1、機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立培訓(xùn)課件【實(shí)驗(yàn)原理】 急性腎功能衰竭 指各種原因在短期內(nèi)引起腎臟泌尿功能急劇障礙，以致機(jī)體內(nèi)環(huán)境出現(xiàn)嚴(yán)重紊亂的病理過程，臨床表現(xiàn)有水中毒、氮質(zhì)血癥、高鉀血癥和代謝性酸中毒等急性腎功能不全的分類 根據(jù)病因?qū)W，臨床上將急性腎功能不全分為腎前性、腎性、腎后性三種。機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立3【實(shí)驗(yàn)原理】 急性腎功能衰竭急性腎功能不全急性腎功能的發(fā)病機(jī)制腎缺血腎中毒血流動(dòng)力學(xué)異常腎小管損傷濾過膜受損皮質(zhì)缺氧髓質(zhì)充血腎小管阻塞原尿反漏濾過系數(shù)外髓部供氧 GRF 少尿機(jī)能學(xué)

2、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立4急性腎功能的發(fā)病機(jī)制腎缺血腎中毒血流動(dòng)力學(xué)異常腎小管損傷濾過【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】 健康家兔，雄性，體重1.51.8Kg機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立5【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】 健康家兔，雄性，體重1.51.8Kg機(jī)【實(shí)驗(yàn)器材和藥品】 20%烏拉坦溶液、慶大霉素注射液（1ml:4萬單位）、150U/ml肝素、0.9%生理鹽溶液、苦味酸 BL-420F實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套、動(dòng)脈導(dǎo)管、動(dòng)脈夾、膀胱導(dǎo)尿管、注射器（2ml、5ml）、皮頭針一套、水浴箱、離心機(jī)、絲線 機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立6【實(shí)驗(yàn)器材和藥品】 20%烏拉坦溶液、慶大霉素注射【實(shí)驗(yàn)步驟

3、】家兔稱重、分組-體重相似為一組，并且實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組體重相同或相似生理鹽水作靜脈點(diǎn)滴輸液-耳緣靜脈滴注家兔固定-仰臥位固定剪去頸部和上腹部毛、麻醉- 20%氨基甲酸乙酯注射液4ml/kg，耳緣靜脈注射麻醉在麻醉狀態(tài)下，做頸總動(dòng)脈插管，并連接到試驗(yàn)系統(tǒng)-取血1mL測(cè)血肌酐和在實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)上讀取血壓以及記錄此時(shí)在尿量機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立7【實(shí)驗(yàn)步驟】家兔稱重、分組-體重相似為一組，并且實(shí)驗(yàn)組和在麻醉狀態(tài)下，自恥骨聯(lián)合上方腹部正中線切開皮膚，切口長46cm 夾閉腎動(dòng)脈-沿腹白線打開腹腔，將內(nèi)臟推向左側(cè)，打開后腹膜，暴露腎蒂，分離腎動(dòng)脈，實(shí)驗(yàn)兔和夾閉腎動(dòng)脈30分鐘，對(duì)照組腎臟不夾閉。二

4、組家兔耳緣靜脈注入慶大霉素4萬U/Kg每隔10分鐘，取一次尿液，測(cè)定尿量，并做尿肌酐試驗(yàn)。共取三次。機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立8在麻醉狀態(tài)下，自恥骨聯(lián)合上方腹部正中線切開皮膚，切口長46頸總動(dòng)脈取血，做血肌酐試驗(yàn)最后將家兔一并處死，取出腎臟，觀察并比較家兔的腎臟。機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立9頸總動(dòng)脈取血，做血肌酐試驗(yàn)最后將家兔一并處死，取出腎臟，觀血、尿肌酐測(cè)定方法（見表1）和內(nèi)生肌酐清除率的計(jì)算從頸總動(dòng)脈取血置盛有肝素的離心管內(nèi)，離心后取血漿，按下表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 表1 血漿和尿液肌酐含量測(cè)定 試劑（ml）標(biāo)準(zhǔn)管S標(biāo)準(zhǔn)空白管S0測(cè)定管R測(cè)定空白管R0肌酐標(biāo)準(zhǔn)液0250

5、25-血漿或尿液-02500250血漿或尿液0.5-0.5-空白苦味酸-0.5-機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立10血、尿肌酐測(cè)定方法（見表1）和內(nèi)生肌酐清除率的計(jì)算從頸總動(dòng)脈計(jì)算：機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立11計(jì)算：機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立11【觀察項(xiàng)目】表2 處理前和處理后對(duì)照組家兔各指標(biāo)變化組 血壓 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 內(nèi)生肌酐清除率別 （mmHg) （滴/分） （次/分） （ %） （%） （%） 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后1兔2兔3兔4兔5兔6兔機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立12【

6、觀察項(xiàng)目】表2 處理前和處理后對(duì)照組家兔各指標(biāo)變化組 表3 處理前和處理后實(shí)驗(yàn)組家兔各指標(biāo)變化組 血壓 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 內(nèi)生肌酐清除率別 （mmHg) （滴/分） （次/分） （ %） （%） （%） 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后 處理前處理后7兔8兔9兔10兔11兔12兔機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立13表3 處理前和處理后實(shí)驗(yàn)組家兔各指標(biāo)變化組 【預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果】 二組家兔兔子血壓升高，呼吸加深加快，心率加快，尿量減少，血/尿肌酐的濃度增高，內(nèi)生肌酐清除率升高，各項(xiàng)癥狀明顯易于測(cè)定。機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立14【預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)

7、果】機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立14正常腎臟切面圖機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立15正常腎臟切面圖機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立15急性腎衰竭腎臟切面圖機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立16急性腎衰竭腎臟切面圖機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立急性腎衰竭鏡下圖毒素引起的腎小管壞死通常彌散性累及腎小管，而由缺血（如心衰引起的嚴(yán)重低血壓）引起的腎小管壞死則成片狀受累。機(jī)能學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)急性腎衰竭動(dòng)物模型的建立17急性腎衰竭鏡下圖毒素引起的腎小管壞死通常彌散性累及腎小管，而【注意事項(xiàng)】 1.選擇體重相差不超過250g的家兔進(jìn)行對(duì)照 2.注意麻醉藥的劑量與注入劑量、觀察麻醉情況。 3.專人測(cè)定血/尿肌酐 4.頸總動(dòng)脈插管5.腎臟結(jié)扎線置于腎動(dòng)脈處，避免勒破腎臟6.每項(xiàng)生化檢驗(yàn)所加入試劑的用量要準(zhǔn)確左頸總動(dòng)脈