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文檔簡介

1、第十九章免疫學檢測第十九章免疫學檢測第十九章免疫學檢測課件第十九章免疫學檢測課件(二)抗原抗體反應的主要影響因素 1.抗原、抗體反應的濃度、比例 2.電解質 3.溫度 4.酸堿度第十九章免疫學檢測課件第十九章免疫學檢測課件三、血清學反應的種類(一)凝集反應(agglutination) 1.直接凝集反應(direct agglutination) 是指顆粒性抗原(凝集原)與相應的抗體(凝集素)直接結合所呈現的凝集現象。如紅細胞ABO血型的測定,細菌凝集試驗。第十九章免疫學檢測課件 2.間接凝集反應 (indirect passive agglutination) 是可溶性抗原或抗體吸附于與免疫

2、無關的微球載體上,形成致敏顆粒,與相應的抗體或抗原在電解質存在的條件下進行反應,出現凝集。第十九章免疫學檢測課件第十九章免疫學檢測課件(二)沉淀反應(precipetation) 是指可溶性抗原與相應抗體在合適的電解質存在下,出現肉眼可見的沉淀現象。 1.單向瓊脂擴散試驗 2.火箭電泳 3.雙向瓊脂擴散試驗 4.對流免疫電泳(二)沉淀反應(precipetation)第十九章免疫學檢測課件第十九章免疫學檢測課件第十九章免疫學檢測課件第十九章免疫學檢測課件(三)補體結合試驗 (complement fixation test,CFT) 是在補體參與下,以綿羊紅細胞和溶血素作為指示系統,來檢測未知

3、抗原或抗體的試驗。第十九章免疫學檢測課件(四)中和反應(nertralization) 毒素、酶、激素或病毒等與其相應的抗體結合后,導致生物活性的喪失。 1.病毒中和反應 2.毒素中和反應 第十九章免疫學檢測課件(五)免疫標記技術 1.免疫酶技術 2.免疫熒光技術 3.放射免疫測定 4.免疫膠體金標記技術(五)免疫標記技術第十九章免疫學檢測課件 第二節 免疫細胞的檢測一、免疫細胞的分離(一)外周血單個核細胞的分離(二)T、B及其它免疫細胞的純化(三)免疫磁珠分離法(四)熒光激活細胞分離儀分離法二、免疫細胞的計數(一)花環形成試驗(二)熒光抗體染色 第二節 免疫細胞的檢測第十九章免疫學檢測課件三

4、、免疫細胞功能的檢測(一)T細胞功能的測定 淋巴細胞轉化試驗:T細胞在體外受特異性抗原或有絲分裂原(PHA、ConA等)刺激后,能轉化為淋巴母細胞。試驗時取外周血,分離淋巴細胞,加入有絲分裂原或特異性抗原,在培養液中培養72小時,經涂片染色后鏡檢計算轉化百分率。三、免疫細胞功能的檢測(二)B細胞功能的檢測1.空斑形成細胞檢測(plaque formingcell,PFC) 是動物體外檢測B細胞功能的方法。2.定量溶血分光光度法(QHS) 又稱B細胞介導的紅細胞定量溶血分光光度法,反映機體的體液免疫功能。3.酶聯免疫斑點試驗(二)B細胞功能的檢測(三)其他淋巴細胞功能的檢測 1.NK 細胞活性測定 (1)NK細胞自然殺傷功能的檢測 (2)ADCC試驗 2.LAK細胞活性測定(四)吞噬細胞功能檢測 1.中性粒細胞吞噬功能的測定 2.大吞噬細胞的檢測(三)其他淋巴細胞功能的檢測 第三節 細胞因子的檢測一、細胞生物學活性檢測法二、免疫學標記技術法三、分子生物學方法 人類干擾素的檢測 白細胞介素-1

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