§4.2Lambert-Beer定律一、透射比和吸光度一束平行光通過均勻液體介質(zhì)I0=Ia+It+Ir

I0---入射光強(qiáng)度；Ia---吸收光強(qiáng)度；

It---透射光強(qiáng)度；Ir---反射光強(qiáng)度被測(cè)溶液和參比溶液一般是分別放在同樣材料和厚度的吸收池中,Ir可相互抵消I0=Ia+It（一）透射比(Transmittance)T(%)T=

It/I0（二）吸光度（Absorbance二、Lambert-Beer定律（一）Lambert定律1760年A=k’l（二）Beer定律1852年A=k’’c（三）Lambert-Beer定律A=k·c·l

k---比例系數(shù)（與溶液的性質(zhì)、溫度及入射光波長(zhǎng)

等因素有關(guān)）c---溶液的濃度l---液層的厚度

（四）Lambert-Beer定律A=k·c·l----UV-Vis進(jìn)行定量分析的依據(jù)適用條件：a.<0.01molL-1稀溶液b.溶液中吸光質(zhì)點(diǎn)間沒有相互作用（離解、締合、互變異構(gòu)、配位數(shù)變化）c.非散射的均勻介質(zhì)d.吸光度具有加和性（采用雙波長(zhǎng)法進(jìn)行測(cè)量的原因）e.單色光照射（五）A=k·c·l中的k1.吸光系數(shù)a：當(dāng)c：g/L時(shí)，k→aA=a·c·la:dm3·g-1·cm-1(L·g-1·cm-1)2.摩爾吸光系數(shù)ε：當(dāng)c：mol/L時(shí)，k→ε

A=ε·c·lε：dm3·mol-1·cm-1(L·mol-1·cm-1)（1）物理意義：吸光物質(zhì)的濃度為1mol/L，液層厚度為1cm時(shí)，溶液的吸光度

（2）定性分析：參考ε（3）定量分析：ε估量靈敏度

（4）ε與λ有關(guān)，表示某物質(zhì)溶液的ε時(shí)，應(yīng)注明λ值（ε與溶液的性質(zhì)、溫度和入射光λ有關(guān)）（5）由較稀溶液的吸光度求得（6）比吸光系數(shù):質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%，l為1cm時(shí)的吸光度值

ε=0.1MM---吸光物質(zhì)的摩爾質(zhì)量（7）桑德爾（Sandell）靈敏度a.定義：當(dāng)吸光度等于0.001時(shí)，單位截面積光程內(nèi)所能檢測(cè)出的吸光物質(zhì)的最低含量。S：g/cm2b.S與ε關(guān)系A(chǔ)=ε·c·l=0.001→c·l=0.001/ε

偏離Lambert-Beer定律的因素（一）與測(cè)定樣品溶液有關(guān)的因素1.溶液濃度<0.01molL-1稀溶液2.試樣中各組分之間沒有相互作用（離解、締合、光化反應(yīng)、互變異構(gòu)、配合物配位數(shù)變化）3.溶劑（不同溶劑，ε不同）4.散射光T↓A↑（正偏差）（二）與儀器有關(guān)的因素非單色光

§4.3紫外-可見分光光度計(jì)一、主要組成部件

光源→單色器→

→檢測(cè)器→信號(hào)指示系統(tǒng)

吸收池（一）光源

可見區(qū)：熱輻射光源鎢燈、鹵鎢燈

紫外區(qū)：氣體放電光源氫燈、氘燈

紫外-可見光區(qū)：高壓氙燈氙燈氫燈鎢燈（二）單色器：色散元件棱鏡和光柵（三）吸收池：石英：用于紫外區(qū)或可見區(qū)玻璃：用于可見區(qū)（四）檢測(cè)器：放大、記錄指示光電池：硒光電池對(duì)光敏感范圍300-800nm，500-600nm最靈敏藍(lán)敏：210-625nm光電管紅敏：625-1000nm光電倍增管（五）信號(hào)指示系統(tǒng)二、紫外-可見分光光度計(jì)的類型