1、藥業公司潔凈區房間沉降菌靜態測試方案1測試方法本測試方法利用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養基平皿，經若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數，以平板培養皿中的菌落數來評定潔凈環境內的活微生物數，并以此來評定潔凈區的潔凈度。2使用的儀器和設備高壓消毒鍋：使用時應嚴格按照操作規程進行。恒溫培養箱：必須定期對培養箱的溫度計進行檢定。3培養皿一般采用90mm15mm硼硅酸玻璃培養皿。使用前將培養皿置于121濕熱滅菌30min。4培養基：大豆酪蛋白瓊脂培養基（TSA）。將培養基加熱熔化，冷卻至約45在無菌操作條件下將培養基注入培養皿，每皿約15ml。待瓊脂培養基凝固后，將培

2、養基平皿放入3035恒溫培養箱中培養48小時，若培養基平皿上確無菌落生長，即可供采樣用，制備好的培養基平皿應在28的環境中存放。5測試步驟采樣方法：將已制備好的培養皿放置在預先確定取樣點，打開培養皿蓋，使培養基表面暴露0.5小時，再將培養皿蓋上蓋后倒置。培養全部采樣結束，將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。在3035培養，時間不少于2天。每批培養基應有對照試驗，可每區域選定3只培養皿作對照試驗，與采樣皿同時操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養皿一起放入培養箱內培養，結果應無菌落生長。菌落計數用肉眼直接計數，然后用510倍放大鏡檢查，是否有遺漏。若培養皿上有2個或2個以上菌落重疊，可分辨時仍以2個

3、或2個以上的菌落計數。注意事項測試用具要做滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。采取一切措施防止人為對樣本的污染。對培養基、培養條件及其他參數作詳細的記錄。由于細菌種類繁多，差別甚大，計數時一般用透射光于培養皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養皿邊緣生長的菌落，必要時用顯微鏡鑒別。采樣前應仔細檢查每個培養皿的質量，如發現變質、破損或污染的應剔除。6測試規則測試狀態靜態測試，室內測試人員不得多于2人。沉降菌測試前，被測試潔凈區的溫濕度須達到規定的要求，靜壓差必須控制在規定值內。沉降菌測試前，被測試潔凈區已經過消毒。測試時間測試宜在操作人員撤離現場并經過20min自凈后開始。7沉降菌計數采樣點數目最

4、少采樣點數目：沉降菌的最少采樣點數可按下表確定。在滿足最少測點數的同時，不宜滿足最少培養皿數，見下表。最少采樣點數目：面積（）潔凈度級別A 、B級C級D級102-32210-2042220-4082240-1001642100-20040103注：表中的面積，對于單向流潔凈室，指的是送風面積，對于非單向流潔凈室，指的是房間面積。采樣點的布置工作區測試點位置離地0.81.5m左右（略高于工作面）。 可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點，采樣點的布置應力求均勻，避免采樣點在某局部區域過于集中，某局部區域過于稀疏（如圖3）。8 記錄：測試報告中應記錄測試者的名稱和地址測試日期，測試依據，被測潔凈室的平面位置，有關測試儀器及其測試方法描述，測試結果。9結果計算單個沉降碟的暴露時間可以少于4 小時，同一位置可使用多個沉降碟連續進行監測并累積計數。 10 結果評定用平均菌落數判斷潔凈室的空氣中的微生物。潔凈區內的平均菌落數必須符合所選定的評定標準。若某潔凈區的菌落數超過評定標準，則必須對此區域先行消毒，然后重新測試兩次，測試結果必須合格。 測定結果見附件。附件 潔凈區沉降菌測試記錄 驗證記錄樣張