1、關于天然產物化學全套提取分離方法第1頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 Chemistry of Natural Products 第一章 總 論 （Generation）第2頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 本 章 內 容第一節 緒論第二節 生物合成第三節 提取分離方法第四節 結構研究方法第3頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 第三節 提取分離方法一、提取法：1.溶劑提取法（extraction with solvent） 原理：相似相溶常用提取溶劑極性順序： 環己烷、甲苯石油醚（3060、6090）乙醚氯仿（CHCl3，常

2、用二氯甲烷代替）乙酸乙酯（EtOAc）正丁醇（BuOH）丙酮乙醇（EtOH）甲醇（MeOH）KB, 根據值的大小可決定分離采用的方法: 100，簡單的一次萃取，可基本分離. 10010，約10次以上萃取。 2，約100次以上萃取。 第三節 提取分離方法2. 根據物質在兩相溶劑中的分配比不同進行分離P20P21第19頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四2.1 影響分離的因素pH值 對于酸性、堿性、兩性化合物，pH值可改變它們的存在狀態（游離型和解離型），分配比受pH值的影響，因為HA達到99%解離時，pH pKa + 2HA達到99%游離時，pH pKa - 2 第三節 提取

3、分離方法P21第20頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 第三節 提取分離方法（Methods of Extraction and Isolation）pH值的進一步應用pH-梯度萃取法 按酸堿性強弱不同分離酸性、堿性、中性物質，改變pH值使酸堿成分呈不同狀態。 第21頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四液-液萃取分離常用方法：1. 逆流分溶法(CCD)： 是一種多次連續的液-液萃取分離過程。特點：條件溫和，樣品易回收，適用于中等極性、不穩定物質的分離。四、提取分離方法0 1 2 3 n CCD法的分離過程示意圖P22第22頁，共51頁，2022年，5月

4、20日，0點19分，星期四2.紙色譜法（PC）：也叫紙分配色譜（PPC， Paper Partition Chromatography）。 第三節 提取分離方法P23補固定相：濾紙纖維中含有的5-7%水流動相：有機溶劑h1h2Rf = h2 / h1注意：如果流動相為緩沖鹽溶液，則PC為非極性吸附色譜（纖維素色譜）第23頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四3. 液-液分配柱色譜正相色譜：固定相極性大，如水、緩沖液等；流動相極性小，如氯仿、乙酸乙酯等。載體：硅膠（含水可達17%），硅藻土，纖維素等。分離極性大或水溶性成分，如苷類、糖、生物堿等。 洗脫順序：極性小的物質先被洗脫

5、出來。 第三節 提取分離方法（Methods of Extraction and Isolation）P24補第24頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四反相色譜：固定相極性小于流動相。如HPLC反相柱，反相TLC薄層色譜。 固定相：硅膠硅醇基結合烷基，如RP-2，RP-8，RP-18（ODS）。親脂性：RP-18 RP-8 RP-2。 第三節 提取分離方法（Methods of Extraction and Isolation）P24流動相(洗脫劑)：MeOH-H2O，CH3CN-H2O洗脫順序：分離極性大的成分，極性大者先洗脫下來第25頁，共51頁，2022年，5月20日

6、，0點19分，星期四流動相(洗脫劑)：MeOH-H2O，CH3CN-H2O加壓液相柱色譜法普通柱色譜：固定相粒徑大 柱效低 耗時長 溶劑用量大加壓柱色譜：固定相粒徑小 柱效高 時間短 溶劑用量小P24第26頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四加壓液相色譜： a). 中低壓液相色譜：lobar柱 b). 高壓（效）液相色譜：HPLC c). 超高效液相色譜法：UPLC泵檢測器第27頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 液滴逆流色譜( DCCC )： 一種液-液分配色譜，流動相呈液滴形式垂直上升或下降，通過固定相的液柱，實現物質的逆流色譜分離。 特點：不易乳

7、化，樣品可定量回收，分離效果好，特別適合于分離皂苷等水溶性成分。 第三節 提取分離方法（Methods of Extraction and Isolation）液滴逆流色譜(DCCC)示意圖P26第28頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四高速逆流色譜（HSCCC） 第三節 提取分離方法（Methods of Extraction and Isolation） 通過特定的高速行星式旋轉所產生的離心力場作用，使無載體支持的固定相穩定地保留在蛇形管內，并使流動相單向、低速通過固定相，實現連續逆流萃取分離物質的目的。 用于各種物質的分離，包括蛋白、酶、三萜、生物堿、皂苷等。P26第

8、29頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四3.1 吸附分類：物理吸附：相似相吸，吸附解析發生迅速。吸附劑如硅膠、氧化鋁、活性炭等；化學吸附：不可逆性。如堿性氧化鋁對酚酸性成分的吸附，硅膠對生物堿的吸附等。半化學吸附：聚酰胺對酚酸類、醌類的氫鍵吸附。 第三節 提取分離方法3. 根據物質的吸附性差別進行分離吸附色譜法P27第30頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四物理吸附：吸附原理：相似相吸影響吸附過程的三要素： 吸附劑（固定相） 溶質（被分離物質） 溶劑（洗脫劑，展開劑，流動相） 第三節 提取分離方法P28第31頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19

9、分，星期四3.2 硅膠、氧化鋁： 極性吸附劑：載樣量大，吸附力強 硅膠：應用最廣，適用于各類成分分離 氧化鋁：有中性、酸性、堿性氧化鋁。堿性氧化鋁不適合于分離酸性成分，多用于分離生物堿。 第三節 提取分離方法P28第32頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四3.2 硅膠、氧化鋁： 被分離物質吸附力與結構的關系 被分離物質極性大，吸附力強，Rf值小，洗脫難，后被洗脫下來。 官能團極性大小相對一般排列順序： -COOH Ar-OH R-OH R-NH2, RNHR , RNR R R-CO-NRR RCHO RCOR RCOOR ROR RH 第三節 提取分離方法P28溶劑(洗脫

10、劑)的極性與洗脫力的關系 洗脫劑極性越大, 洗脫力越強.第33頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 練習: 從黃花夾竹桃果仁中分離到七種強心苷成分, 比較極性大小和硅膠柱上洗脫順序.名稱RR黃夾苷ACHO(D-Glc)2黃夾苷BCH3(D-Glc)2黃夾次苷ACHOH黃夾次苷BCH3H黃夾次苷CCH2OHH黃夾次苷DCOOHH 第三節 提取分離方法第34頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 第三節 提取分離方法答案：1. 極性大 小：黃夾苷A黃夾苷B 次苷D次苷C次苷A次苷B2. 硅膠柱上的出柱順序：后 先 第35頁，共51頁，2022年，5月20日，0

11、點19分，星期四3.3 活性炭非極性吸附劑吸附力與結構的關系 被分離物質極性越小，吸附越牢固。洗脫力與溶劑的關系 100%醇 含水醇 H2O應用: 脫色等。 第三節 提取分離方法P28第36頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四3.4 聚酰胺(Polyamide) 色譜法： 是由己酰胺聚合成的一類高分子化合物。 第三節 提取分離方法分離原理：主要通過酰胺鍵與酚羥基、酸、醌等形成氫鍵，產生吸附作用。吸附力取決于形成氫鍵締合的能力。P31第37頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 3.4 聚酰胺 吸附力與結構的關系 a.形成氫鍵的基團數目越多, 吸附力越強;

12、b.形成分子內氫鍵者, 吸附力減少; 第三節 提取分離方法P31第38頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 c.芳香化程度越高或共軛鍵越多,吸附力越強; 第三節 提取分離方法溶劑的洗脫能力水醇丙酮NaOH B ASiO2-TLC Rf: A B CPolyamide TLC, Rf: C B A 第三節 提取分離方法答案：第42頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四3.5 大孔吸附樹脂(macro-reticular resin)組成: 苯乙烯，二乙烯苯和致孔劑分離原理:吸附(范德華力和氫鍵)和分子篩作用(多孔性結構)樹脂類型:非極性、中極性和極性三種。

13、非極性：由苯乙烯和二乙烯苯縮合而成，故又稱 芳香吸附樹脂。如D101型 弱極性：如AB-8型。 極 性：含酰氨基、氰基、酚羥基等含氮、氧、硫不同極性功能的吸附樹脂。 第三節 提取分離方法P32第43頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四3.5 大孔吸附樹脂 洗脫劑: H2O 及不同比例的含水醇。 洗脫分離: H2O 洗: 糖,水溶性色素 30% EtOH/ H2O: 極性大的成分 50-75% EtOH: 皂苷類 95% EtOH: 極性小成分 應用: 除多糖, 水溶性色素, 富集苷類成分 第三節 提取分離方法第44頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 透

14、析法: 半透膜, 分子篩濾過作用 超濾法: 分子大小不同, 擴散速度不同 超速離心法: 溶質在超速離心作用下具有不同的 沉降性或浮游性 凝膠濾過法: 分子篩的作用(凝膠滲透色譜,分子 篩濾過, 排阻色譜), 被分離物質按分子 由大到小的順序流出色譜柱.4.根據物質分子大小差別進行分離凝膠濾過法 第三節 提取分離方法4.1 主要的幾種方法P34第45頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 被分離物質按分子量由大到小的順序流出色譜柱.第46頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四4.2凝膠種類:葡聚糖凝膠(Sephadex G): 只適于在水中應用, 分離多糖、

15、蛋白質等.羥丙基葡聚糖凝膠(Sephadex LH-20)： 適用于各類化合物的分離，除具有分子篩的特性外，還起到反相分配色譜的效果。 常用溶劑有甲醇-水、氯仿-甲醇等。 第三節 提取分離方法4.根據物質分子大小差別進行分離凝膠濾過法P35第47頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四 4.3. 膜分離技術 原理：利用小分子物質在溶液中可通過具有一定孔徑的膜，而大分子物質不能通過的性質進行分離。常用于蛋白質、多肽、多糖等與小分子物質的分離。 分類：微濾（0.1m）、超濾（10100 nm）、 納濾（110 nm）、 反滲透（1 nm） 應用：大豆蛋白的工業化生產（超濾）、生產注射液、口服液、醫用酒精、醫療用水等四、提取分離方法P37第48頁，共51頁，2022年，5月20日，0點19分，星期四5.根據物質離解程度不同進行分離離子交換法 固定相：離子交換樹脂（聚苯乙烯高分子化合物，引 入交換基團） 分類： 陽離子交換樹脂：強酸型 RSO3-H+ 弱酸型 RCOO-H+ 陰離子交