1、食品微生物檢驗方法中國檢驗檢疫科學(xué)研討院北京陸橋技術(shù)有限有限責(zé)任公司何艷玲內(nèi)容提要菌落總數(shù)檢測大腸菌群及大腸桿菌檢測金黃色葡萄球菌檢測沙門氏菌檢測單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測菌落總數(shù)測定菌落總數(shù)的概念菌落總數(shù)是指在被檢樣品的單位分量g、容積ml或外表積cm2內(nèi)，所含能于某種固體培育基上，在一定條件下培育后所生成的菌落的總數(shù)。 菌落總數(shù)測定衛(wèi)生學(xué)意義斷定食品被細(xì)菌污染的程度及衛(wèi)生質(zhì)量。及時反映食品加工過程能否符合 衛(wèi)生要求，為被檢食品衛(wèi)生學(xué)評 價提供根據(jù)。通常以為，食品中細(xì)菌數(shù)量越多， 那么可思索致病菌污染的能夠性越 大，菌落總數(shù)的多少在一定程度 上標(biāo)志著食品衛(wèi)生質(zhì)量的優(yōu)劣。 FDA BAM 菌落

2、總數(shù)測定流程 檢樣xg/mL+9xml稀釋液磷酸鹽緩沖液 適當(dāng)十倍稀釋樣品選擇23個延續(xù)適宜稀釋度各取1mL分別參與滅菌平皿內(nèi)每個稀釋度做兩個平行 每皿內(nèi)參與適量平板計數(shù)瓊脂PCA 35 ，48 2h菌落計數(shù) FDA BAM 菌落計數(shù)方法選擇25250CFU之間的菌落進(jìn)展計數(shù)，計算公式如下： N=C/1*n1+0.1*n2*d一切平板的菌落數(shù)都缺乏25CFU，報告EAPC/mlg為25*1/d。 EAPC：estimated aerobic plate count一切平板的菌落數(shù)都超越250CFU，但缺乏100/cm2 ，報告EAPC/mlg為最接近250CFU的平板菌落數(shù)的估計值，乘以相應(yīng)的

3、稀釋度。一切平板的菌落數(shù)都超越100/cm2 ，計算平板的面積直徑為90mm的平板面積為65cm2，估計最高稀釋度每cm2的菌落數(shù)，乘以相應(yīng)平板面積作為該稀釋度的菌落計數(shù)結(jié)果，報告EAPC/mlg為65*100* 1/d。無法計數(shù)的平板報告LALaboratory Accident。最終結(jié)果保管前兩位有效數(shù)字。按照4舍6入，5是奇進(jìn)偶不進(jìn)。 ISO4833-2003 菌落總數(shù)測定流程 檢樣xg/mL+9xml稀釋液磷酸鹽緩沖液 適當(dāng)十倍稀釋樣品選擇23個延續(xù)適宜稀釋度各取1mL分別參與滅菌平皿內(nèi)每個稀釋度做兩個平行 每皿內(nèi)參與適量1215mL平板計數(shù)瓊脂PCA， 301 ，72 3 h菌落計數(shù)

4、 假設(shè)疑心樣品中含有在培育基外表蔓延生長的菌落，待瓊脂凝固后，在其上覆蓋一層4mL水瓊脂。平板疊放不超越6個ISO4833-2003菌落計數(shù)方法選擇延續(xù)2個稀釋度不超越300CFU的平板，且一個平板至少含15CFU進(jìn)展計數(shù)，計算公式如下： N=C/n1+0.1*n2*d一切平板的菌落數(shù)都缺乏15CFU，計算2平板菌落的算術(shù)平均值m，液體樣品：NE=m 固體樣品： NE=md-1無菌生長：液體樣品：less than 1; 固體樣品：less than 1 d-1最終結(jié)果保管前兩位有效數(shù)字。菌落總數(shù)測定幾點闡明由于檢樣中采用30/35有氧條件下培育，因此并不是樣品中實踐的總活菌數(shù)，一些特殊營養(yǎng)要

5、求的細(xì)菌、厭氧菌、微需氧菌、以及非嗜中溫細(xì)菌，均難以反映出來。鑒于食品檢樣中的細(xì)菌細(xì)胞是以單個、成雙、鏈狀、葡萄狀或成堆的方式存在，因此在平板上出現(xiàn)的菌落可以來源于細(xì)胞塊，也可以來源于單個細(xì)胞，因此平板上所得菌落的數(shù)字不應(yīng)報告活菌數(shù)，而應(yīng)以單位分量、容積或外表積內(nèi)的菌落數(shù)或菌落構(gòu)成單位colony forming units，CFU報告。菌落總數(shù)測定幾點要求每個樣品從開場稀釋到傾注最后一個平皿所用的時間不得超越15min，主要為防止細(xì)菌增殖和產(chǎn)生片狀菌落。樣液與瓊脂應(yīng)充分混合，防止將混合物濺到平皿壁和皿蓋上。皿內(nèi)瓊脂凝固后，不要長時間放置，然后倒置培育，可防止菌落蔓延生長。檢樣過程中運用稀釋劑

6、做空白對照，用以斷定稀釋液、培育基、平皿或吸管能夠存在的污染。同時，檢樣過程中應(yīng)在任務(wù)臺上翻開一塊空白平板計數(shù)瓊脂，其暴露時間應(yīng)與檢樣時間相當(dāng)，以了解檢樣在檢驗操作過程中有無遭到來自空氣的污染。檢樣稀釋液有時帶有食品顆粒，為防止與細(xì)菌菌落發(fā)生混淆，可作一檢樣稀釋液與平板計數(shù)瓊脂混合的平皿，不經(jīng)培育，于4 放置，以便在計數(shù)檢樣時用作對照。大腸菌群的定義大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。大腸菌群不是細(xì)菌學(xué)上的分類命名，而是根據(jù)衛(wèi)生學(xué)方面的要求，提出的與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，即作為食品、水體等能否受過人畜糞便污染的指示菌，這些細(xì)菌在生化及血清學(xué)方面并非完全一致

7、。根據(jù)進(jìn)一步的生化實驗，可將這群細(xì)菌再分為大腸艾希氏菌俗稱大腸桿菌、弗氏檸檬酸桿菌、肺炎克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌等。 大腸桿菌的定義大腸桿菌也稱大腸埃希氏菌，分類于腸桿菌科，歸屬于埃希氏菌屬。大腸桿菌指革蘭氏陰性無芽孢桿菌、乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣、IMViC實驗靛基質(zhì)、MR、V-P、檸檬酸鹽實驗為+-或-+-的細(xì)菌。與人類有關(guān)的大腸桿菌統(tǒng)稱為致瀉性大腸桿菌，包括五種：腸毒素性大腸桿菌ETEC、致病性大腸桿菌EPEC、出血性大腸桿菌EHEC、侵襲性大腸桿菌EIEC、黏附性大腸桿菌EAEC。大腸菌群和大腸桿菌的關(guān)系耐熱大腸菌群的定義：能在液體乳糖培育基中35/37 培育48h產(chǎn)酸產(chǎn)氣，并在44.5培育24

8、h產(chǎn)酸產(chǎn)氣的細(xì)菌根據(jù)ISO規(guī)范衛(wèi)生學(xué)意義大腸菌群和大腸桿菌是評價衛(wèi)生質(zhì)量的重要目的，作為食品中的糞便污染目的。食品中檢出大腸菌群，闡明該食品有糞便污染，既能夠有腸道致病菌存在，因此也就有能夠經(jīng)過污染的食品引起腸道傳染病的流行。大腸菌群數(shù)的高低，闡明了糞便污染的程度，也反映了對人體安康危害性的大小。大腸桿菌在外界存活時間與一些主要腸道致病菌接近，它的出現(xiàn)預(yù)示著某些腸道病原菌的存在，因此該菌是國際上公認(rèn)的衛(wèi)生監(jiān)測指示菌。近年來，有些國家在執(zhí)行HACCP管理中，將大腸桿菌檢測作為微生物污染情況的監(jiān)測目的和HACCP實施效果的評價目的。大腸桿菌的生物學(xué)特性根本形狀： 此菌為兩端鈍圓的短小桿菌，普通約0

9、.5-0.8m*1.0-3.0 m，多單獨存在或成雙，但不呈長鏈陳列。約50%的菌株有周生鞭毛，但多數(shù)只需1-4根，普通不超越10根，故菌體動力弱。多數(shù)菌株有菌毛，有的有莢膜或微莢膜，不構(gòu)成芽孢，對普通堿性染料著色良好，革蘭氏染色陰性。大腸桿菌的生物學(xué)特性培育特性：大腸桿菌合成代謝才干強，在含無機鹽、銨鹽、葡萄糖的普通培育基上生長良好。最適生長溫度為37，在42-44 條件下仍能生長，生長溫度范圍15-46 。 在普通營養(yǎng)瓊脂上有3中菌落形狀： 1光滑型：菌落邊緣整齊，外表有光澤、潮濕、 光滑、呈灰色，在生理鹽水中易分散； 2粗糙型：菌落扁平、干澀、邊緣不整齊，易 在生理鹽水中自凝； 3黏液型

10、：常為含有莢膜的菌株。大腸菌群及大腸桿菌測定 MPN法檢驗流程FDA BAM 檢樣50g+450ml稀釋液 適當(dāng)十倍稀釋樣品選擇3個適宜的延續(xù)稀釋度的樣品稀釋液，每個稀釋度接種三管LST肉湯每管9mlLST肉湯并加有導(dǎo)管，每管接種1mL 35 ，24 2h 48 2h 沒有產(chǎn)氣管 有產(chǎn)氣管 報告陰性 接種BGLB肉湯管 接種EC肉湯 35 ，48 2h 44.50.5 水浴培育 24 2h 48 2h 查MPN表報告結(jié)果 產(chǎn)氣管接種EMB平板35、1824h 大腸菌群 從EMB平板上挑取5個可疑菌轉(zhuǎn)接到PCA斜 面，進(jìn)展革蘭氏染色、IMVC生化鑒定、接 種LST復(fù)檢產(chǎn)氣 查MPN表報告結(jié)果大腸

11、桿菌 大腸菌群測定MPN法檢驗幾點闡明MPN檢索表： MPN 為最大能夠數(shù)(Most Probable Number)的簡稱。這種方法，對樣品進(jìn)展延續(xù)系列稀釋，參與培育基進(jìn)展培育，從規(guī)定的反響呈陽性管數(shù)的出現(xiàn)率，用概率論來推算樣品中菌數(shù)最近似的數(shù)值。MPN檢索表只給了三個稀釋度，如改用不同的稀釋度，那么表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)降低或添加10倍。初發(fā)酵和證明實驗： 1兩步法進(jìn)展了兩次乳糖發(fā)酵實驗。初發(fā)酵和證明實驗所用培育基不同，但都是為了證明培育物能否符合大腸菌群的定義，即“在37分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。 LST中提供了磷酸鹽緩沖體系，氯化鈉可維持浸透壓，月桂基硫酸鈉可抑制非大腸菌群的生長，這個緩沖蛋白胨乳糖肉

12、湯允許“緩慢乳糖發(fā)酵Slow lactose fermentations來促進(jìn)菌體產(chǎn)氣。BGLB中膽鹽和煌綠可以抑制革蘭氏陽性細(xì)菌和除了大腸菌群的很多革蘭氏陰性細(xì)菌。 2初發(fā)酵陽性管，不能一定就是大腸菌群細(xì)菌，經(jīng)過證明實驗后，有時能夠成為陰性。有數(shù)聽闡明，食品中大腸菌群檢驗步驟的符合率，初發(fā)酵與證明實驗相差較大。因此，在實踐檢測任務(wù)中，證明實驗是必需的。產(chǎn)氣量與倒管： 在乳糖發(fā)酵實驗任務(wù)中，經(jīng)?？梢钥吹皆诎l(fā)酵倒管內(nèi)極微少的氣泡有時比小米粒還小，有時可以遇到在初發(fā)酵時產(chǎn)酸或沿管壁有漸漸上浮的小氣泡。實驗闡明，大腸菌群的產(chǎn)氣量，多者可以使發(fā)酵倒管全部充溢氣體，少者可以產(chǎn)生比小米粒還小的氣泡。假設(shè)對

13、產(chǎn)酸但未產(chǎn)氣的乳糖發(fā)酵如有疑問時，可以用手悄然打動試管，如有氣泡沿管壁上浮，即應(yīng)思索能夠有氣體產(chǎn)生，而應(yīng)作進(jìn)一步實驗。 不適于用大腸菌群作為糞便污染指示菌的食品冷凍食品經(jīng)射線照射處置的食品 pH較高的食品 在上述食品中大腸菌群的細(xì)菌比許多腸道病原微生物更易死亡。大腸桿菌測定EMB選擇性分別鑒別EMB平板典型大腸桿菌菌落特征：中心黑色或紫紅色，有或無綠色金屬光澤大腸桿菌測定EMB選擇性分別鑒別EMB是一種弱選擇性培育基，一些球菌也可在該培育基上生長；高壓滅菌可使得美藍(lán)復(fù)原從而使培育基的顏色呈不均一橘黃色，悄然搖動培育基可以恢復(fù)原有的正常紫色，傾注平板前應(yīng)先搖勻；大腸桿菌在該培育基上并不一定總是呈

14、現(xiàn)綠色的金屬光澤；該培育基受可見光易使其中的成分氧化，儲存及培育細(xì)菌時都應(yīng)在避光條件。菌名菌落形態(tài)大腸埃希氏菌 紫黑色，有綠色金屬光澤肺炎克雷伯氏菌粉色，中心色深陰溝腸桿菌粉色，中心色深弗氏志賀氏菌無色鼠傷寒沙門氏菌 無色糞鏈球菌無色大腸桿菌測定革蘭氏染色根本原理： 革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛運用的一種重要的鑒別染色法。1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)建。此法可將細(xì)菌分為革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌兩大類。 革蘭氏染色的機理主要是利用兩類細(xì)菌的細(xì)胞壁成分和構(gòu)造的不同。革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁中含有較多的類脂質(zhì)，而肽聚糖的含量較少。當(dāng)用酒精或丙酮酸脫色時，類脂質(zhì)被溶解，添加了細(xì)胞壁的通透性，使初染后的結(jié)

15、晶紫和碘的復(fù)合物易于滲出，結(jié)果細(xì)胞被脫色，經(jīng)復(fù)染后，又染上復(fù)染液的顏色。而革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁中肽聚糖的含量多而且交聯(lián)度大，類脂質(zhì)含量少，經(jīng)乙醇或丙酮洗脫后，肽聚糖層的孔徑變小，通透性降低，因此細(xì)胞仍保管初染時的顏色。大腸桿菌測定革蘭氏染色Gram negativeGram positiveGram straining大腸桿菌測定革蘭氏染色根本步驟：將涂片在火焰上固定，滴加結(jié)晶紫染液，染1min，水洗；滴加革蘭氏碘液，作用1min，水洗；滴加95%乙醇脫色約1530s,直至染色液被洗掉，不要過分脫色，水洗；滴加番紅復(fù)染液，復(fù)染1min，水洗、待干、鏡檢。結(jié)果：革蘭氏陽性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅

16、色。大腸桿菌測定生化鑒定Testpositivenegativebiotype1biotype2reagentIndole紅色環(huán)不變色+-KovacsMR紅色不變色+甲基紅V-P玫瑰紅色環(huán)不變色-V-P甲、乙液Citrate生長不生長-I M Vi C生化實驗金黃色葡萄球菌生物學(xué)特性金黃色葡萄球菌呈球形，直徑0.8m左右，陳列成葡萄串狀 ，無芽孢，無莢膜。革蘭氏染色陽性，但衰老、死亡或被白細(xì)胞吞噬的菌體，常呈革蘭氏陰性。金黃色葡萄球菌生長特性金黃色葡萄球菌在肉湯中呈渾濁生長，在胰酪胨大豆肉湯內(nèi)有時液體廓清，菌量多時呈渾濁生長。血平板上金黃色葡萄球菌呈金黃色，有時也為白色，大而突起、圓形、不透明

17、、外表光滑，周圍有溶血圈。Baird-Parker平板上金黃色葡萄球菌圓形突起、光滑、潮濕，顏色呈灰色到黑色，邊緣淡色，周圍為一渾濁帶，在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的硬度。金黃色葡萄球菌檢驗方法適用性MPN法：適用于檢測帶有大量競爭菌的食品及其原料和未經(jīng)處置的含少量金黃色葡萄球菌的食品。直接平板計數(shù)法：適用于檢查金黃色葡萄球菌數(shù)不小于10/gml的食品。增菌培育法：適用于檢查含有受損傷的金黃色葡萄球菌的加工食品。定量方法定性方法金黃色葡萄球菌檢驗直接平板計數(shù)法 檢樣50g+450mL稀釋液 適當(dāng)十倍稀釋樣品 選擇23個延續(xù)適宜稀釋度 汲取1ml菌液按照0.3mL、0.3mL

18、、0.4mL分別涂布于 3塊90mmBaird-Parker平板上做平行實驗 35 ，4548 h 確證實驗 報告或涂布于1塊140mm平板上FDA BAM 金黃色葡萄球菌檢驗MPN法 檢樣50g+450mL稀釋液 適當(dāng)十倍稀釋樣品 選擇3個適宜的延續(xù)稀釋度的樣品稀釋液，每個稀釋度接種三管10% NaCl TSB肉湯，每管接種1mL 35 ，48 2 h 從生長的管中接種1環(huán)劃線于 Baird-Parker平板上 35 ，48 h 確證實驗 報告含1%丙酮酸鈉FDA BAM 金黃色葡萄球菌確證實驗1.凝固酶實驗方法：從平板上至少挑取1個可疑金黃色葡萄球菌菌落，移種到TSB/BHI肉湯中，置35

19、培育18-24h。取肉湯培育物0.3mL同0.5mL凝固酶實驗兔血漿充分混合，置35培育，定時察看能否有凝塊構(gòu)成，至少察看6h。 實驗中需同時做知陽性和陰性對照。結(jié)果斷定：以內(nèi)容物完全凝固，使試管倒置或傾斜時不流動為陽性。部分凝固2+和3+的必需進(jìn)展生化鑒定加以證明。FDA BAM金黃色葡萄球菌確證實驗2.革蘭氏染色對一切的可疑培育物都要進(jìn)展革蘭氏染色。3.生化鑒定過氧化氫酶實驗葡萄糖厭氧利用實驗甘露醇厭氧利用實驗金葡溶菌酶敏感性實驗?zāi)蜔岷怂崦笇嶒炤o助Staphylococcus aureus on DNase AgarFDA BAM 2種葡萄球菌和微球菌的典型特性特性S. aureusS.e

20、pidermidisMicrococci過氧化氫酶+凝固酶+-耐熱核酸酶+-溶菌酶+-厭氧利用葡萄糖+-甘露醇+-ISO 金黃色葡萄球菌檢驗MPN法 檢樣xg+9xmL稀釋液 適當(dāng)十倍稀釋樣品 選擇3個適宜的延續(xù)稀釋度的樣品稀釋液，每個稀釋度接種三管modified Giolitti and Cantoni broth， 37 ，2448 h 從變黑或出現(xiàn)黑色沉淀的管中 接種1環(huán)培育物于 Baird-Parker平板上 37 ，48 h 確證實驗 報告接種10mL 于10mL雙料肉湯，接種1mL 于9mL單料肉湯。小心的于接種管中培育基頂部傾注一定量的水瓊脂，使其凝固構(gòu)成密封塞。ISO 金黃色

21、葡萄球菌確證實驗?zāi)堂笇嶒灲Y(jié)果斷定： - 1+ 2+ 3+ 4+ negative positive沙門氏菌屬簡介1880年E. Berth首先發(fā)現(xiàn)傷寒沙門氏菌，1885年Salmon與Smith又分別出豬霍亂沙門氏菌，以后取Salmon氏之名為本菌屬之名。沙門氏菌屬是一群符合腸桿菌科定義并與其血清學(xué)相關(guān)的革蘭氏陰性、需氧性、無芽孢桿菌。本菌屬種類繁多，抗原構(gòu)造復(fù)雜，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)2000多個血清型，我國已發(fā)現(xiàn)血清型近200個。 沙門氏菌屬生物學(xué)特性形狀特征： 革蘭氏陰性，大小為130.40.9m的兩端鈍圓的短桿菌，無芽孢，普通無莢膜，除雞沙門氏菌和雛沙門氏菌以外，都有周身鞭毛，運動力強。培育特性：

22、沙門氏菌需氧或兼性厭氧，10-42 都可生長，最適生長溫度為37，最適pH為6.87.8。營養(yǎng)瓊脂平板上：3537培育1824h，其菌落大小普通為23mm，光滑、潮濕、無色、半透明、邊緣整齊。血平板上：中等大小的灰白色菌落。生化特性：絕大多數(shù)沙門氏菌有規(guī)律的發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，但也有不產(chǎn)氣者，不發(fā)酵蔗糖和側(cè)金盞花醇、不產(chǎn)生吲哚、不分解尿素。沙門氏菌屬生物學(xué)特性沙門氏菌屬的抗原菌體抗原O抗原外表抗原K抗原：Vi抗原和M抗原鞭毛抗原H抗原纖毛抗原FDA BAM沙門氏菌檢驗流程前增菌 25g樣+225mL乳糖肉湯 肉制品、肉副產(chǎn)品、動物產(chǎn)品 勻質(zhì)2min，室溫放置60 5min 混合均勻，測定調(diào)理P

23、H6.8 0.2 35、24 2h選擇性增菌 0.1ml+10mlMMRV 1ml+10mlTTB 42、24h 水浴培育 35、24h 43、24h水浴培育 含菌量高 含菌量低分別培育 劃線接種 選擇性培育基BS、XLD、HE 35、2448hBS生化鑒定 每個平板挑取至少2個可疑菌包括典型和非典型各2個 接種TSI三糖鐵、LIA賴氨酸鐵高層斜面LIA高層深4cm 松蓋以堅持有氧條件防止產(chǎn)生過多H2S 35、242h 棄去 尿素酶實驗 衛(wèi)矛醇、 氰化鉀、丙二酸鈉、吲哚實驗 陽性 陰性血清學(xué) 血清學(xué)實驗沙門氏菌的分類 報告結(jié)果生鮮食物、嚴(yán)重污染的食品和動物飼料ISO6579沙門氏菌檢驗流程前增

24、菌 25g樣+225mLBPW 勻質(zhì) 371、18 2h選擇性增菌 0.1ml+10mlRVS 1ml+10mlMKTTn 41.5 1、24 3h 37 1、24 3h 水浴培育分別培育 劃線接種選擇性培育基XLD和第二種選擇性培育基，如 BS 37、2448hBS 每個平板挑取至少5個可疑菌進(jìn)展純培育和確認(rèn)實驗 37、243h 生化鑒定 TSI、尿素酶、賴氨酸脫羧酶、-牛乳糖、V-P、 吲哚實驗血清學(xué) 血清學(xué)實驗沙門氏菌的分類 報告結(jié)果ISO6579沙門氏菌生化實驗表試驗沙門氏菌屬傷寒A型副傷寒B型副傷寒C型副傷寒其他菌屬反應(yīng)%b反應(yīng)%b反應(yīng)%c反應(yīng)%c反應(yīng)%bTSI葡萄糖產(chǎn)酸+100+1

25、00+100TSI葡萄糖產(chǎn)氣-d0+100+92TSI乳糖產(chǎn)酸-2-100-1TSI蔗糖產(chǎn)酸-0-0-1TSI硫化氫產(chǎn)生+97-10+92尿素水解-0-0-1賴氨酸脫羧酶+98-0+95-牛乳糖反應(yīng)-0-0-2eV-P反應(yīng)-0-0-0吲哚反應(yīng)-0-0-1b：百分率表明并不是所有分離到的沙門氏菌血清型都會顯示+或-的結(jié)果。c：這些百分率不能從現(xiàn)有的文獻(xiàn)中獲得。d：傷寒沙門氏菌不產(chǎn)氣e：亞利桑那亞型腸炎沙門氏菌為乳糖陽性或陰性反應(yīng)，但通常-牛乳糖反應(yīng)陽性。沙門氏菌檢驗選擇性分別培育XLD瓊脂：FDA BAM典型菌落：粉色菌落，帶或不帶黑色中心。許多沙門氏菌培育物可呈 現(xiàn)大的具光澤的黑色中心或幾乎為

26、全部黑色的菌落。 非典型菌落：黃色帶或不帶黑色中心。ISO中心黑色、周圍由于指示劑顏色的改動而出現(xiàn)紅色的細(xì)微透明帶。菌名菌落形態(tài)鼠傷寒沙門氏菌 紅色，有黑心傷寒沙門氏菌紅色，有黑心弗氏志賀氏菌紅色大腸埃希氏菌 黃色，有膽鹽沉淀環(huán)糞鏈球菌 -沙門氏菌檢驗選擇性分別培育BS瓊脂：FDA BAM典型菌落：產(chǎn)硫化氫菌落黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周 圍的培育基通常開場呈褐色，但伴隨培育時間的延伸而 變?yōu)楹谏⒂袝灜h(huán)效應(yīng)； 非典型菌落：有些菌株不產(chǎn)生硫化氫，構(gòu)成灰綠色菌落，周圍培育 基不變色。菌名菌落形態(tài)傷寒沙門氏菌 黑色，有金屬光澤鼠傷寒沙門氏菌 黑色，有金屬光澤奇異變形桿菌褐色或呈黑色，無金屬光澤弗氏志賀氏菌棕色至綠色大腸埃希氏菌 棕色至綠色糞鏈球菌