1、關(guān)于抗體課件1第一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2第一節(jié) 概述第二節(jié) 抗體的結(jié)構(gòu) 第三節(jié) 抗體的生物學(xué)功能第四節(jié) 五類抗體分子的功能及特點(diǎn)第五節(jié) 抗體的抗原性第六節(jié) 人工制備抗體第二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3第一節(jié) 概述 抗體：受抗原刺激后，由B淋巴細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞產(chǎn)生的能與相應(yīng)抗原特異結(jié)合的免疫球蛋白。 一、抗體抗原B漿細(xì)胞抗體TT效應(yīng)淋巴細(xì)胞第三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月41、Ab 的發(fā)現(xiàn)： 1890年，Behring 和北里在德國Koch實(shí)驗(yàn)室使用白喉脫毒外毒素注射馬，在馬血清中發(fā)現(xiàn)了一種能中和白喉外毒素的物質(zhì)，稱為“抗毒素” ，并挽救了成

2、千上 萬的白喉患兒。60%死亡率降到26%。 醫(yī)學(xué)史上的一個(gè)重要里程碑，人類防治傳染病的重要方法血清療法誕生了。獲1901年的第一屆諾貝爾獎(jiǎng)第四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月52、證明是球蛋白證明：抗體是球蛋白； 但球蛋白并非都具有抗體活性第五張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月6 指具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。 與抗體概念的異同。二、免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）抗體：生物學(xué)功能免疫球蛋白：化學(xué)結(jié)構(gòu) IgAb第六張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月7免疫球蛋白存在形式分泌型（secreted immunoglobulin, sIg ）

3、抗體 膜型（membrane immunoglobulin, mIg） BCR (B細(xì)胞受體) B第七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月8第二節(jié) 抗體的結(jié)構(gòu)及功能區(qū) 一、四肽鏈結(jié)構(gòu)“Y”字型 四肽鏈2條重鏈(heavy chain, H)2條輕鏈(light chain, L)二硫鍵連接第八張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月9輕鏈：約210個(gè)AA殘基，分子量約為25kD；可分為和兩型：重鏈：約450-550個(gè)氨基酸殘基，分子量約50-75 kD。 重鏈分、和鏈 IgG （IgG 和 IgG ） IgM （IgM 和 IgM ） IgA （IgA 和 IgA ） IgE （IgE

4、 和 IgE ） IgD （IgD 和 IgD ）-S-S-S-SS-SNCLHHLN第九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月10二、可變區(qū)和恒定區(qū)可變區(qū)（variable region, V 區(qū)）：輕鏈和重鏈靠近N端的約110個(gè)氨基酸變化很大， 稱為可變區(qū)。恒定區(qū)（constant region, C 區(qū)）：免疫球蛋白輕鏈和重鏈中氨基酸序列較保守的區(qū)域。H鏈有一個(gè)VH及34個(gè)CH區(qū)。 （其中IgM, IgE有CH4區(qū)）L鏈具有VL，CL兩個(gè)功能區(qū)。鉸鏈區(qū)：位于CH1與CH2之間，含有豐富的脯氨酸，易伸展彎曲，而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。第十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年

5、6月11第十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月12可變區(qū)： 超變區(qū)：重鏈和輕鏈V區(qū)各有3個(gè)區(qū)域的氨基酸組成和排列順序高度可變，稱為超變區(qū)（hypervariable region, HVR）或決定簇互補(bǔ)決定區(qū)（complementary determining region, CDR），分別為CDR1、CDR2和CDR3。 6個(gè)CDR組成一個(gè)抗原結(jié)合部位。 骨架區(qū)：CDR以外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對(duì)不易變化，稱為骨架區(qū)（framework region, FR）。可變區(qū)第十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月13第十三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月14超變區(qū)

6、決定與抗原決定簇結(jié)合。骨架區(qū)主要穩(wěn)定超變區(qū)的空間構(gòu)型。第十四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月15三、抗體的功能區(qū)或結(jié)構(gòu)域功能區(qū)：是不連續(xù)，緊密折疊的區(qū)域，由重鏈和輕鏈經(jīng)鏈內(nèi)二硫鍵連接而成的球狀結(jié)構(gòu)。Ag Binding抗原結(jié)合位點(diǎn)Complement Binding Site補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)，活化補(bǔ)體Placental TransferIgG 胎盤轉(zhuǎn)移Binding to Fc ReceptorsFC段受體，親細(xì)胞活性同種異型抗原決定簇存在部位，遺傳標(biāo)志促進(jìn)可變區(qū)與抗原表位結(jié)合；暴露補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)，活化補(bǔ)體第十五張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月16四、抗體的其它成分1、連接鏈（J

7、oin Chain, J 鏈) 連接多聚體 Ig 的蛋白質(zhì)，存在于SIgA 和IgM。J 鏈SIgA（分泌型 IgA)J 鏈IgM第十六張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月172、 分泌片（Secretory piece,SP） 只存在于粘膜分泌型IgA中，由上皮細(xì)胞合成，防止蛋白酶對(duì)IgA的水解。SIgASP第十七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月18五、免疫球蛋白的水解片段第十八張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月19水解酶作用位點(diǎn)水解片段及其功能 木瓜蛋白酶鉸鏈區(qū)重鏈間二硫鍵近N端（1）兩個(gè)相同的Fab段：可與抗原結(jié)合（2）一個(gè)Fc段：激活補(bǔ)體、結(jié)合細(xì)胞、通過胎盤胃蛋

8、白酶鉸鏈區(qū)重鏈間二硫鍵近C端（1）一個(gè)具有雙價(jià)活性的 F(ab)2段：可同時(shí)結(jié)合兩個(gè)抗原表位 （2）若干個(gè)小分子多肽碎片(pFc) ：無生物學(xué)作用IgG 酶解后的比較第十九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月20第三節(jié) 抗體的生物學(xué)功能第二十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月21（一） V區(qū)-識(shí)別并特異性結(jié)合抗原 病毒毒素二聚體（SIgA） - 4 價(jià)單體分子（IgG，IgE） - 2 價(jià)五聚體（IgM） - 5 價(jià)意義： （1）中和效應(yīng) - 中和毒素和病毒第二十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月22FabFc固定補(bǔ)體與Fc受體結(jié)合BFc受體Ig（2）與抗原結(jié)合 - C

9、區(qū)變構(gòu)，激活補(bǔ)體，與Fc受體結(jié)合，起多種效應(yīng)。第二十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月23 (二）激活補(bǔ)體 -發(fā)揮溶解細(xì)胞等多種活性Ab（IgM、IgG）+ Ag C1q 補(bǔ)體經(jīng)典途徑 IgG4、IgA和 IgE的凝聚物 補(bǔ)體旁路途徑 第二十三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月24發(fā)揮殺傷作用 稱 ADCC 激活NK細(xì)胞促進(jìn)吞噬 稱調(diào)理作用 結(jié)合吞噬細(xì)胞3. 超敏反應(yīng)：結(jié)合肥大細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞。（三）與Fc受體（FcR)結(jié)合-介導(dǎo)免疫細(xì)胞活性 體內(nèi)多種細(xì)胞具有Fc受體，如吞噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核細(xì)胞、肥大細(xì)胞、粒細(xì)胞。1. ADCC(抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒)作用2. 調(diào)理

10、作用：促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌等顆粒性抗原。第二十四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月25第二十五張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月26第二十六張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月274、通過胎盤(IgG)和粘膜(IgA) IgG是唯一可通過胎盤的抗體，在新生兒抗感染中有重要作用。 SIgA可通過分泌片介導(dǎo)穿越粘膜上皮細(xì)胞，在粘膜表面抗感染中起作用重要。第二十七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月28第二十八張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月29與抗原作特異性結(jié)合激活補(bǔ)體結(jié)合細(xì)胞 激活吞噬細(xì)胞：調(diào)理作用 激活NK細(xì)胞：ADCC作用 激活肥大細(xì)胞：超敏反應(yīng)穿過胎盤

11、和粘膜V區(qū)活性 C區(qū)活性 抗體生物學(xué)活性總結(jié)與具有Fc受體的細(xì)胞結(jié)合第二十九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月30第四節(jié) 五類免疫球蛋白的特性與功能第三十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月31第三十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月321、IgG 1、 單體分子； 2、 四個(gè)亞類； 3、 血清中含量最高(75%Ig)； 4、 半衰期最長(2123天)；第三十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月335、抗感染的主要抗體，具有抗菌、抗病毒、中和毒素急免疫調(diào)節(jié)作用，能激活補(bǔ)體。 6、再次應(yīng)答的主要抗體。 7、唯一能通過胎盤的抗體（在新生兒抗感染中起重要作用）；第三十

12、三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月342、IgM3、在免疫應(yīng)答中產(chǎn)生最早。功能：理論上十價(jià)，但由于空間位阻，結(jié)合價(jià)為五價(jià)，但仍具最強(qiáng)的溶菌、激活補(bǔ)體、免疫調(diào)理作用。2、在個(gè)體發(fā)育中最早合成。4、占血清Ig含量的510%；1、五聚體，分子量最大(900kd)，又稱巨球蛋白）5、半衰期5天第三十四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月353、IgA分兩型血清型：IgA1,單體。占血清Ig10-20%分泌型（SIgA）： IgA2，二聚體； 功能：粘膜局部抗感染免疫，起中和作用，阻止病原微生物黏附；聚合 IgA 激活補(bǔ)體替代途徑。 粘膜局部漿細(xì)胞合成；分泌片由粘膜上皮細(xì)胞合成；第三十五

13、張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月36sIgA的合成和主要作用部位在黏膜第三十六張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月374、IgD2、血清中含量極少,約占血清Ig的1%。 4、B細(xì)胞成熟的表面標(biāo)志。3.存在形式：分泌型 血清中，功能不清 1、單體分子 膜結(jié)合型 B細(xì)胞表面。 意義：B細(xì)胞成熟的標(biāo)志。抗原受體，對(duì)B細(xì)胞活化、增殖和分化起調(diào)節(jié) 作用；成熟B細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)SmIgD和SmIgM。不成熟B細(xì)胞只表達(dá)SmIgM，第三十七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月38未成熟B細(xì)胞 成熟B細(xì)胞 活化或記憶B細(xì)胞mIgM mIgD 第三十八張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6

14、月395、IgE1、單體分子4、具親細(xì)胞性（親細(xì)胞抗體）功能：介導(dǎo)I型超敏反應(yīng) 2、血清中含量極微；3、呼吸道和消化道粘膜漿細(xì)胞產(chǎn)生。第三十九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月40IgGIgMIgA/SIgAIgDIgE存在形式單體五聚體單體/二聚體單體單體相對(duì)分子質(zhì)量(1000)146970160/385184188血清中總Ig百分含量7075510152010.002半衰期235633出現(xiàn)時(shí)間 出生后三個(gè)月出生前出生后四個(gè)月晚晚五大類免疫球蛋白特性比較（1）第四十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月41IgGIgMIgAIgDIgE與補(bǔ)體結(jié)合能力中和作用調(diào)理作用ADCC參與粘

15、膜防御能穿透胎盤與細(xì)胞結(jié)合參與超敏反應(yīng)五大類免疫球蛋白特性比較（2）第四十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月42第五節(jié) 抗體的抗原性Ig具有雙重性： 做為抗體能結(jié)合抗原 做為大分子蛋白質(zhì)能被其它抗體結(jié)合Ag1Ab1（Ag2）Ab2第四十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月43Ig的抗原性可分為3種：1. 同種型抗原（Isotype） 同一種屬每個(gè)個(gè)體都具有的免疫球蛋白的抗原特異性，其抗原決定簇主要存在于Ig的C區(qū)。 第四十三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月44 （1）類和亞類（根據(jù)重鏈C區(qū)抗原性的不同） IgG (gamma) IgA (alpha) IgM (mu

16、) IgD (delta) IgE (epsilon) 類亞類IgG：IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 IgA：IgA1, IgA第四十四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月45（2）型和亞型(根據(jù)輕鏈C區(qū)抗原的差異) 亞型(鏈)(kappa)型(lambda)型 型1：第190位(亮氨酸)2：第190位(精氨酸)3：第154位(甘氨酸)4：第154位(絲氨酸)第四十五張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月462、同種異型抗原（Allotype） 同一種屬不同個(gè)體所具有的Ig在抗原性上的差異，主要存在于重鏈和輕鏈的穩(wěn)定區(qū)特定部位的某個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸的不同中。 第四十六張，P

17、PT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月473）獨(dú)特型抗原（Idiotype） 同一個(gè)體不同Ig的抗原性各不相同，主要存在于Ig 的V區(qū)。 第四十七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月48同一物種Ig共有的抗原性，存在于C區(qū)。同一物種不同個(gè)體Ig抗原性差異，差異在于C區(qū)某些AA不同。同一個(gè)體內(nèi)各Ig抗原性差異，存在于V區(qū)。同一個(gè)體內(nèi)各Ig抗原性差異，存在于V區(qū)。（個(gè)體型標(biāo)志）（種屬型標(biāo)志）（細(xì)胞型標(biāo)志）第四十八張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月49第六節(jié) 人工制備抗體 多克隆抗體（polyclonal antibody，PcAb） 單克隆抗體（monoclonal antibody，

18、McAb） 基因工程抗體 （engineering antibody）第四十九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月50 利用抗原免疫動(dòng)物后從血清中獲得的抗體，含有由不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的針對(duì)不同抗原決定簇的多種類型抗體。（1）預(yù)防、治療感染性疾病（特異性差，可發(fā)生超敏反應(yīng)） 一、多克隆抗體（polyclonal antibody）（2）臨床診斷Ag第五十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月51抗血清（多克隆抗體）的制備第五十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月52 1975年建立的技術(shù)，通過雜交瘤技術(shù)獲得的針對(duì)單一抗原決定簇的高特異性抗體。二、單克隆抗體（monoclonal antibody） 概念：由單一克隆B細(xì)胞產(chǎn)生的,只針對(duì)某一特定抗原決定簇的抗體。第五十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月53第五十三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月54多克隆抗體單克隆抗體來源動(dòng)物免疫血清、恢復(fù)期病人血清或免疫接種人群多為鼠源性特點(diǎn)來源廣泛、制備容易純度高、特異性強(qiáng)、效價(jià)高、少或無血清交叉反應(yīng)、制備成本低組成針對(duì)不同抗原表位的抗體的混合物針對(duì)單一表位，結(jié)構(gòu)和組成高度均一，抗原特異性及同種型一致應(yīng)用疾病的被動(dòng)免疫治療