有建立參考檢測系統的客戶）。生化檢測系統的校準程序1.生化檢測系統的基本組成儀器：北京普朗全自動生化分析儀或半自動生化分析議試劑：北京普朗（或科華）生化試劑校準品：朗道校準品檢測項目的標準操作程序(SOP)2確定溯源性的目標

在校準前，必須首先確定一個溯源性的目標系統。普朗檢測系統目前選擇奧林帕斯（OLYMPUS）檢測系統（含儀器、試劑、校準品等）為溯源性的目標，即普朗檢測系統準備使患者樣本的檢測結果向奧林帕斯檢測系統靠攏。（當然用戶也可以選擇其它任何公認的有溯源性的系統作為目標系統，包括用戶本室的原有公認系統）。3

待校準檢測系統的準備：

為實現校準目的，必須確保待校準的檢測系統（PUZS-300）處于正常良好的工作狀態。3.1試驗儀器的保養：對新建系統的試驗儀器進行一次完整的維護和保養，并確認儀器一直處于良好狀態。確保用于儀器上的各種水質優良（蒸餾水、洗液等）。3.2準備試劑盒：應選擇質量長期穩定并獲得出廠合格證的，性能良好的試劑。校準時，最好使用新批次的試劑盒（保證有足夠的量）,并編寫完整和詳細的操作規程。3.3質量控制：所有校準過程都必須有分析過程的質量控制。確保在同批實驗的檢測結果處于在控的前提下采集實驗數據，否則，應停止實驗。3.4系統評價：應該對新建系統的可報告范圍、精密度、準確度進行初期評價，尤其是精密度CV值應小于CLIA`88規定值（以確保校準效果；CLIA`88規定的指標見有關資料。如已有數據證明以上性能指標可被接受，可免做此評價）。3.5注意

為了克服基質差異對檢測結果的影響，在實現溯源性的目標過程中，切記：永遠以患者的新鮮標本為實驗對象、永遠以方法學比較實驗方式為驗證手段（參考EP9-A《用患者標本進行方法比較和偏倚評估》）。4校準步驟4.1目標實驗室的準備

若確定以奧林帕斯檢測系統為實現溯源性的目標系統，則應事先與正在使用奧林帕斯檢測系統的實驗室取得聯系：準備足夠量的臨床新鮮血樣本（一般規定40例，為了減少工作量，建議＞20例即可），選擇需要校準的檢測項目（自己規定的項目），在目標系統處于受控狀態的情況下，連續對臨床新鮮血樣本檢測3次以上，取平均值（確保樣本定值準確可靠）。4.2臨時校準品的確定：在目標實驗室送來的新鮮血標本中選分析物含量適中的某個新鮮血標本為臨時校準品，并用目標實驗室檢測的平均值作為臨時校準值。4.3對自建系統（如PUZS-300）的臨時校準：在自建系統上，以該新鮮血清為臨時校準品，用目標實驗室檢測的均值為校準值，對自建檢測系統（儀器、試劑）進行校準。（這樣就利用已具有溯源性結果的新鮮血標本，完成了在新建系統上準確度的溯源性傳遞。）4.4臨時校準后的驗證對取得的其余臨床患者血清（內含分析量最好分布于整個可報告范圍）在自建系統上進行雙份平行檢測，取均值。然后與目標系統檢測結果進行方法學比較（參考EP9-A），如果此時：①回歸統計的相關系數r＞0.975；斜率接近1（建議±0.03）；而且截距小（建議≤下限值的5-10%）；②用回歸方程計算出的系統誤差（在臨床決定水平附近），不超過CLIA`88允許總誤差的1/2；CV值不超過CLIA`88/4。說明臨時校準成功。如果還沒有達到要求，應對臨時校準品的血清再次用目標系統檢測，觀察有無偏倚，糾正后，重復上述的實驗，直到成功。5.建立自建系統的穩定校準品

5.1

因為臨床新鮮血不可能長期作為校準品，所以在以上實驗基礎上，選定一種穩定的校準品，是保持自建檢測系統可持續溯源至目標檢測系統的關鍵。普朗生化檢測系統現在選擇朗道校準品（當然也可選擇其它廠家的產品）作為自建檢測系統的穩定校準品（自建校準品）。應特別說明的是：購買的朗道校準品，只是把它當做正確度傳遞的工具，只要求瓶間差小、內含分析物穩定，根本不采用原公司的標定值。5.2用自建校準品的最終校準

5.2.1自建校準品的標定值

按照使用說明書要求，復溶朗道校準品。將校準品當作一個樣品，在經臨時校準血清校準后的自建系統上進行多次檢測（3次以上），取平均值作為標定值。

5.2.2對自建檢驗系統的再次校準在保持原自建檢驗系統不變的情況下（儀器、試劑盒、操作程序），用朗道校準品在自建系統上的檢測均值（自建校準品的標定值），再次對自建檢驗系統進行校準。5.3自建校準品校準后的驗證

經自建校準品校準后，再次對獲得的患者血清進行自建系統和奧林帕斯系統進行方法學比較（同上），驗證合格說明“自建校準品”對“自建檢測系統”校準成功。如果方法學比較結果，不如使用新鮮血清為臨床校準品的比較結果，說明對朗道校準品的檢測值還不是最佳值。可以根據所有標本結果差異分布上的趨勢，對其檢測值做微小的調整，再進行方法學比較實驗。如此反復的實驗直至符合要求。6校準完成自此，我們建立了普朗的完整檢測系統（普朗生化儀、普朗試劑、自建校準品（朗道）和操作規程）。為了使自建系統能長期保持溯源性，應該用自建校準品對自建檢測系統進行定期校準，所以購買的朗道校準品，一個批次最好有足夠的量。切記：1）一直保持自建檢測系統的穩定性；2）在以后對自建檢測系統校準時，只使用在該系統上測定的標定值，決不能用朗道公司提供的標定值。7日常校準

本檢測系統投入使用以后，遇到以下情況時應進行校準：正常條件下的定期校準、更換試劑盒批號、出現失控、儀器保養和更換關鍵零部件后、操作人員變動、更換校準品批次等。

7.1正常條件下的定期校準

在保持自建檢測系統不變的情況下，直接用自建校準品對檢測系統進行校準。

7.2

更換試劑盒時的校準

首先在原儀器上用原試劑和新試劑對同一批臨床新鮮血清標本進行方法學比較實驗。

1.如果檢測結果具有可比性（誤差可被接受），說明兩試劑間無差異，可直接用新試劑對臨床樣本進行檢測。

2.如果檢測結果具有明顯差異：

a)在原系統上（不含原試劑）用新試劑重新校準，并進行比較實驗；

b)如果仍具有明顯差異，說明新試劑與原試劑有顯著差異。應以原系統為目標系統，按規定的校準程序重新校準（包括修正自建校準品的定值）。（其它類型的校準可參照本原則根據實際情況處理。）校準流程圖見下頁。

結束語：這樣，包括儀器、試劑盒、自建校準品和操作程序，我們建立了普朗的完整檢測系統，并確保該系統對患者標本的檢測結果可以溯源至奧林帕斯系統。因為奧林帕斯系統對患者新鮮血標本檢測結果可以溯源至參考系統，因此，我們的自建檢測系統也實現了可溯源至參考系統的目的。

北京普朗公司技術部2010.01