1、機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷【實(shí)驗(yàn)動物】 家兔 【實(shí)驗(yàn)動物】【實(shí)驗(yàn)器材】兔手術(shù)臺、BL-420生物信息采集系統(tǒng)、Y型氣管插管、動脈夾、動脈插管、靜脈插管、注射器、紗布、棉線、實(shí)驗(yàn)動物常用手術(shù)器械一套、橡皮管、三通管、1%肝素、25%烏拉坦、生理鹽水【實(shí)驗(yàn)器材】兔手術(shù)臺、BL-420生物信息采集系統(tǒng)、Y型氣管【實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理】通過腸系膜上動脈結(jié)扎，即SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)來阻斷部分腸的血液供應(yīng)一段時(shí)間后再恢復(fù)血流灌注，以復(fù)制腸缺血/再灌注損傷的動物模型，探討缺血/再灌注損傷的發(fā)生機(jī)制【實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理】通過腸系膜上

2、動脈結(jié)扎，即SMAO(Super組：持續(xù)缺血組 夾閉腸系膜上動脈1h組：再灌損傷組 夾閉腸系膜上動脈30min，再恢復(fù)血流30min 【實(shí)驗(yàn)分組】組：持續(xù)缺血組 【實(shí)驗(yàn)分組】【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】1. 稱重2. 全麻（耳緣靜脈注射25%烏拉坦4ml/kg） 注意：從耳緣靜脈的遠(yuǎn)心端開始注射，排盡氣泡，速度不宜太快 麻醉效果：角膜反射 基本消失，鉗夾家兔 舌頭無回收，四肢松軟【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】1. 稱重3. 仰臥固定（背部交叉）、備皮 頸部正中（甲狀軟骨下緣胸骨上切跡） 腹部正中（劍突下1.5cm起向下5cm） 注意：平貼皮膚剪毛，勿拎起皮膚！3. 仰臥固定（背部交叉）、備皮4.頸部正中切口行動脈插

3、管切口范圍：頸部正中，甲狀軟骨下緣胸骨上切跡，長約5cm分離左側(cè)頸總動脈：胸骨舌骨肌與胸鎖乳突肌之間深面的頸動脈鞘內(nèi)，與 氣管平行，顏色鮮紅、 較細(xì)、觸之有搏動感， 長約2-3cm，穿線備用4.頸部正中切口行動脈插管分離左側(cè)頸總動脈：胸骨舌骨肌與胸鎖注意：（1）鈍性分離 （2）辨清頸A鞘內(nèi)的血管神經(jīng)血管插管先結(jié)扎遠(yuǎn)心端，后夾閉近心端，剪口部位盡量靠近遠(yuǎn)心端，成45度角朝向近心端剪一小口，約為管徑的1/3-1/2，插管方向朝向近心端，插入1-1.5cm注意：（1）鈍性分離先結(jié)扎遠(yuǎn)心端，后夾閉近心端，剪口部位盡量【插管的注意事項(xiàng)】插管內(nèi)事先應(yīng)加入少量肝素以防凝血；排凈氣泡，記錄前應(yīng)關(guān)閉三通管插管易

4、滑脫，應(yīng)雙線固定，結(jié)扎牢靠勿使插管尖端與血管壁形成角度，避免刺破血管【插管的注意事項(xiàng)】插管內(nèi)事先應(yīng)加入少量肝素以防凝血；排凈氣泡 5.腹部正中切口： 腹正中線自劍突下1.5cm起向下做5cm切口 6.尋找腸系膜上動脈： 將家兔腹腔內(nèi)臟左移，找到齊右腎門對側(cè)垂直向腹主動脈分出的腸系膜上動脈，穿雙線備用，注意避免損傷其他血管（缺血再灌注夾閉時(shí)注意墊橡皮管） 7.記錄一段正常血壓曲線 8.復(fù)制腸缺血-再灌注模型，輕輕提起腸系膜上動脈的穿線，用動脈夾夾閉，同時(shí)觀察各項(xiàng)生理指標(biāo)變化。 9.分組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)并記錄各項(xiàng)指標(biāo)。（組：夾閉腸系膜上動脈1h 組：夾閉腸系膜上動脈30min，再恢復(fù)血流30min） 5.

5、腹部正中切口：腸系膜上動脈示意圖腸系膜上動脈示意圖機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷教學(xué)教材課件機(jī)能實(shí)驗(yàn)家兔腸缺血再灌注損傷教學(xué)教材課件1. 移動內(nèi)臟時(shí)，動作要輕柔2. 分離腸系膜上A時(shí)需小心細(xì)致，不要使用銳利器械，以免損傷血管造成大出血3. 腸系膜上A夾閉要徹底，缺血再灌注組結(jié)扎時(shí)注意墊橡皮管，恢復(fù)血流灌流（復(fù)流）要完全【注意事項(xiàng)】1. 移動內(nèi)臟時(shí)，動作要輕柔【注意事項(xiàng)】【結(jié)果分析】 峰表示：結(jié)扎腸系膜上A 血管床容量 有效循環(huán)血量相對BP 壓力感受器 (+) 減壓反射BP 峰表示：松開腸系膜上A 血管床容量有效循環(huán)血量相對 BP升壓反射（再灌注損傷還未來得及發(fā)生）有時(shí)峰不出現(xiàn)，BP直到死亡 血壓

6、持續(xù)下降，有再灌注損傷【結(jié)果分析】 峰表示：結(jié)扎腸系膜上A 血管床容量 有組：結(jié)扎BP BP趨于平穩(wěn)（相似于結(jié) 扎前），腸壁粉紅暗紅（淤血）腫脹（水腫），無出血點(diǎn)組：結(jié)扎 BPBP趨于平穩(wěn)（機(jī)體自身調(diào)節(jié)） 再灌BP，腸壁暗紅、水腫、出血點(diǎn)BP低于正常1/2時(shí)休克 、組比較說明：缺血損傷與 是不同的 損傷過程， 損傷過程，后者損傷更嚴(yán)重組：結(jié)扎BP BP趨于平穩(wěn)（相似于結(jié) 扎前），腸壁【典型結(jié)果】【典型結(jié)果】【結(jié)果不明顯可能存在的問題】（1）實(shí)驗(yàn)過程中是否發(fā)生了大血？（2）缺血是否完全？（3）再灌注是否通暢？（4）記錄結(jié)果時(shí)基線是否改變？（5）個(gè)體差異 【結(jié)果不明顯可能存在的問題】（1）實(shí)驗(yàn)過程中是否發(fā)生了大血？【I/R的發(fā)生機(jī)制】（1）活性氧的作用 ） （2）鈣超載 ） （3）白細(xì)胞的作用 ）（4）高能磷酸化合物生成障礙 ）【I/R的發(fā)生機(jī)制】（1）活性氧的作用 ） （1）盡早恢復(fù)血流灌流，縮短缺血時(shí)間（2）再灌注時(shí)遵循低溫、低壓、低鈣的原則（3）清除活性氧（4）Ca2+拮抗劑的使用（5）減少白細(xì)胞的激活和炎性介質(zhì)的釋放（6）補(bǔ)充能量及促進(jìn)能量生成（7）啟動細(xì)胞內(nèi)源性保