1、濕熱滅菌工藝控制與參數(shù)放行實(shí)施展望 科學(xué)原理業(yè)界實(shí)踐法規(guī)變化主講人： 崔強(qiáng)2019年4月E-mail: 主要內(nèi)容主題1. 藥品滅菌工藝的基礎(chǔ)知識主題2. 濕熱滅菌設(shè)備確認(rèn)與工藝驗(yàn)證主題3. 參數(shù)放行實(shí)施展望主題4. 濕熱滅菌工藝法規(guī)變化2主題1. 藥品滅菌工藝的基礎(chǔ)知識3無菌藥品的生產(chǎn)方式 無菌藥品按照生產(chǎn)工藝可分為兩類- 采用最終滅菌工藝的最終滅菌產(chǎn)品- 部分或全部采用無菌生產(chǎn)工藝的非最終滅菌產(chǎn)品-4-兩種生產(chǎn)方式的差別 最終滅菌工藝- 高潔凈環(huán)境 無菌生產(chǎn)工藝- 控制滅菌前微生物污染- 在密封容器中最終滅菌- 極高潔凈環(huán)境- 組成材料分別滅菌- 在密封容器中無進(jìn)一步滅菌處理-5-無菌藥品生

2、產(chǎn)的微生物學(xué)關(guān)注點(diǎn) 最終滅菌工藝- 賦予產(chǎn)品更高的無菌保證水平- 生產(chǎn)中可變因素少，出現(xiàn)偏差的概率低- 幾乎能殺滅產(chǎn)品中的所有微生物- 需要關(guān)注的微生物范圍集中在具有耐受性的芽孢上面 無菌生產(chǎn)工藝- 影響因素多- 各類微生物污染都可能導(dǎo)致工藝失敗- 驗(yàn)證時(shí)以污染瓶數(shù)衡量無菌保證水平-6-微生物的簡要分類病毒細(xì)菌真菌細(xì)菌在環(huán)境中的生存狀態(tài)化學(xué)物質(zhì)水活度芽孢、孢 囊生物膜休眠饑餓生長溫度存活受傷死亡活躍死亡細(xì)胞間的相互作用輻射酸堿度/pH8芽孢的特性 細(xì)菌細(xì)胞與內(nèi)生孢子的區(qū)別特性結(jié)構(gòu)生長態(tài)細(xì)菌細(xì)胞細(xì)菌芽孢細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、原生質(zhì) 厚皮層、外衣和外壁顯微鏡下形態(tài)鈣含量無折射光有折射光高低高無高有低水含

3、量極低吡啶二羧酸（DPA）酶、代謝活性mRNA有低或無無或非常低高對環(huán)境脅迫條件的耐受性（物理或化學(xué)）小分子酸溶性蛋白無有9內(nèi)部pH 7.05.5 6.0芽孢的特性 細(xì)菌芽孢對脅迫條件的耐受性原理處理方式（脅迫條件）濕熱保護(hù)性因素芽孢殺滅機(jī)理酶被滅活內(nèi)核極低含水量、SASP、DPA、礦物化、熱穩(wěn)定性蛋白干熱SASP，熱穩(wěn)定性蛋白，DNA修復(fù) 酶被滅活，DNA損傷UV 輻射內(nèi)核極低含水量、SASP、DPA、礦物化、熱穩(wěn)定性蛋白、DNA修復(fù)DNA損傷 輻射SASP、DPA、礦物化DNA損傷化學(xué)物質(zhì)致密的皮層和內(nèi)膜難以被化學(xué)物質(zhì) DNA損傷（部份），皮層滲透、SASP、DNA修復(fù)和內(nèi)膜損傷或降解10

4、滅菌工藝決策樹（適用于液體制劑）否可采用12115分滅菌工藝可否處方采用采用F08除菌過濾法的滅菌程序可否對原料預(yù)先滅菌，作無菌配制和無菌灌封使用除菌過濾及無菌灌封方式11經(jīng)典滅菌方法 物理滅菌法 利用物理方法，殺滅或截留去除微生物，亦稱物理滅菌技術(shù) 包括干熱滅菌、濕熱滅菌、除菌過濾和輻射滅菌等 化學(xué)滅菌法 利用化學(xué)藥品直接作用于微生物而將其殺滅 包括氣體滅菌、液相滅菌、汽相滅菌12經(jīng)典滅菌方法在制藥業(yè)中的應(yīng)用 最終滅菌藥品 濕熱滅菌法、干熱滅菌法、輻射滅菌法 無菌工藝藥品 除菌過濾法（如產(chǎn)品、工藝氣體等） 熱力學(xué)滅菌法（濕熱/干熱） 輻照滅菌法（如防護(hù)裝備、濾器、一次性用具等） 液相滅菌法（

5、如某些生物制品、器械） 氣體滅菌法（如防護(hù)裝備、濾器等） 汽相滅菌法（進(jìn)入隔離器的包裝材料等）13合適的滅菌工藝 迅速殺滅微生物，但不損害產(chǎn)品的用途 不現(xiàn)實(shí)。除了那些高度穩(wěn)定的材料 在殺滅微生物的同時(shí)，破壞了產(chǎn)品用途 毫無價(jià)值 尋找平衡點(diǎn) 在產(chǎn)品降解與殺滅微生物之間尋找平衡點(diǎn) 在能夠提供最低無菌保證水平的基礎(chǔ)上，保證藥品的安全性、穩(wěn)定性和有效性14滅菌對產(chǎn)品的不利影響因素 濕熱滅菌溫度約為121 干熱滅菌溫度約為170250 輻射滅菌退色、自由基、強(qiáng)度降低 氣體滅菌殘留、化學(xué)反應(yīng) 過濾除菌溶出、析出、吸收 液相滅菌化學(xué)反應(yīng)、高pH 值、腐蝕 汽相滅菌殘留、化學(xué)反應(yīng)、腐蝕 總而言之，對微生物的殺

6、滅依靠惡劣條件15濕熱滅菌工藝的設(shè)計(jì)原則預(yù)計(jì)效期上升驗(yàn)證時(shí)和日常滅菌前微生物監(jiān)控所需要的信息量下降供熱量產(chǎn)品特性法滅菌工藝過度殺滅法滅菌工藝16濕熱滅菌 又稱為Moist heat sterilization under pressure 細(xì)胞內(nèi)起關(guān)鍵作用的蛋白質(zhì)和酶發(fā)生熱變性或凝固。濕度對該破壞性過程起促進(jìn)作用。只要可能，通常取121（2個(gè)大氣壓） 優(yōu)點(diǎn)：無殘留，不污染環(huán)境，不破壞產(chǎn)品表面，容易控制和重現(xiàn)性好 包括脈動(dòng)真空滅菌器（或稱預(yù)真空滅菌器）、蒸汽-空氣混合物滅菌器、過熱水滅菌器等17濕熱滅菌 國內(nèi)外法規(guī)和指南 USP/EP EMA Guideline onsterilization

7、ISO 17665 ISO 11138-BI, ISO 11140-CI HTM 2010 EN 554, 285 PDA TR No. 1 中國藥典脈動(dòng)真空滅菌器示意圖 藥品GMP指南 GB 8599、YY 0646 GB 18281 GB/T 19972干熱滅菌 原理：使微生物氧化而不是蛋白質(zhì)變性，因此溫度要高得多，時(shí)間也相應(yīng)延長 利用干熱滅菌工藝滅菌溫度高、時(shí)間長的特點(diǎn)，可使干熱滅菌同時(shí)具備除熱原的功用 干熱滅菌適用于耐高溫但不適于濕熱或可被濕熱破壞的物品，如玻璃、金屬設(shè)備、器具，不需濕氣穿透的油脂類，耐高溫的粉末化學(xué)藥品等 干熱滅菌不適用于橡膠、塑料及大部分藥品19干熱滅菌 國內(nèi)外法規(guī)

8、和指南 USP/EP EMA Guideline onsterilization ISO 11138-BI, ISO 11140-CI ISO 20857 PDA TR No. 3 PDA TR No. 7 中國藥典 藥品GMP指南 YY 1275 GB 1828120氣體滅菌 滅菌劑的種類 環(huán)氧乙烷（ETO，C2H4O） 臭氧（Ozone，O3） 二氧化氯（Chlorine Dioxide - ClO2） 氣體滅菌不同于汽相滅菌21環(huán)氧乙烷滅菌 原理：蛋白質(zhì)上的羧基（-COOH）、氨基（-NH2）、硫氫基（-SH）和羥基（-OH）發(fā)生烷基化作用，造成蛋白質(zhì)失去反應(yīng)基因，阻礙蛋白質(zhì)的正常化學(xué)反

9、應(yīng)和新陳代謝抑制生物酶活性，包括磷酸致活酶、肽酶、膽堿化酶和膽堿脂 DNA、RNA 發(fā)生烷基化作用而導(dǎo)致微生物的滅活 優(yōu)點(diǎn)：高效，易于擴(kuò)散，廣泛的兼容性 缺點(diǎn)：過程復(fù)雜，安全性問題，職業(yè)健康問題、環(huán)境問題 影響滅菌效果的外在因素 氣體濃度、溫度、相對濕度、載體材料22環(huán)氧乙烷滅菌 由三個(gè)階段組成：預(yù)處理、滅菌和解析 典型的環(huán)氧乙烷滅菌周期 預(yù)熱、抽真空、加濕、加藥、滅菌 國內(nèi)外法規(guī)和指南 USP/EP EMA Guideline on sterilization中國藥典 藥品GMP指南 GB 18279 ISO 11138-BI、ISO 11140-CI、ISO 1113 523輻射滅菌 輻射

10、類型 射線，穿透力差 射線，穿透力略強(qiáng)于射線 射線，穿透力很強(qiáng) X射線，人工產(chǎn)生的電磁輻射 電子束，可用于表面消毒（低能量）或內(nèi)部消毒（高能量） 電離輻射殺滅微生物的作用，可以分為直接作用和間接作用兩種24輻射滅菌 輻射滅菌的優(yōu)點(diǎn)在常溫下處理，特別適用于不耐熱物品的處理不會(huì)產(chǎn)生放射性污染，滅菌后的產(chǎn)品無殘留毒性輻射穿透力強(qiáng)，可深入到被滅菌物體內(nèi)部，滅菌徹底，可對包裝后的產(chǎn)品滅菌對溫度、壓力無特殊要求，常溫常壓下即可進(jìn)行輻照滅菌工藝參數(shù)易于控制,易于進(jìn)行參數(shù)放行，適合于工業(yè)化大生產(chǎn)，節(jié)約能源。25輻射滅菌 國內(nèi)外法規(guī)和指南 USP/EP EMA Guideline onsterilization

11、 ISO 11737 PDA TR No. 11 PDA TR No. 16 中國藥典 藥品GMP指南 GB 1828026過濾除菌 定義： 除菌過濾是指除去流體中微生物的工藝過程，該過程不應(yīng)對產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生不良影響。 包括液體和氣體除菌過濾。藥品生產(chǎn)中采用的除菌過濾膜的孔徑一般不超過0.22m（或者0.2m，這兩種標(biāo)稱沒有區(qū)別） 除菌級過濾器可以有不同的大小、形式和膜材，過濾器的使用者應(yīng)當(dāng)根據(jù)使用需要選擇不同的過濾器。27過濾除菌 除菌級過濾器是指在工藝條件下每cm2 有效過濾面積可以截留107CFU的缺陷假單胞菌（Brevundimonas diminuta, ATCC 19146）的過濾器

12、。 影響細(xì)菌截留效果的因素 過濾器源的因素，如過濾器類型、結(jié)構(gòu)、基礎(chǔ)聚合物、表面改性化學(xué)、孔徑分布和過濾膜的厚度等 工藝源的因素，如流體組分、流體性質(zhì)、工藝條件，產(chǎn)品、料液和生產(chǎn)環(huán)境中實(shí)際微生物污染的特點(diǎn)和水平等28過濾除菌 國內(nèi)外指南性文件 USP/EP EMA Guideline onsterilization 中國藥典 藥品GMP指南 YY/T 0567 YY/T 0918 PDA TR No. 15 PDA TR No. 26 PDA TR No. 40 PDA TR No. 4129汽相滅菌 氣體滅菌與汽相滅菌的區(qū)別 氣體滅菌穿透性好，分布均勻，不易受到溫濕度影響 汽相滅菌，兩個(gè)階段

13、的濃度不同，條件不易控制來自PDA Sterilization Technology30汽相滅菌 滅菌劑的種類 過氧化氫（Hydrogen Peroxide，H2O2） 過氧乙酸（Peracetic Acid - C2H4O3 ） 甲醛（Formaldehyde - CH2O） 汽相滅菌的特點(diǎn) 室溫殘留，穿透性低，環(huán)境中的溫濕度會(huì)有差異，工藝的均一性不好 國內(nèi)外指南文件- USP、PDA TR No. 5131液相滅菌 滅菌劑的種類 過氧化氫（Hydrogen Peroxide，H2O2） 過氧乙酸（Peracetic Acid - C2H4O3 ） 甲醛（Formaldehyde - CH2

14、O） 氫氧化鈉（Sodium Hydroxide） 次氯酸鈉（Sodium Hypochlorite） 液相滅菌的特點(diǎn) 主要受滅菌劑濃度和溫度影響，類似于消毒作用 國內(nèi)外指南文件- USP32滅菌新技術(shù) 電穿孔技術(shù)（Electroporation） 低溫等離子體技術(shù)（Non-Thermal Plasma） 超高壓技術(shù)（High Pressure Processing）HPP處理前的嗜熱脂肪芽孢桿菌HPP處理后的嗜熱脂肪芽孢桿菌 33主題2. 濕熱滅菌設(shè)備確認(rèn)與工藝驗(yàn)證342-1. 工作原理35濕熱滅菌的類型 根據(jù)裝載物與滅菌介質(zhì)的接觸方式，濕熱滅菌分為 蒸汽接觸滅菌，適用于堅(jiān)硬/多孔裝載 濕熱

15、傳遞滅菌，適用于密閉/開放液體裝載 蒸汽接觸法的滅菌介質(zhì)是飽和蒸汽，當(dāng)蒸汽與裝載物接觸時(shí)存在相變過程，通常有脈動(dòng)真空或重力置換兩種工藝。 濕熱傳遞法的滅菌介質(zhì)可以是蒸汽或水，滅菌介質(zhì)與液體不相接觸，通常有蒸汽、過熱水、蒸汽/空氣混和滅菌工藝36蒸汽接觸滅菌的原理 蒸汽接觸滅菌是一個(gè)高效的熱傳遞方式，因?yàn)檎羝┩福佑|溫度較低的物體時(shí)，會(huì)釋放潛熱，生成冷凝水，直到物體溫度與蒸汽溫度相等。 適用于部件滅菌，由于具備熱穩(wěn)定性，使用過度殺滅法。37蒸汽滅菌的熱力學(xué)基礎(chǔ)在2個(gè)大氣壓下的水加熱曲線過熱蒸汽160140120水飽和蒸汽水和蒸汽2199100806040200-20508Joules2707J

16、oules38以恒定速率加熱蒸汽滅菌的熱力學(xué)基礎(chǔ) 壓力-溫度相圖39濕熱傳遞滅菌的特點(diǎn)Demonstrated PNSU10-6不管采用什么需證明的無菌保證水平方法，目標(biāo)都是產(chǎn)品滅菌后的PNSU 106換言之，關(guān)鍵點(diǎn)在于：在生產(chǎn)全過程各個(gè)環(huán)節(jié)對微生物的有效控制Information Needed所需信息Process impact on material工藝對物料影響OverkillmethodBioburden/BIMethodsBioburdenMethod40腔室滅菌設(shè)備例1 預(yù)真空式滅菌工藝此程序特別適用于對包藏或夾帶空氣的物品，如織物、膠管、過濾器和灌裝機(jī)部件等的滅菌41腔室滅菌設(shè)備

17、例1 脈動(dòng)真空式滅菌工藝溫度-壓力曲線圖設(shè)定溫度點(diǎn)溫度標(biāo)準(zhǔn)范圍腔室/排水口溫度裝載物溫度溫度/壓力腔室壓力程序開始大氣壓時(shí)間腔室加熱滅菌后抽真空抽真空脈沖滅菌時(shí)間充汽脈沖干燥 補(bǔ)氣42腔室滅菌設(shè)備例2 蒸汽空氣混合滅菌工藝43腔室滅菌設(shè)備例2 蒸汽空氣混合滅菌工藝的溫度-壓力曲線圖44腔室滅菌設(shè)備例3 重力置換式滅菌工藝工作原理1、蒸汽進(jìn)入2、高溫度蒸汽比重小，在上部3、蒸汽不斷進(jìn)入4、冷凝水及低溫度空氣在底部被擠走45腔室滅菌設(shè)備例3 重力置換式滅菌程序溫度-壓力曲線圖46腔室滅菌設(shè)備例4 水噴淋式滅菌工藝工業(yè)蒸汽滅菌柜腔 室冷卻水水壓縮空氣沒標(biāo)出47腔室滅菌設(shè)備例4 水噴淋式滅菌工藝溫度-

18、壓力曲線圖48在線滅菌系統(tǒng)示例 灌裝線和固定罐相連接的在線滅菌系統(tǒng)492-2. 微生物殺滅模式50濕熱滅菌微生物學(xué)相關(guān)術(shù)語 FT：指T下的滅菌時(shí)間 F0：指標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間。將121 作為標(biāo)準(zhǔn)滅菌溫度，當(dāng)Z設(shè)定為10 時(shí)，滅菌程序賦予被滅菌品121 下的等效滅菌時(shí)間。 D值：在一定溫度下將微生物數(shù)量殺滅90%或下降一個(gè)對數(shù)單位所需要的時(shí)間（分鐘） Z值：當(dāng)某種微生物的D值下降（或 上升）一個(gè)對數(shù)（log）單位時(shí)， 其溫度應(yīng)升高（或降低）的度數(shù)。51濕熱滅菌微生物學(xué)相關(guān)術(shù)語 滅菌率（L，Lethal Rate）系指在某溫度下滅菌1分鐘所的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間(分鐘)，即F 和F 的比值(LF /F )0T0

19、 T公式：L(Tref,z)=10(T-Tref)/zT 被加熱的物體的實(shí)際溫度Tref 參照溫度，通常取121 微生物的z值（可取10），指使微生物的D值變化一個(gè)對數(shù)單位滅菌溫度所需調(diào)節(jié)的度數(shù)z 用121和z取10代入，得L=1，即一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)單位，其它溫度下，可代入計(jì)算52不同溫度和z值下的滅菌率T/()100Z70.001Z80.002Z90.006Z100.008Z110.012Z120.0181150.1390.1930.2680.3730.4390.5180.7201.000.1780.2370.3160.4220.4890.5620.7501.000.2150.2780.3590.4

20、640.5270.5990.7741.000.2510.3160.3980.5010.5620.6310.7941.000.2850.3510.4330.5340.5930.6580.8111.000.3160.3830.4640.5620.6190.6810.8251.00116117118118.51191201211221.391.331.291.251.231.2153F0值示意圖T Exposure 暴熱/保溫Sterilization temperature121Fo100tt3t4t0t1t2t5t554濕熱滅菌中的微生物殘存概率 實(shí)驗(yàn)表明，在恒定的滅菌溫度下，同一種微生物的死亡

21、遵循一級動(dòng)力學(xué)規(guī)則，其死亡速率是微生物的耐熱參數(shù)D和殺滅時(shí)間的函數(shù)，與滅菌程序中微生物的數(shù)量無關(guān)。可用下面的半對數(shù)一級動(dòng)力模式表示： Lg N = Lg N - F /DF0(T,z) TNF 滅菌F分鐘后，微生物存活的數(shù)量F(T,z) 滅菌程序在T和溫度系數(shù)z下的等效滅菌時(shí)間微生物在T下，下降一對數(shù)單位所需的時(shí)間。說明：該特定溫度必DT須與 值計(jì)算中所采用的溫度相一致FN0 初始微生物的數(shù)量552-3. 設(shè)備確認(rèn)/工藝驗(yàn)證56滅菌設(shè)備確認(rèn)生命周期的活動(dòng)用戶需求標(biāo)準(zhǔn)(URS)設(shè)計(jì)確認(rèn)(DQ)功能需求標(biāo)準(zhǔn)(FRS)具體設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)(DDS)工廠驗(yàn)收測試(FAT)性能確認(rèn)/工藝驗(yàn)證(PQ/PV)和持續(xù)

22、監(jiān)控試 車(Commissioning)終端驗(yàn)收測試(SAT)工藝程序開發(fā)設(shè)備靜態(tài)確認(rèn)(IQ)設(shè)備確認(rèn)(IQ/OQ)設(shè)備動(dòng)態(tài)確認(rèn)(OQ)57滅菌設(shè)備的用戶需求（原則） 需要思考的問題工藝的要求是什么（即達(dá)到怎樣的滅菌效果）？滅菌對象：固體物品？液體產(chǎn)品？用于消毒和滅菌帶生物污染的垃圾？最大滅菌物品的尺寸及可能的裝載密度？對滅菌柜的具體要求（如有關(guān)運(yùn)行/控制方面）?58滅菌設(shè)備的用戶需求（原則） 關(guān)注要點(diǎn)安裝部位和維修空間工藝要求控制系統(tǒng)使用效率59滅菌設(shè)備的用戶需求（示例） 工藝要求腔室體積，內(nèi)架車層數(shù)；腔室工作壓力；設(shè)備運(yùn)行時(shí)間；是否需要使用脈動(dòng)真空程序；腔體內(nèi)溫度的分布均勻性；雙扉滅菌柜應(yīng)

23、有門互鎖功能；設(shè)備具有良好的密閉性 安全要求故障檢測和報(bào)警功能；設(shè)備安全罩配備，電氣控制柜配有安全鎖；工作噪聲要求；急停按鈕；斷電保護(hù) 安裝環(huán)境要求60滅菌設(shè)備的用戶需求（示例） 公用系統(tǒng)要求壓縮空氣；純蒸汽；工業(yè)蒸汽；冷卻水；電力要求 外觀及材質(zhì)要求 自控系統(tǒng)要求P L C 自動(dòng)控制，觸摸屏控制；數(shù)據(jù)存儲(chǔ)；具有自動(dòng)記錄打印功能，記錄數(shù)據(jù)傳感器和控制所用傳感器不是同一個(gè)；程序參數(shù)可調(diào)；三級密碼權(quán)限管理；可選擇“ 中文”；控制模式包括“ 自動(dòng)” 和“手動(dòng)”；預(yù)留通信接口 文件與服務(wù)要求 其他要求61建造和測試程序62滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ

24、要求，標(biāo)準(zhǔn)和測試計(jì)劃供貨商的質(zhì)量計(jì)劃用戶需求標(biāo)準(zhǔn)（URS）功能要求標(biāo)準(zhǔn)（FRS）詳細(xì)設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)（DDS）設(shè)備確認(rèn)計(jì)劃 工廠驗(yàn)收計(jì)劃終端用戶驗(yàn)收計(jì)劃63滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ供貨商支持檢查及確認(rèn)活動(dòng)的文件操作及維修手冊 零部件清單設(shè)備布置圖 滅菌柜附屬設(shè)備圖（如裝載車） 生產(chǎn)工藝流程和檢測儀表分布圖 系統(tǒng)性能/功率計(jì)算壓力容器報(bào)告證書接觸產(chǎn)品部件的材料證書64滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ供貨商支持檢查及確認(rèn)活動(dòng)的文件衛(wèi)生管路的電焊記錄及檢查記錄坡度檢查及記錄 與產(chǎn)品接觸物體表面的清潔及鈍化

25、記錄泄壓裝置證書 支持現(xiàn)場安裝技術(shù)要求的相關(guān)活動(dòng) 檢查備件齊全、有備件號、裝配號（必要時(shí)）并有標(biāo)識檢查所有安全裝置就位，功能正常 65滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ支持現(xiàn)場安裝技術(shù)要求的相關(guān)活動(dòng)檢查是否易于操作并且人性化設(shè)計(jì)檢查確認(rèn)腔室及所有管路排水能力/坡度檢查實(shí)際安裝與工藝管路儀表圖相一致檢查所有部件標(biāo)識與管路儀表圖及清單一致檢查部件編號與清單上的信息相一致檢查廠牌已安裝，信息正確無誤 按資料和廠牌，檢查所有電機(jī)標(biāo)識正確檢查公用系統(tǒng)已連接，規(guī)格正確，已標(biāo)類型及限度值66滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)支持現(xiàn)場安裝技術(shù)要求的相關(guān)

26、活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ泵和電機(jī)。檢查標(biāo)牌信息及控制信息，能力符合 技術(shù)標(biāo)準(zhǔn) 檢查設(shè)備已清潔，準(zhǔn)備發(fā)往客戶檢查設(shè)備表面符合客戶技術(shù)要求 檢查所有部件標(biāo)識與管路儀表圖及清單一致根據(jù)生產(chǎn)線應(yīng)急制動(dòng)檢查機(jī)械安全清單，檢查機(jī) 械安全根據(jù)電器安全檢查清單，檢查電器安全檢查所有關(guān)鍵測試儀表已按國標(biāo)校準(zhǔn)。這適用于單個(gè)組件及控制回路（如探頭和對傳感器的輸入；傳感器輸出至控制裝置）67滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ支持功能要求的相關(guān)活動(dòng)測試真空泵的保持真空的能力打開滅菌柜的所有公用系統(tǒng)，并進(jìn)行檢漏檢查設(shè)備表面符合客戶技術(shù)要求 測試運(yùn)行設(shè)備的分貝數(shù)檢

27、查用于每件直接接觸設(shè)備的潤滑油所有過濾器已適當(dāng)安裝，并有完整性測試記錄檢查任何可編程設(shè)定點(diǎn)的運(yùn)行范圍用戶公用系統(tǒng)的檢查：電、最高峰蒸汽流量、最高峰時(shí)的蒸汽質(zhì)量、管路口徑、真空泵水溫 68滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ支持功能要求的相關(guān)活動(dòng)在滅菌模擬期間，用經(jīng)校準(zhǔn)的表面溫度計(jì)測試腔室及夾套的溫度空載熱分布程序測試：-帶孔/硬質(zhì)物品裝載程序-液體程序-過濾器滅菌程序-去污染滅菌程序-空氣檢測器-空氣去除程序-壓力檢漏程序-真空檢漏程序69滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ進(jìn)行軟件系統(tǒng)確認(rèn)的測試軟件質(zhì)量管

28、理計(jì)劃軟件控制體系結(jié)構(gòu)圖 配線、電纜及通信圖解支持PLC/人機(jī)界面設(shè)備的用戶手冊系統(tǒng)圖記錄所有計(jì)算機(jī)軟件的版本號、確認(rèn)版本檢查控制面板(觸摸屏導(dǎo)航)和系統(tǒng)功能性確認(rèn)確認(rèn)PLC的版本 記錄所有計(jì)算機(jī)硬件的部件號、版本號和序列號 70滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ進(jìn)行軟件系統(tǒng)確認(rèn)的測試檢查參數(shù)輸入的格式及上下限 試驗(yàn)人機(jī)界面（HMI）的導(dǎo)航測試HMI面板對監(jiān)控與數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)（SCADA） 的功能和顯示術(shù)語和報(bào)警功能測試，報(bào)警及其信號確認(rèn) 試驗(yàn)并確認(rèn)安全互鎖及控制功能(門開/關(guān)、蒸汽閥、 門密封支持等)數(shù)據(jù)完整性試驗(yàn)(數(shù)據(jù)是否充允許長久貯存) 檢查確

29、認(rèn)追溯性(能否創(chuàng)建永久的更改追溯記錄） 71滅菌設(shè)備的確認(rèn)活動(dòng)清單（示例）目標(biāo)/措施/活動(dòng)FAT SW S AT IQ OQ進(jìn)行軟件系統(tǒng)確認(rèn)的測試比例微積分控制器（PID）參數(shù)配置打印輸出 通訊中斷檢查操作功能登錄安全級別（密碼試驗(yàn)）檢查關(guān)鍵探頭自動(dòng)故障功能，所有安全設(shè)備及功 能均應(yīng)通過實(shí)際試驗(yàn)檢查檢查確認(rèn)配線的輸入及輸出檢查確認(rèn)所有編程系統(tǒng)備份保證故障后的修復(fù) 停電及恢復(fù)控制器的檢查及確認(rèn)程序報(bào)警/終止測試 檢查確認(rèn)不同級別人員登錄密碼及安全水平72滅菌工藝的開發(fā)與確認(rèn)滅菌工藝開發(fā)濕熱滅菌工藝的選擇否是是熱穩(wěn)定材料嗎？按產(chǎn)品特性方法SAM=steam & air mixture=蒸汽空氣混合

30、物多孔/堅(jiān)硬物品密封液體產(chǎn)品要被滅菌品的形式？需抽真空？需加壓嗎？要不要脈動(dòng)真空滅菌器？可用過熱水程序？有無可不可74滅菌微生物學(xué)的基本概念 無菌(Sterility)：是指產(chǎn)品中不存在任何活的微生物。這個(gè)絕對的概念，無法用實(shí)驗(yàn)來證明，不能成為工業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 滅菌工藝(Sterilization)： 通過適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)手段，將一定數(shù)量活性微生物完全殺滅，并且使其生命活動(dòng)產(chǎn)生不可逆轉(zhuǎn)的過程。 無菌保證值（SAL）：指經(jīng)滅菌后非無菌品的概率。通常為10-6或10-3（來自ISO 11139）75滅菌工藝的驗(yàn)證（PQ/PV） 共同點(diǎn) 滅菌劑分布與穿透 微生物殺滅水平 目的 保證產(chǎn)品用途 達(dá)到滅菌效果76

31、濕熱滅菌工藝的無菌標(biāo)準(zhǔn) 原則標(biāo)準(zhǔn)-定義通過物理/生物學(xué)方法證明，單位產(chǎn)品內(nèi)微生物存在的概率不得超過百萬分之一，即批產(chǎn)品的污染概率不得超過百萬分之一 實(shí)際控制標(biāo)準(zhǔn)過度殺滅法殘存概率法77滅菌工藝驗(yàn)證（PV）要素 每種裝載方式下的熱穿透試驗(yàn) 證明特定滅菌程序殺滅微生物的均一性和有效性 證明滅菌程序的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性 證明滅菌程序?qū)Ρ粶缇锲返倪m用性 容器內(nèi)部產(chǎn)品的熱穿透試驗(yàn) 證明在每種裝載方式下：各點(diǎn)溫度分布的均一性、滅菌結(jié)果的重現(xiàn)性高 證明最冷點(diǎn)達(dá)到了設(shè)定效果中低78滅菌工藝驗(yàn)證（PV）常用BI形式 生物指示劑試驗(yàn) 結(jié)果與熱穿透試驗(yàn)保持一致 所有測試點(diǎn)均應(yīng)確保SAL不低于10-6 試驗(yàn)次數(shù)足以符合

32、統(tǒng)計(jì)學(xué)要求（至少重復(fù)3次試驗(yàn)，試樣數(shù)為10 20支/次）79滅菌工藝殺滅力的表述 生物殺滅時(shí)間（FBiological） 用以證明滅菌程序殺滅效果的標(biāo)準(zhǔn)BI制劑 試驗(yàn)結(jié)果可直接反映滅菌效果 有時(shí)可取代物理手段的不足(如探頭無法放入) 局限性：較難進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 物理殺滅時(shí)間（FPhysical） 長期的試驗(yàn)確立了標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間Fo與微生物殺滅的效果的相關(guān)性，因此，人們常將它作為評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 精確測定熱分布和熱穿透狀況，用于計(jì)算不同滅菌程序的滅菌效果 測量數(shù)據(jù)便于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析80滅菌工藝驗(yàn)證合格標(biāo)準(zhǔn) 典型的物理確認(rèn)合格標(biāo)準(zhǔn) 用熱穿透探頭測得超過設(shè)定溫度的最短及最長時(shí)間 F0的下限及上限 滅菌階段結(jié)束時(shí)的

33、最低F0值 滅菌階段的最低和最高壓力 飽和蒸汽溫度和壓力之間的關(guān)系 滅菌階段腔室的最低和最高溫度 熱穿透溫度探頭之間的最大溫差或F0的變化范圍 熱分布試驗(yàn)中溫度探頭間的最大溫差 最長平衡時(shí)間 最少正常運(yùn)行的探頭數(shù)81滅菌工藝驗(yàn)證合格標(biāo)準(zhǔn) 生物確認(rèn)合格標(biāo)準(zhǔn)（示例）： 微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)中，孢子的對數(shù)下降值符合預(yù)期標(biāo)準(zhǔn) 規(guī)定的陽性和陰性對照符合設(shè)定要求 應(yīng)在滅菌程序性能確認(rèn)中進(jìn)行必要的論證，證明F 和F 間PHYBIO大體上一致（基本一致：F 可能小些，F(xiàn) 可能大些）生物物理82選用BI的注意事項(xiàng) 只能采用芽孢來做濕熱滅菌程序的挑戰(zhàn)性試驗(yàn)： 純度要求-這些孢子必須達(dá)到一定的純度（基本沒有生長態(tài)菌或微小

34、的殘骸和團(tuán)塊等） 穩(wěn)定性好-有確定的耐熱特性（不應(yīng)有大的波動(dòng)） 有合法來源-其母代菌株應(yīng)該從公認(rèn)的菌種庫購買 挑戰(zhàn)試驗(yàn)中，所選用生物指示劑的接種量應(yīng)比產(chǎn)品或其它裝載的生物負(fù)荷高 生物指示劑的耐熱性應(yīng)比生物負(fù)荷強(qiáng)83濕熱滅菌工藝驗(yàn)證常用的BI 在過度殺滅程序的確認(rèn)中，最常采用BI： 嗜熱脂肪芽孢桿菌/Geobacillus stearothermophilus，前稱Bacillusstearothermophilus； 也可采用其他對濕熱滅菌耐熱性強(qiáng)的微生物。 在采用“殘存概率法”確認(rèn)中，典型的BI有： Clostridum sporogenes（生孢梭菌，梭狀芽孢桿菌 ） Bacillus a

35、trophaeus（萎縮芽孢桿菌） Bacillus smithii（史密氏桿菌，前稱凝結(jié)芽孢桿菌） Bacillus subtilis（枯草芽孢桿菌5230）84對市銷售BI的確認(rèn) 進(jìn)行形態(tài)學(xué)和純度確認(rèn)(至少鑒別至菌屬) 芽孢計(jì)數(shù)復(fù)核 蒸汽滅菌工藝用BI，95-100下暴熱預(yù)處理15分鐘 環(huán)氧乙烷和干熱滅菌工藝用BI，80-85下暴熱預(yù)處理10分鐘 預(yù)處理后迅速轉(zhuǎn)移至冰水浴內(nèi) 合格標(biāo)準(zhǔn)：Lg(實(shí)測值)和Lg(標(biāo)示值)在0.3-1.48之間 D值復(fù)核(根據(jù)需要及實(shí)驗(yàn)室能力來定)85生物指示劑驗(yàn)證- 過度殺滅工藝 選擇與滅菌條件（工藝、對象及程序）相適應(yīng)的生物指示劑（B.stearothermo

36、philus ATCC 7953 ） 生物指示劑與溫度探頭并列在同一部位(10-20支) 按規(guī)定條件培養(yǎng)生物指示劑，嗜熱脂肪芽孢桿菌的培養(yǎng)溫度為55-60oC，培養(yǎng)7天，每天檢查 對生物指示劑用培養(yǎng)基進(jìn)行促生長檢查 進(jìn)行陽性對照試驗(yàn) 所有經(jīng)受挑戰(zhàn)試驗(yàn)的樣品均呈陰性86生物指示劑驗(yàn)證 非過度殺滅工藝 選擇與滅菌條件（工藝、對象及程序）相適應(yīng)的生物指示劑 生物指示劑的耐熱性 不得低于孢子在相應(yīng)產(chǎn)品中的耐熱性 不得低于產(chǎn)品中污染菌的耐熱性 用于每次挑戰(zhàn)試驗(yàn)的所有BI批號必須相同 生物指示劑的接種量計(jì)算F = D ( logN - logN )0121.10t87驗(yàn)證條件優(yōu)化 案例：某公司生產(chǎn)三種大產(chǎn)

37、品ABC輸液產(chǎn)品A、B和C ，與微生物相關(guān)的基本參數(shù)如右表含菌量限度10001001000污染菌D DD DD D 請根據(jù)表中參數(shù)，設(shè)計(jì)出產(chǎn)品滅菌程序的BI驗(yàn)證方案D值BBBIBBBIBBBI滅菌117117117程序 25分 20分 20分 BI=生物指示劑 BB=污染菌F09-130.88.5-120.99-130.7DBI88驗(yàn)證條件優(yōu)化 可只選B代表三個(gè)產(chǎn)品，理由： 生物指示劑在其中的耐熱性最高，而滅菌程序的F0值下限8.5分鐘低于其它兩個(gè)產(chǎn)品 驗(yàn)證時(shí)，生物負(fù)荷取高限，以103CFU/瓶計(jì)算 由于D D ，滅菌程序應(yīng)使BI下降9個(gè)對數(shù)單位，才能確保產(chǎn)品BBBI污染菌殘存概率10-6 解

38、決高接種量難以達(dá)到的方法（見后）89標(biāo)準(zhǔn)溶液的使用要求 孢子在標(biāo)準(zhǔn)溶液中的耐熱性孢子在產(chǎn)品溶液中的耐熱性 孢子的耐熱性在標(biāo)準(zhǔn)溶液中比較穩(wěn)定 有孢子在標(biāo)準(zhǔn)溶液中的耐熱性資料 標(biāo)準(zhǔn)溶液更方便于制備和檢測 適用于替代滅菌程序相近的不同產(chǎn)品的滅菌工藝驗(yàn)證90滅菌工藝驗(yàn)證示例-1 過度殺滅工藝期望的殺滅時(shí)間F 和F 均12分。如使用D為2.1PHYBIO分的BI，那么完全殺滅挑戰(zhàn)試驗(yàn)中BI的最低N0可通過以下方法計(jì)算： LgN =LgN F/D=Lg10012/2.10F LgN =5.71；N =5.210500 如最低滅菌工藝（MAC）能殺滅N0=5.2105、D=2.1分鐘的生物指示劑，即證明此工

39、藝達(dá)到過度殺滅工藝（FBIO12.0分鐘）要求91滅菌工藝驗(yàn)證示例-2 非完全殺滅終點(diǎn)工藝。如設(shè)計(jì)要求F 為8分鐘；BI接種數(shù)量N 為002106；D=2.0分鐘，則終點(diǎn)NF的最大值可以通過計(jì)算得到，同樣可保證滅菌程序賦予被滅菌品期望的FBIO LgN =LgN F/D = Lg21068.0/2.0（降4lg單位）F0 LgN =6.34.0=2.30； N 2.0102FF 如最低滅菌工藝（MAC）能使D=2.0分鐘的生物指示劑由N =2106下降至N 2.0102（終點(diǎn)值）時(shí)，則證明生物殺滅時(shí)0F間FBIO8分鐘。92滅菌工藝驗(yàn)證文件編制示例1 Purpose & Scope 目的及范圍

40、2 Background 背景2-1 產(chǎn)品介紹2-2 滅菌釜介紹（加熱及水噴淋裝置，溫度控制系統(tǒng)）2-3 裝載及位置命名2-4 滅菌程序2-5 術(shù)語解釋3 Risk Analysis 風(fēng)險(xiǎn)分析風(fēng)險(xiǎn)識別：產(chǎn)品內(nèi)部冷熱點(diǎn)、滅菌釜腔室內(nèi)溫度分布風(fēng)險(xiǎn)識別：產(chǎn)品熱穿透、產(chǎn)品裝載方式93風(fēng)險(xiǎn)識別：挑戰(zhàn)試驗(yàn)參數(shù)、生物指示劑適用性滅菌工藝驗(yàn)證文件編制示例4 Personnel 實(shí)施人員5 Calibration 設(shè)備儀器校驗(yàn)5-1 滅菌釜溫度控制系統(tǒng)介紹5-2 滅菌釜測溫探頭5-3 驗(yàn)證用儀器6 Standard Procedures 試驗(yàn)規(guī)程7 Validation Method 驗(yàn)證方法7-1 驗(yàn)證策略7

41、-2 樣品制備94滅菌工藝驗(yàn)證文件編制示例7-3 樣品測試a 包裝內(nèi)熱分布b 滿載溫度分布c 單車裝載溫度分布d 最小裝載熱穿透e 單車裝載熱穿透f 滿載熱穿透g 生物指示劑挑戰(zhàn)試驗(yàn)8 Deviations 偏差管理95主題3. 參數(shù)放行實(shí)施展望96參數(shù)放行定義 歐盟GMP附錄17 - 參數(shù)放行是實(shí)時(shí)放行的一種形式。在符合GMP特定要求及參數(shù)放行相關(guān)要求條件下，基于對工藝監(jiān)測（如濕熱滅菌的溫度、壓力和時(shí)間）文件的回顧審查而不測試某個(gè)樣品的某項(xiàng)具體特性（ICH Q8 Q&A），保證產(chǎn)品達(dá)到預(yù)期質(zhì)量的放行方法。 美國FDA - 參數(shù)放行是一個(gè)無菌保證放行系統(tǒng)，它基于對經(jīng)過驗(yàn)證的滅菌工藝的控制，用確

42、定的關(guān)鍵工藝參數(shù)替代無菌檢驗(yàn)，滿足21 CFR211.165(a) 以及211.167(a) 的要求。 注：只適用于無菌保證計(jì)劃，重心放在滅菌工藝。 中國參數(shù)放行討論稿- 參數(shù)放行系指根據(jù)有效的控制、監(jiān)測以及滅菌工藝驗(yàn)證的數(shù)據(jù)資料，對產(chǎn)品的無菌保證進(jìn)行評價(jià)，以替代根據(jù)成品無菌檢查結(jié)果的放行系統(tǒng)。參數(shù)放行目前僅限于采用濕熱滅菌法生產(chǎn)的藥品。97國外藥典要求 歐洲藥典5.1.1 - 當(dāng)最終采用一個(gè)經(jīng)全面驗(yàn)證，以蒸汽、干熱或輻射方式滅菌的滅菌法時(shí)，可實(shí)施參數(shù)放行。經(jīng)過主管部門批準(zhǔn)后，可以根據(jù)批產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝參數(shù)而無需根據(jù)樣品的無菌檢查結(jié)果來決定一批滅菌產(chǎn)品是否準(zhǔn)予放行。 美國藥典1222 - 參數(shù)放

43、行是為確保藥品安全性、純度、有效性和含量符合商業(yè)或臨床用途要求，而依靠過程控制代替終產(chǎn)品檢驗(yàn)的放行方式。參數(shù)放行的基礎(chǔ)是證明同產(chǎn)品關(guān)鍵質(zhì)量屬性相關(guān)的工藝條件可在生產(chǎn)過程中達(dá)到并保持。98無菌檢查實(shí)驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)局限0.0010.010.050.100.1510200.010.020.090.180.400.650.660.890.990.800.96501000.050.090.260.950.340.630.950.920.99300當(dāng)產(chǎn)品污染率為千分之一時(shí)，取20瓶樣品檢驗(yàn)，漏檢率達(dá)到98%3,00099參數(shù)放行的實(shí)踐要求 參數(shù)放行須得到政府部門的批準(zhǔn) 嚴(yán)格控制和監(jiān)測滅菌前產(chǎn)品中的微生物污染狀

44、況 嚴(yán)格控制滅菌工藝 須用指示劑監(jiān)控每個(gè)滅菌批 須有區(qū)分已滅菌和未滅菌產(chǎn)品的系統(tǒng) 容器的密封完好性驗(yàn)證100參數(shù)放行法的首選工藝 濕熱滅菌工藝是參數(shù)放行的首選工藝有效、簡單微生物殺滅范圍廣研究透徹，可信賴度高易于控制和驗(yàn)證101濕熱滅菌工藝的參數(shù)放行流程控制 列出滅菌工藝的操作步驟 明確每一關(guān)鍵參數(shù)的一級和二級控制限度 明確必須報(bào)警的運(yùn)行參數(shù)及機(jī)械性能參數(shù) 安裝足夠的輔助性傳感/測量儀器給予主系統(tǒng)充分的保障 保證所有的工藝參數(shù)監(jiān)測器均處在經(jīng)校驗(yàn)的合格狀態(tài)下工作 產(chǎn)品滅菌工藝驗(yàn)證之前應(yīng)首先對滅菌釜進(jìn)行徹底的（空載）性能確認(rèn) 分別在滿載或部分裝載狀態(tài)下，驗(yàn)證滅菌設(shè)備的性能102濕熱滅菌工藝參數(shù)放行

45、的關(guān)鍵工藝參數(shù) 腔室溫度（一級控制、二級控制，溫度儀表） 腔室壓力（一級控制、二級控制，壓力儀表） 滅菌時(shí)間（一級控制為暴熱時(shí)間，二級控制為各階段的開始時(shí)間和相應(yīng)時(shí)間間隔） 滅菌工藝賦予產(chǎn)品的F0值 評判標(biāo)準(zhǔn)：如果上述不合格關(guān)鍵參數(shù)超過一個(gè)，即使生物指示劑指示合格，該批應(yīng)視為非無菌批。更不得以無菌檢查結(jié)果來仲裁103參數(shù)放行的基礎(chǔ) 無菌保證系統(tǒng) 產(chǎn)品設(shè)計(jì) 對原料和輔助系統(tǒng)(如與藥液直接接觸的氮?dú)?微生物污染狀況的監(jiān)控 生產(chǎn)過程的污染控制以避免污染菌侵入產(chǎn)品繁殖 防止已滅菌產(chǎn)品與未滅菌產(chǎn)品之間的混淆 產(chǎn)品的密封完整性 滅菌工藝過程，確定關(guān)鍵和重要滅菌參數(shù) 全面的質(zhì)量管理體系，如變更控制、風(fēng)險(xiǎn)管理

46、、CAPA、偏差管理、根本原因分析、培訓(xùn)、書面規(guī)程（文件）、產(chǎn)品質(zhì)量評價(jià)、計(jì)劃預(yù)修系統(tǒng)、人為差錯(cuò)的預(yù)防、驗(yàn)證和校驗(yàn)等104參數(shù)放行的基本條件 強(qiáng)化微生物/工程學(xué)的監(jiān)管 教育背景：工程學(xué)和微生物學(xué) 經(jīng)驗(yàn)：有微生物學(xué)和滅菌工程設(shè)計(jì)的工作經(jīng)驗(yàn) 經(jīng)濕熱滅菌和無菌保證的專業(yè)培訓(xùn) 有足夠的能力，來監(jiān)管無菌保證程序的開發(fā)、驗(yàn)證以及日常控制/監(jiān)測，包括： 驗(yàn)證計(jì)劃和科學(xué)合理的手段 產(chǎn)品的處置 有微生物學(xué)及工程設(shè)計(jì)資質(zhì)的人員參數(shù)放行程序的基本要素 無菌保證計(jì)劃以可靠的質(zhì)量系統(tǒng)為基礎(chǔ) 可靠的無菌保證計(jì)劃由以下要素組成： 對微生物和工程學(xué)的強(qiáng)化監(jiān)管 質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理 產(chǎn)品設(shè)計(jì) 生產(chǎn)工藝的設(shè)計(jì) 對環(huán)境和產(chǎn)品生物負(fù)荷的監(jiān)測

47、和控制 將已滅菌與未滅菌產(chǎn)品隔離（裝載監(jiān)控） 滅菌系統(tǒng)設(shè)計(jì) 滅菌工藝開發(fā)和驗(yàn)證 持續(xù)監(jiān)測和控制 變更控制106風(fēng)險(xiǎn)評估的重點(diǎn) 人員 滅菌系統(tǒng)的設(shè)計(jì) 滅菌工藝開發(fā)和確認(rèn)/驗(yàn)證 持續(xù)監(jiān)測和控制 變更控制 產(chǎn)品設(shè)計(jì) 生產(chǎn)工藝設(shè)計(jì) 環(huán)境，產(chǎn)品生物負(fù)荷的監(jiān)測和控制 已滅菌未滅菌品的隔離工藝流程的風(fēng)險(xiǎn)評估108參數(shù)放行的歷史 1981年美國首個(gè)藥品參數(shù)放行申請遞交。 1985年1月，在正式的行業(yè)指南公布前，獲得獲批 首次遞交的申請被視為次后申請的標(biāo)準(zhǔn)模式 1987年，F(xiàn)DA頒布法規(guī)CPG 7132a.13 直到上世紀(jì)90年代中期，才有其他公司獲得參數(shù)放行的批準(zhǔn) 2010年2月，F(xiàn)DA 參數(shù)放行申報(bào)指南 2

48、012年8月，F(xiàn)DA更新了CPG（達(dá)標(biāo)指南）109參數(shù)放行已達(dá)成國際性共識 美國 英 瑞 瑞 愛 荷 挪 西 新 澳大利亞參數(shù)放行引入ICH文件之中ICH110主題4. 濕熱滅菌工藝法規(guī)變化111美國藥典中的微生物學(xué)章節(jié)內(nèi)容 Chart 10b. MicrobiologySterile Products 55 BIOLOGICAL INDICATORSRESISTANCE PERFORMANCE TESTS 63 MYCOPLASMA TESTS 71 STERILITY TESTS 151 PYROGEN TEST 1072 DISINFECTANTS AND ANTISEPTICS 111

49、2 APPLICATION OF WATER ACTIVITY DETERMINATION TO NONSTERILE PHARMACEUTICALPRODUCTS 1113 MICROBIAL CHARACTERIZATION, IDENTIFICATION, AND STRAIN TYPING 1116 MICROBIOLOGICAL CONTROL AND MONITORING OF ASEPTIC PROCESSING ENVIRONMENTS 1117 MICROBIOLOGICAL BEST LABORATORY PRACTICES 1207 PACKAGE INTEGRITY E

50、VALUATIONSTERILE PRODUCTS 1207.1 PACKAGE INTEGRITY TESTING IN THE PRODUCT LIFE CYCLETEST METHOD SELECTIONAND VALIDATION 1207.2 PACKAGE INTEGRITY LEAK TEST TECHNOLOGIES 1207.3 PACKAGE SEAL QUALITY TEST TECHNOLOGIES112美國藥典中的微生物學(xué)章節(jié)內(nèi)容 Chart 10b. MicrobiologySterile Products 1208 STERILITY TESTINGVALIDAT

51、ION OF ISOLATOR SYSTEMS 1211 STERILIZATION AND STERILITY ASSURANCE OF COMPENDIAL ARTICLES 1222 TERMINALLY STERILIZED PHARMACEUTICAL PRODUCTSPARAMETRIC RELEASE 1223 VALIDATION OF ALTERNATIVE MICROBIOLOGICAL METHODS 1223.1 VALIDATION OF ALTERNATIVE METHODS TO ANTIBIOTIC MICROBIAL ASSAYS 1228 DEPYROGEN

52、ATION 1228.1 DRY HEAT DEPYROGENATION 1228.3 DEPYROGENATION BY FILTRATION 1228.4 DEPYROGENATION BY RINSING 1228.5 ENDOTOXIN INDICATORS FOR DEPYROGENATION113美國藥典中的微生物學(xué)章節(jié)內(nèi)容 Chart 10b. MicrobiologySterile Products 1229 STERILIZATION OF COMPENDIAL ARTICLES 1229.1 STEAM STERILIZATION BY DIRECT CONTACT 122

53、9.2 MOIST HEAT STERILIZATION OF AQUEOUS LIQUIDS 1229.3 MONITORING OF BIOBURDEN 1229.4 STERILIZING FILTRATION OF LIQUIDS 1229.5 BIOLOGICAL INDICATORS FOR STERILIZATION 1229.6 LIQUID-PHASE STERILIZATION 1229.7 GASEOUS STERILIZATION 1229.8 DRY HEAT STERILIZATION 1229.9 PHYSICOCHEMICAL INTEGRATORS AND I

54、NDICATORS FOR STERILIZATION 1229.10 RADIATION STERILIZATION 1229.11 VAPOR PHASE STERILIZATION 1229.12 NEW STERILIZATION METHODS 1229.13 STERILIZATION-IN-PLACE 1229.14 STERILIZATION CYCLE DEVELOPMENT 1229.15 STERILIZING FILTRATION OF GASES114USP 43 1229 典型滅菌曲線Typical Death Curve 典型的滅菌曲線106103Estimate

55、 Kill via Survivor存活曲線區(qū)100Curve methods in this region10-310-6Estimate Kill via FractionNegative methods region陰性分?jǐn)?shù)區(qū)10-9Estimate Killin this region估算殺滅區(qū)10-1210-151021 2427 30時(shí)間115USP 43 1229 過度殺滅法的應(yīng)用條件 過度殺滅只用于能長期經(jīng)受滅菌條件的物品，常用于金屬、玻璃和其它不受滅菌工藝影響的物品。如材料能經(jīng)受所采用的苛刻滅菌條件，過度殺滅則是首選的滅菌方法。 引申 過度殺滅法的F

56、0值計(jì)算，從100開始至保溫段結(jié)束 熱穩(wěn)定差的藥液產(chǎn)品，不適宜采用過度殺滅法 過度殺滅法的具體定義和可衡量標(biāo)準(zhǔn)參見PDA 1號技術(shù)報(bào)告116USP 43 1229 污染菌/生物指示劑控制法 當(dāng)材料與苛刻的工藝條件相沖突時(shí)，企業(yè)通常采用BB/BI method（污染菌/生物指示劑控制法） 產(chǎn)品降解與微生物被殺滅的動(dòng)力學(xué)可能不同，用Fo來評價(jià)“最差條件”的影響，可能是不充分的 引申 液體裝載通常采用污染菌/生物指示劑控制法 液體裝載的F0值計(jì)算，應(yīng)包括升降溫段117USP 43 1229 污染菌/生物指示劑典型殺滅曲線106 應(yīng)用本法要求- 對驗(yàn)證期間所采用生物指示劑與實(shí)際生產(chǎn)中所存在污染菌數(shù)量及

57、耐受性，有充分了解103100生物指示劑的殺滅曲線10-310-610-910-1210-1510-18- 可采用較低耐熱性的BI完全殺滅或較高耐熱性的BI不完全殺滅兩種方法，來證明滅菌工藝具備使產(chǎn)品污染菌殘存概率達(dá)到百萬分之一的能力。生物負(fù)荷殺滅曲線時(shí)間36912 15 18 21 24 27 30118USP 43 1229 液體裝載驗(yàn)證用生物指示劑 關(guān)注點(diǎn) 平衡兼顧滅菌效果與產(chǎn)品質(zhì)量 可選擇直接接種方式，也可選擇自含式生物指示劑 如使用自含式生物指示劑，需要確定其在自含系統(tǒng)中與在產(chǎn)品中的耐熱相關(guān)性119USP 43 1229 熱篩選程序 Heat-screening process 熱篩

58、選驗(yàn)證日常應(yīng)用 通常可通過熱篩選來確定生物負(fù)荷的耐熱性F0 = 8分鐘F0 = 8分鐘 將含單一種類孢子帶極少生長態(tài)菌的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基，在100 煮沸不同的時(shí)間，如能存活，此后可用它估算在121 下的D，以計(jì)算非無菌品概率生物指示劑D =0.5 生物負(fù)荷D =0.005121121生物指示劑數(shù)=106 生物負(fù)荷=100或102BI PNSU=10-10BB PNSU=10-1598表1. 非無菌單元計(jì)算示例BI的D121=0.5 在實(shí)際生產(chǎn)中幾乎不會(huì)出現(xiàn)煮沸時(shí)間大體相當(dāng)D121值1 min10 min20 min100 min0.01 min0.1 min0.2 min1.0 min表2. 由煮

59、沸試驗(yàn)Boil Test結(jié)果估算D121120歐洲藥典滅菌相關(guān)章節(jié) EP 9.2 METHODS OF PREPARATION OF STERILE PRODUCTS EP 9.2 BIOLOGICAL INDICATORS AND RELATED MICROBIALPREPARATIONS USED IN THE MANUFACTURE OF STERILE PRODUCTSs Draft APPLICATION OF THE CONCEPTS TO HEAT STERILISATIONPROCESSES121EP 9.2 驗(yàn)證工藝特定要求 生物指示劑的殺滅時(shí)間與存活時(shí)間 t = D （log N -2）s10 0 t = D （log N +4）k10 0 滅菌工藝生物指示劑驗(yàn)證中的時(shí)間確定原則 D （log N +1) t D （log N +3）10 0vl10 0 引申 t 對應(yīng)滅菌恒溫時(shí)間或F 值vl0 對于高效的過度殺滅工藝，驗(yàn)證時(shí)可考慮采用完全周期法或部分周期法122EMA Guideline on the sterilisation.歐盟指南: Guideline on t