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文檔簡介
1、結直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達的探索性研究寧夏醫學院附屬醫院尹莉寧夏回族自治區自然科學基金項目編號NZ0552研究背景大腸癌的發病現狀 全球結直腸癌每年發病新病例數達94萬,每年近50萬人死于結直腸癌。結直腸癌死亡居癌癥死因第3位。結直腸癌在我國也是最常見的惡性腫瘤之一,目前居惡性腫瘤發病率第4位。近年來,結直腸癌的發病率呈明顯上升趨勢,此趨勢在大中城市較明顯。結直腸癌發病與生活方式的改變及膳食結構不合理密切相關。隨著人們生活方式、飲食結構的改變、期望壽命的提高,大腸癌的發病率還將進一步提高。 新發病數 死亡數Lung & bronchus - 1.35millionBreast
2、- 1.15millionColon & rectum - 1.02millionStomach - 934,000Liver - 626,000Lung & bronchus - 1.18millionStomach - 700,000Liver - 598,000Colon & rectum 529,000Breast 411,000Parkin DM, CA Cancer J Clin. 2005 Worldwide-2002研究背景研究背景TNM分期與結直腸癌存活率的關系StageTMN5 yr Survival rates0,Tis/1N0M0 90 % T1/2N0M08590%A
3、/B T3/4N0M07075 %AT1/2N1M7791%BT3/4N1M0 54-63%C T4N2 M02637% AnyT AnyN M15cm 14例 選取寧夏醫學院附屬醫院2006年1月2006年4月門診就診者,經腸鏡活檢確診良性腸道疾病患者15例對照組(共35例)選取寧夏醫學院附屬醫院2006年1月2006年4月門診就診者健康體檢者20例對照組試驗方法熒光定量巢式RT-PCR(FQ-nRT-PCR) 實驗操作步驟病例選擇采集外周靜脈血離心提取淋巴細胞RNA提取及定量:采用Trizol總RNA提取液提取細胞總RNA 巢式熒光定量PCR樣本總RNA的提取質量和純度 圖中28s、18s
4、二條清晰的條帶 和稍欠清晰的5s條帶,說明提 取的RNA樣品純度較高,完整 性較好,無DNA污染,無降解。 圖1 RNA提取結果定性檢測結果 M: DNA marker0: RNA fragment amplified from samples (negative)1-10:CRD-BP RNA fragment amplified from samples (positive) Inner 圖2 結直腸癌外周血CRD-BP RNA檢測陽性樣本電泳圖CRD-BP RNA陽性樣本的動力曲線 圖3熒光定量PCR檢測樣本CRD-BP RNA動力曲線圖CRD-BP RNA在結直腸癌患者及對照組的表達
5、組別例數CRD-BP RNA (n)陽性(n)陰性(n)陽性率(%)結直腸癌組 3210*2231.25 對照組健康體檢 200200.00良性疾病組150150.00與健康對照及良性腸道疾病比較 *P0. 05 CRD-BP RNA在結直腸癌不同Dukes分期中的表達水平的比較臨床分期例數(n)CRD-BP RNA 陽性(n)陰性(n)陽性率(%)A+B期 2031715.00C+D期 12 7*558.30與A+B期比較 * P0. 05CRD-BP RNA在有無淋巴結轉移結直腸癌患者中的表達水平的比較與無淋巴結轉移患者比較 * P0. 05病理特征 例數(n)CRD-BP RNA 陽性(
6、n)陰性(n)陽性率(%)淋巴結轉移有127*558.30無2031715.00討 論 CRD-BP RNA在結直腸癌患者外周血中的陽性表達率為31. 25%(10/32),20健康體檢者和15例良性結直腸疾病患者外周血中均未檢出,差異具有統計學意義(P0. 05), 提示CRD-BP RNA表達與以上兩個因素無關。CRD-BP RNA在不同分化程度、不同浸潤深度、不同腫瘤大小的結直腸癌患者外周血中的表達差異無統計學意義(P0. 05),提示CRD-BP RNA表達可能與以上因素無關。CRD-BP RNA的表達與淋巴結轉移密切相關,同時也與臨床分期相關,有淋巴結轉移患者外周血中陽性表達率高于無淋巴結轉移患者,在+期患者外周血中的陽性表達率明顯高于+期,差異有統計學意義(P0. 05),提示CRD-BP RNA在結直腸癌的發生發展中起重要作用。以上結果提示,CRD-BP RNA有可能成為新的結直腸癌腫瘤指標用于
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