1、分析實驗室質量控制河南省疾控中心地方病所2019-12-16內容實驗室管理規范誤差實驗室內質量控制實驗室間質量控制數據處理一個好的實驗室應符合GB/T 27025-2019要求GB/T 27025-2019組織與管理人員設施和環境設備量值溯源樣品記錄報告外部支持和服務抱怨組織與管理GB/T27025-2019（ISO/ICE 17025:2019）兩大部分：管理要求和技術要求。適用于實驗室建立質量、管理和技術體系并控制其運作。實驗室或其所在的組織應是一個能夠承擔法律責任的實體。應有相應的完整的管理體系。人員有管理人員和技術人員;是非常重要的因素，實驗室技術能力相當大程度體現在人員素質上，特別強

2、調人的技能和經驗，它是直接影響報告質量的要素;技術人員要根據相應教育、培訓、經驗和可證明的技能進行資格確認，管理層對技術人員應制訂教育、培訓、技能目標。設施和環境屬于資源保證過程;具備必要的設施和環境條件進行有效的監控是保證檢測工作正常開展的先決條件;環境條件要能適應三方面的要求： 標準/規程的要求 特殊精密儀器設備的需要 人員本身的需要設備任何檢測都要通過設備來實現，實驗室應配備正確進行檢測的全部設備；設備應有標識、記錄、日常維護和控制，有操作指導書，要有校準和檢定。量值溯源溯源的目的就是強調全國和世界范圍內量值的統一，都能溯源到國家或國際計量基準，即SI單位的復現值，它是全球一體化和互認的

3、基礎。溯源性：通過一條具有規定不確定度的不間斷的比較鏈，使測量結果或標準的值能夠與規定的參考標準（通常是國家或國際標準）聯系起來的一種特性。量值溯源是保證測量結果準確可靠的關鍵環節。樣品通過抽樣來獲得樣品。抽樣是取出物質、材料或產品的一部分作為其整體的代表性樣品進行檢測的一種規定程序。抽樣方法有多種方法，通常采用的統計抽樣法是建立在概率統計理論基礎上的。抽樣記錄應做到清晰、明確、具體。記錄是所取得的結果或提供完成活動的證據性文件。分質量記錄和技術記錄兩大類。記錄的作用：（1）是質量要求滿足程度或質量體系運行有 效性的客觀證據（2）是檢測能力的客觀證據（3）是質量體系文件執行結果的客觀證據（4）

4、是可追溯性的依據（5）是采取糾正措施和預防措施的依據要求：及時、完整、規范報告檢測報告是實驗室最終成果的體現，相當于企業的產品。能否出具高質量的報告，是實驗室能否適應檢測市場需求的核心問題。報告的質量不僅僅與原始記錄、數據整理、報告編制、復核與批準有關，更應擴展到檢測的全過程， GB/T27025-2019規定的所有要素都是為保證報告質量服務的。外部支持和服務實驗室所尋求的服務與供應品的采購應實施控制，以保證其符合GB/T27025-2019 的要求，符合供應品、試劑和消耗材料的相關要求才能投入使用。抱怨客戶滿意程度很低時就會發出抱怨，甚至申訴；客戶有抱怨，說明我們的質量體系中某個環節出了問題

5、，對于抱怨（申訴）一定要嚴肅認真，查清事實，及時處理。若因質量原因給客戶造成經濟損失，實驗室應承擔民事和法律責任。 典型的檢測流程圖和相關質量要素及要求 樣品接收、入庫 樣品管理 樣品驗收、出入庫登記、唯一性識別系統、待檢和已 檢樣品的分別保管、樣品制備、 樣品的安全及存放。 編制檢測計劃 計劃管理 委托通知單 通 項目 外協 量值溯源 量值溯源到國家基準，儀器設備按計劃送檢，儀器設 知 分包 供應 備標貼計量狀態標記 客 數據 數據處理方式、數據記錄格式、原始記錄的更改校核。 戶 領出樣品 儀器設備 準確度和規格符合標準要求、設備使用前必須校準、 進行檢測 良好的維護和管理 人員素質 持證上

6、崗、定期培訓。 環境條件 環境條件符合標準要求、環境監控、進入檢測區受控 檢測方法 規程、標準和各類作業指導書 不合格 合格 各級復核 報告管理 報告的信息、內容、格式應符合準則要求、報告應受控 頒發報告 存入檔案 檔案管理 檔案存放及保密，檔案借閱 質量控制的目的，是把分析測試的誤差控制在容許范圍內，保證分析結果有一定的精密度和準確度，使分析數據在給定的置信水平內，有把握達到要求的質量。 質量控制的目的是控制誤差，那 么誤差究竟從那里來？從鹽中碘酸鉀的直接滴定分析看誤差的來源 分析過程 誤差的來源 不確定度的估計 基準碘酸鉀 碘酸鉀純度 0.017% 碘酸鉀稱量 0.088mg 碘酸鉀溶液配

7、制 0.333ml 碘酸鉀的摩爾質量 0.00054g/mol 標定硫代硫酸鈉消耗體積 0.022ml 硫代硫酸鈉 被標定的硫代硫酸鈉體積 0.036ml 滴定鹽中碘酸鉀消耗硫代硫酸鈉體積 0.022ml 鹽中碘酸鉀 被測鹽的稱量 0.0153g 結果統計 有效數字 正確使用有效數字 數據修約 正確進行數字修約 分析人員 技能 提高實驗技能 責任心 杜絕過失誤差 對顏色、界面等的識別能力 方法 方法本身的誤差測量和誤差的關系測量的準確是相對的，絕對的準確是不存在的。誤差是可以控制的，受控的誤差是允許的。好的檢驗員應該對自己在實驗室的每一個操作做到心中有數。管理出質量，控制出質量。什么是誤差？真

8、值：在某一位置和狀態下，某量的效應體現出的客觀值和實際值 稱為真值 。真值是未知的，因此誤差也是未知的；真值是相對可知的，因此誤差也是相對可知的；所以真值也稱理論真值、約定真值、相對真值。誤差：反映測試值偏離真值的大小，分為： 絕對誤差=測試值-真值 相對誤差=絕對誤差/真值 誤差=測試值-真值誤差的來源 誤差常常不是獨立的，而是聯合作用的標準誤差：測試總是相對進行的，基準物、參考物質、 標準器等， 它們本身體現出來的量值就有誤差，存在不確定度。裝置誤差：儀器的轉換系統、傳輸系統、指示系統對測量和被測量單位的影響；制造儀器的誤差；儀器調試不良的誤差。環境誤差：工作環境、儀器的使用條件等引起測量

9、的誤差。人員誤差：測試人員感覺器官的差異、敏感性和固有習慣等產生的誤差。方法誤差：方法本身不夠完善引起的誤差。誤差的分類和特點 系統誤差、隨機誤差、過失誤差系統誤差由確定原因引起；具有傾向性；重復出現，有一定規律不對稱性不服從正態分布增加測量次數不能抵償隨機誤差由偶然因素引起無傾向性不固定對稱性測定次數足夠符合正態分布抵償性：誤差的算術均值隨測量次數的無限增加而趨于零。消除過失誤差后誤差的相互關系 誤差 系統誤差 隨機誤差 （真值） X（平均值） X1（測量值） 絕對準確度 偏差 單個測量準確度系統誤差影響分析的準確度，隨機誤差影響分析的精密度，從而影響分析的準確度精密度高準確度不一定高；精密

10、度差準確度不可能高；消除系統誤差情況下，精密度高，準確度也高。 * + + +*實驗室質量控制 實驗室內質控自我控制發現隨機誤差和新出現的系統誤差評價分析質量的穩定性是分析的基礎、必需、常規 實驗室間質控外部控制發現系統誤差和實驗室間數據的可比性評價實驗室的測試系統和實驗室的分析能力有效的校核是參加與標準實驗室間的比對實驗室內部質量控制 靈敏度 定義 一個方法的靈敏度是指該方法對單位濃度或單位量的待測物質的變化所引起的響應量變化的程度。它可以用儀器的響應量或其他指示量與對應的待測物質的濃度或量之比來描述。在實際工作中常以標準曲線的斜率度量靈敏度。一個方法的靈敏度可因實驗條件的變化而改變，在一定

11、的實驗條件下，靈敏度具有相對的穩定性。實驗室內部質量控制靈敏度意義：痕量分析中檢測的樣品含量幾乎與零管在同一數量級；反映分析實驗室和測試系統的本底和基礎；反映實驗室及其分析人員的水平。實驗室內部質量控制靈敏度方法1：做一條標準曲線和6個空白管；計算6個空白管光密度的均值和標準差；用均值加上2倍標準差(尿碘為減去）得出一個值；在標準曲線上算出這個值相應的碘的濃度，即方法的靈敏度；重復以上檢測3次，算出平均靈敏度。結果判斷：平均靈敏度應等于或略小于方法規定的檢測限，否則表明空白試驗不合格，需要查找原因加以改進。靈敏度此3表為尿碘過硫酸銨法按方法檢測結果。3次檢測靈敏度分別為2.1、3.7、5.3，

12、平均靈敏度為3.7 g/L。實驗室內部質量控制靈敏度方法2 做一條標準曲線和20個空白管。計算20個空白管光密度的均值和標準差，以均值減去3倍標準差的值代入回歸方程，得到的碘的濃度即為靈敏度。結果判斷：靈敏度應等于或略小于方法規定的檢測限，否則表明空白試驗不合格，需要查找原因加以改進。靈敏度此表為尿碘過硫酸銨法按方法2檢測結果。平均靈敏度為3.0 g/L。實驗室內部質量控制精密度1、批間精密度做10次獨立檢測，每次做平行測試，共2-3個濃度計算每個濃度10次共20個結果的均值、標準差和變異系數2、批內精密度一次檢測2-3個濃度的樣品，每個濃度做15個平行樣計算每個濃度的均值、標準差和變異系數精

13、密度-批間精密度是指在一定條件下進行多次測定時，所得測定結果之間的符合程度，通常表示測量結果中隨機誤差的大小。批間精密度的方法：選取2個不同濃度尿樣，獨立檢測10次，每次做平行檢測。計算每次的均值，10次測量的均值、標準差及變異系數。結果判斷：變異系數應小于10%。例1 低濃度尿樣批間精密度測試精密度-批間精密度是指在一定條件下進行多次測定時，所得測定結果之間的符合程度，通常表示測量結果中隨機誤差的大小。批間精密度的方法：選取2個不同濃度尿樣，獨立檢測10次，每次做平行檢測。計算每次的均值，10次測量的均值、標準差及變異系數。結果判斷：變異系數應小于10%。例1 低濃度尿樣批間精密度測試精密度

14、-批內精密度是指在一定條件下進行多次測定時，所得測定結果之間的符合程度，通常表示測量結果中隨機誤差的大小。批內精密度的方法：選取兩個不同濃度尿樣，每份尿樣做15個平行檢測。計算均值、標準差及變異系數。結果判斷：變異系數應小于5%。例1 低濃度尿樣批內精密度測試例2 高濃度尿樣批內精密度測試實驗室內部質量控制加標回收率意義：反映結果的準確度。判斷： 1、繪制回收率質控圖，將結果標在其上判斷； 2、結果不得超過檢測方法規定的回收率范圍； 3、方法未做規定的，以95%-105%為目標值計算出95%的可信區間，作為正常允許范圍。加標回收率方法-選取20-100g/L尿樣，標液濃度為400 g/L。按右

15、表進行加標：回收率的計算（IA-IB）X100/ICIA：實測碘濃度IB：1、2管平均碘濃度IC：加標后碘濃度3-8管的平均回收率選另一濃度尿樣重復以上實驗，計算兩次實驗的平均回收率。實驗室內部質量控制加標回收率-舉例兩個濃度平均回收率為96.28%。回收率的局限性： 1、樣品中某些干擾因素對檢測結果具有恒定的偏差； 2、分析過程中對樣品和加標樣品的操作完全相同，以致操作、損失、環境污染等對二者產生相同的作用，使誤差相互抵消，使分析中的一些問題難以發現； 3、樣品中待測物在價態、形態上的差別、加標量的多少、樣品中原濃度的大小等，均影響回收結果。實驗室內部質量控制標準曲線的繪制、檢驗和回歸意義：

16、1、反映方法的精密度和靈敏度； 2、分析儀器的精密度； 3、量取標準溶液量具的準確度； 4、分析人員的操作水平。評價標準曲線：1、相關系數 r 的絕對值 大于或等于0.999；2、0管和300管的光密度差值應達到0.83、任取標準曲線的2點代入方程，其理論值和擬合值的相對偏 差不超 過5%；注意：1、線性不好情況下，用數理統計的方法擬合回歸方程，會引入無法消除的系統誤差；2、回歸方程僅限于估算檢測范圍內的變量，而不能隨意外推； 標準曲線檢驗標準曲線評價：此條標準曲線相關系數大于0.999任取兩點代入方程，其擬合值與理論值的相對偏差均不超過5%零管光密度與300管光密度之差為1.391，大于0.

17、8實驗室內部質量控制平行雙樣測定意義 1、減少隨機誤差； 2、對同批測定的精密度進行估計。結果判斷： 1、在常規批量分析中，應隨機抽取樣品總量的 10-20%做平行測定； 2、分光光度法痕量檢測，平行雙樣相對偏差不大 于10%，最好是5%； 3、同批檢測或一段時間累計檢測平行雙樣合格率 大于95%；標準物質的對照分析意義：1、標準物質作為一個相對真值，其量值傳遞為不同時間、 地點的測試結果提供了可靠的參照；2、分析人員對分析質量進行判斷（特別是準確度），查 找系統誤差，尋求改進；3、供實驗室人員“練兵”之用，提高技術素質。注意：在實驗室分析系統有良好的精密度的基礎上使用 標準物質，才能獲得預期

18、的效果。實驗室內部質量控制使用標準物質是發現系統誤差的有效方法方法-檢測樣品時每隔25-30放入一組標準物質，與樣品同時檢測；每批樣品應至少檢測兩個濃度標準物質。可用標準物質檢測結果做標準物質質控圖，其標準值作為均值，均值不確定度作為上下控制限。使用標準物質是發現系統誤差的有效方法使用標準物質發現隨機誤差改進質量實驗室內部質量控制內質控圖制備內質控樣品 (1)直接用標準物質 (2)實驗室自己制備內質控樣品收集尿樣初測低中高混勻分裝-20C儲存均勻性檢驗 (1) 隨機從全部制備的內質控樣品中抽取約5%的樣品 (2) 按程序檢測這些樣品 (3) 結果的變異系數應小于10%，最好為5%以內（標準物質

19、）定值 (1) 每天檢測一次（單次或平行），共檢測20天 (2) 計算 均值和 2SD , 3SD (3) 繪制質控圖 如何使用質控樣品 (1)批質控樣品 (2)由監督人員使用的盲樣 （3）將質控樣品檢測結果標在質控圖中標準曲線QC樣品QC樣品QC 內質控圖內質控樣定值：每天檢測一次，共檢測20天，計算均值和標準差，得到繪制質控圖所需的均值2SD，均值3SD右表為20天檢測原始結果及均值、標準差。內質控圖左表為又檢測了10次的原始結果。右圖為內質控圖。質控圖縱坐標是以20天測量結果的均值、均值SD、均值2SD、均值3SD繪制；橫坐標為檢測日期。計算全部30天檢測結果的均值和標準差，作為再繪制質

20、控圖的標準。實驗室內部質量控制實驗室內部比對實驗室內部比對包括不同測試人員間比對、儀器間和不同方法的比對。人員比對：當測試人員變動或新參加工作的人員上崗前培訓時，應控制其他實驗條件，讓參加比對的兩名檢驗員分別按照統一的操作規程，完成全程序檢測，兩人檢測結果相對誤差不大于5%。儀器比對：當采用測試新儀器或想了解某儀器的測試性能時，讓同一個有經驗的檢驗員分別用不同儀器按照統一的操作規程完成檢測，檢測結果的相對誤差不大于5%。方法比對：當評價新方法時，選擇有經驗的檢驗人員分別用兩種方法對同一樣品和標準物質進行測試，結果作為評價新方法的依據。 實驗室間質量控制實驗室間比對及能力驗證試驗實驗室間比對定義

21、：按照預先規定的條件，由兩個實驗室或多個實驗室對相同或類似檢測物品進行檢測的組織、實施和評價。目的： 確定某個實驗室對特定試驗或測量的能力，檢測監控實驗室的持續能力； 識別可能與實驗室相關的問題如人員的檢測力和儀器校準；實驗室間質量控制 確定新方法的有效性和可比性，監控老方法的有效性和可比性； 向客戶提供更高的可信度； 鑒別實驗室間的差異； 確定一種方法的能力特性，通常稱為共同試驗； 給標準物質賦值，并評價其有效性。實驗室間質量控制能力驗證 能力驗證一般用于： 獲得能力驗證滿意結果的個體實驗室對其采用合適的質量控制措施是一種鼓勵；獲得能力驗證不滿意結果的實驗室，則通過反饋促使其采取糾正措施。 為特殊任務選擇實驗室提供合理的依據。實