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文檔簡介
關于腸桿菌科概述埃希菌屬第1頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六教學大綱腸道桿菌的共同特征及分類引起腸道感染的大腸埃希菌種類和致病特點大腸埃希菌的微生物學檢查法大腸埃希菌的衛生細菌學檢查及其意義第2頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六EnterobacteriaceaeAheterogeneousgroupofG-rodsTheirnaturalhabitatistheintestinaltractofhumansandanimals(entericbacilli)FacultativeanaerobesoraerobesMostarenormalfloraRegularpathogenforhumans:Salmonella,Shigella,someE.coliMorethan30genera,120species第3頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六Newfindingsingastrointestinalbacteria2006,Nature,JeffreyGordon,directoroftheCenterforGenomeSciencesatWashingtonUniversitySchoolofMedicineinSt.Louis,Missouri,andhisgraduatestudentBuckSamuelMethanobrevibactersmithii(M.smithii)DiscoveryChannel“GutBacteriaDetermineFatorThin”“I’mnotfat,I’mjustgotfatbacteria”第4頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六返回第5頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸桿菌科細菌的生物學特征形態與結構中等大小G-桿菌無芽胞周鞭毛菌毛培養兼性厭氧或需氧營養要求不高菌落混濁生長第6頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸桿菌科細菌的生物學特征生化反應:活潑生化鑒定(biochemicaldifferentiation):發酵葡萄糖;觸酶陽性;氧化酶陰性;硝酸鹽還原陽性乳糖發酵致病菌:多不發酵乳糖非致病菌:多發酵乳糖第7頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六O-F試驗氧化型發酵型產堿型第8頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六氧化酶試驗
陽性:紫紅色
陰性:無色第9頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六硝酸鹽還原試驗
陽性:紅色陰性:淡黃色
第10頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六復雜的抗原構造O(菌體)抗原LipopolysacchrideH(鞭毛)抗原FlagellaK抗原莢膜Vi抗原InSalmonellaTyphi,thecapsularantigeniscalledViantigen第11頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六抵抗力:不強易變異:多種引起通過接合轉導融原性轉換耐藥性變異毒力性變異生化反應性變異第12頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六致病物質所致疾病臨床意義返回第13頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六菌毛或菌毛樣結構莢膜或微莢膜外膜蛋白內毒素外毒素致病物質第14頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六所致疾病
腸道感染腹瀉、食物中毒、腸熱癥腸道外感染鼠疫(烈性傳染病)、泌尿道感染、肺炎、腦膜炎、傷口化膿、菌血癥返回第15頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六鑒定原則
1.科間鑒別(表9-3)2.將腸桿菌科分為三大類(表9-4)3.屬、種、群、型的區分4.腸桿菌科細菌綜合鑒定流程返回第16頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六科間鑒定:根據O/F試驗、氧化酶試驗、菌體形態和有無鞭毛科內鑒定:生化鑒定分為3個組PAD:苯丙氨酸脫氨酶;VP/葡萄糖酸鹽利用試驗PAD陰性、VP陰性PAD陰性、VP陽性PAD陽性、VP陰性屬間鑒定第17頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸桿菌科與其它革蘭陰性桿菌區別
第18頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六苯丙氨酸脫氨酶試驗
陽性:綠色陰性:黃色第19頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六葡萄糖酸鹽試驗
陽性:黃綠色陰性:藍色返回第20頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六第14章
埃希菌屬
Escherichia第21頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六案例女,31歲,尿頻、尿痛3天。
3天前開始出現尿頻、尿痛,自覺尿有異味;體檢:全身皮膚粘膜正常,恥骨聯合上有觸痛;尿常規檢查:白細胞10-15個/視野,并有多量細菌問題:1.尿標本革蘭染色最可能發現什么性質的細菌?2.這類感染的最常見病原體是什么?3.病原體侵犯尿道的機制是什么?第22頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六
埃希氏菌屬(Escherichia)是人類和動物腸道中的正常菌群以大腸埃希氏菌(E.coli)最為重要出生后數小時就進入腸道,并終生伴隨重要的實驗材料和研究對象:在分子生物學和基因工程實驗中大腸桿菌也是重要的實驗材料和研究對象第23頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六形態染色0.4-0.7μm1-3μm短桿菌革蘭染色陰性有鞭毛有菌毛第24頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六大腸埃希菌革蘭染色第25頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六培養特性與生化反應兼性厭氧營養要求不高生化反應活潑,發酵多種糖類絕大多數發酵乳糖典型E.coli:
IMViC:++--第26頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六大腸埃希菌菌落特征(血平板)第27頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六大腸埃希菌菌落特征(MAC)第28頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六大腸埃希菌ABC腸道桿菌:A.大腸埃希菌純培養鏡下特征(革蘭染色)B.大腸埃希菌在血瓊脂平板上的菌落特征(18-24h)C.大腸埃希菌在麥康凱瓊脂平板上的菌落特征(18-14h)醫學微生物學第29頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六大腸埃希桿菌呈典型粉紅色,乳糖發酵菌落。福氏痢疾桿菌菌落小,無色透明,非乳糖發酵菌。(18hr,37℃)在麥康凱培養基上的大腸埃希桿菌和福氏痢疾桿菌第30頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六大腸埃希菌KIA(AA+-)MIU(++-)第31頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六大腸埃希菌IMViC試驗(++--)
右側為對照(--++)
第32頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六抗原結構O(菌體)抗原:170種以上H(鞭毛)抗原:56種以上K(莢膜)抗原:100種以上O111:K58:H2第33頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六致病性致病物質1、侵襲力K抗原和菌毛與侵襲力有關。K抗原能抗吞噬,菌毛(又稱定植因子)有粘附作用。2、內毒素3、腸毒素由ETEC產生的外毒素,可分為耐熱腸毒素
(ST)和不耐熱腸毒素(LT)兩種。均由質粒介導。LT與霍亂腸毒素作用機理相似,可使腸道細胞中cAMP的水平升高,ST可使細胞內
cGMP量增多,因而引起腸液大量分泌而導致腹泄。第34頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六
另外還有Vero毒素,又稱志賀樣毒素,由溶原性噬菌體介導,為EHEC產生。作用使核糖體滅活,終止蛋白質合成。腸集聚耐熱毒素為EaggEC產生,可導致大量液體分泌。所致疾病:1、腸道外感染條件致病菌感染,大腸桿菌移位至腸外組織或器官引起腸道外感染,以泌尿系統感染為主,如尿道炎、膀胱炎、敗血癥等。尿路感染每ml尿菌量≥10萬,可診斷。2、腸道感染表現為急性腹瀉,為致病性大腸桿菌感染所致,主要有五種類型:第35頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸產毒性大腸桿菌(ETEC):定植因子+LT+ST,引起嬰幼兒和旅游者腹瀉。腸致病性大腸桿菌(EPEC):粘附素+內毒素,是嬰兒腹瀉的主要病原菌。腸侵襲性大腸桿菌(EIEC):侵襲力+內毒素,多侵犯較大兒童和成人,疾病類似菌痢。腸出血性大腸桿菌(EHEC):
Vero毒素+菌毛,5歲以下兒童易感,引起血性腹瀉。腸集聚性大腸桿菌(EaggEC):粘附素+毒素,引起嬰兒持續性腹瀉。第36頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸產毒素型大腸埃希菌(ETEC)致病物質腸毒素(LT和ST)菌毛粘附素(adhesin)內毒素K抗原所致疾病5歲以下嬰幼兒腹瀉旅游者腹瀉第37頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸致病型大腸埃希菌(EPEC
)致病性破壞刷狀緣不產生腸毒素及其他外毒素無侵襲力所致疾病嬰幼兒腹瀉,熱帶國家、醫院常流行水性腹瀉Gutlumen第38頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC)致病物質不產腸毒素,侵襲結腸粘膜上皮細胞ShigelloidE.coli:EIEC無動力、生化反應和抗原結構似Shigella所致疾病主要侵犯較大兒童和成人腹瀉呈膿血便,有里急后重第39頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸出血型大腸埃希菌(EHEC)vero毒素型大腸埃希菌致病物質菌毛:粘附作用毒素:vero毒素所致疾病出血性結腸炎溶血性尿毒綜合征(HUS)5歲以下兒童易感,病情輕重不一1982年美國發現,后世界各地均有流行血清型為O157:H7第40頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六The“lifecycle”ofE.coliO157:H75-10%prevalenceinanimals40%prevalenceinfarms第41頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六E.coliO157:H71982-firstrecognizedasapathogen1985-associatedwithhemolyticuremicsyndrome1990-outbreakfromdrinkingwater1991-outbreakfromapplecider1993-multi-stateoutbreakfromfastfoodhamburgers1995-outbreakfromfreshproduce1996-outbreakinJapan-multi-stateoutbreakfromunpasteurizedapplejuice第42頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸集聚型大腸埃希菌EAggEC致病物質毒素粘附素所致疾病引起嬰兒持續性腹瀉,脫水,偶有血便第43頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六第44頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六(一)檢驗程序
(二)標本采集(三)檢驗方法
(四)耐藥性
(五)結果分析與報告微生物學檢驗第45頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六大腸埃希菌檢驗程序第46頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六腸外感染:標本分離培養涂片染色鑒定(生化反應(IMViC等)腹瀉:糞便鑒別培養基分離培養鑒定檢測腸毒素毒力因子血清型微生物學檢查法第47頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六檢驗方法1.顯微鏡檢查2.分離培養3.鑒定ETECEPECEIECEHECEaggEC第48頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六ST檢測(乳鼠灌胃試驗)第49頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六LT檢測(CHO細胞培養)第50頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六O157:H7菌落特征(MAC)第51頁,共60頁,2022年,5月20日,0點27分,星期六O157:H7菌落特征(山梨醇麥康凱瓊脂平板)返回第52頁,共60頁,2022年,5月20日,0
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