1、 ICS 65.020.20B 05運 城 市 地 方 標 準DB1408/T 0252022香菇栽培種生產技術規程2022-03-30發布2022-05-01實施 DB 1408/T 0252022目次前言 . II123范圍 . 1規范性引用文件 . 1術語和定義 . 13.1固體培養基 . 1生產流程 . 1生產要求 . 1455.1場地選擇 . 1環境要求 . 2廠區布局與廠房設置 . 2生產設備與設施 . 2人員要求 . 25.25.35.45.567生產原料與菌種 . 26.1生產原料 . 2菌種與種源確定 . 26.2生產技術與操作規程 . 27.1培養基配制與分裝 . 2培養基

2、滅菌 . 3接種 . 3培養 . 4成品檢驗 . 4入庫管理 . 47.27.37.47.57.6附錄A（規范性附錄）生產條件與設備. 5I DB 1408/T 0252022前言本文件按照 GB/T 1.1-2020標準化工作導則第 1部分：標準化文件的結構和起草規則的規定起草。II DB 1408/T 0252022香菇栽培種生產技術規程1范圍本文件規定了香菇栽培種（固體菌種）生產相關的術語和定義、生產流程、生產要求、生產原料與菌種、生產技術與操作規程的要求。本文件適用于運城市范圍內香菇栽培種（固體菌種）的生產。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款

3、。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 12728GB 19170食用菌術語香菇菌種NY/T 528食用菌菌種生產技術規程食用菌菌種良好作業規范食用菌菌種通用技術要求食用菌菌種檢驗規程NY/T 1731NY/T 1742NY/T 18463術語和定義GB/T 12728界定的以及下列術語和定義適用于本文件。3.1固體培養基以富含木質纖維素或淀粉類天然物質為主要原料（運城地區一般以果木屑為主要原料），添加適當數量的有機氮源和無機鹽類原料，具有一定水分含量的培養基質。4生產流程生產場地選擇廠區布局與廠房設置

4、設備與設施生產原料與菌種培養基制備分裝滅菌冷卻接種培養（檢驗）成品檢驗入庫管理。5生產要求5.1場地選擇應選擇地勢高、干燥、通風良好、排水暢通、交通方便的場地。1 DB 1408/T 02520225.25.35.45.5環境要求環境要求應符合NY/T 1731的要求。廠區布局與廠房設置廠區布局與廠房設置按附錄表A.1執行。生產設備與設施生產設備與設施按附錄表A.2執行。人員要求應配備能掌握菌種生產相關知識技能的專業技術員及檢驗人員。6生產原料與菌種6.1生產原料生產原料應符合NY/T 528的要求。原料主要是農作物谷粒及農副產品的廢棄下腳料，如木屑（果木屑）、麩皮、棉籽殼等，還有其他生物制劑

5、如酵母粉、蛋白胨等。另外還應添加一些化學藥品如硫酸鎂、磷酸二氫鉀等。6.2菌種與種源確定6.2.16.2.2菌種的引種來源應確實可靠，母種的感官要求和生物學要求應符合GB/T 19170的要求。栽培種生產單位每年在種源進入擴大生產程序之前，應進行菌種質量和種性的檢驗，檢驗項目應包括純度、活力、菌絲長勢的一致性、菌絲生長速度和菌落外觀等，并做出菇試驗，驗證種性。種源出菇試驗方法及種源質量要求應符合NY/T 1742的要求。7生產技術與操作規程培養基配制與分裝7.17.1.1母種培養基一般應使用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA)，并嚴格控制pH值。7.1.2原種與栽培種培養基應選用以下的培養基配方：

6、a)b)闊葉硬雜木屑（果木屑）78%，麩皮20%，蔗糖1%，石膏1%，含水量60%1%，pH 6.5；闊葉硬雜木屑（果木屑）70%，棉籽殼 13%，麥麩 15%，蔗糖 1%，石膏 1%，含水量 60%1%，pH 6.5；c)闊葉硬雜木屑（果木屑）63%，棉籽殼 20%，麩皮 15%，蔗糖 1%，石膏 1%，含水量 60%1%，pH 6.5。7.1.3培養基分裝2 DB 1408/T 0252022a)b)母種培養基的分裝量應掌握在試管長度的四分之一至五分之一處，滅菌后擺放成的斜面頂端距試管口應不少于50mm；原種和栽培種培養基應裝至距瓶(袋)口不少于50mm，滅菌后應不少于45mm。7.2培養

7、基滅菌7.2.1滅菌香菇的菌種培養基滅菌應使用高壓滅菌：a)b)母種的培養基配制分裝后應立即滅菌，母種培養基滅菌0.11MPa0.12MPa，30min；原種和栽培種培養基配制后應在 4h內滅菌，原種和栽培種培養基滅菌 0.14MPa0.15MPa，2.5h。7.2.2冷卻冷卻室在使用前應進行清潔和消毒處理。將滅菌后的栽培種放置在冷卻室中自然冷卻到料溫降至適宜溫度。7.2.3滅菌效果檢查滅菌后應進行滅菌效果檢查。a)b)母種培養基可直接放入28恒溫培養；原種和栽培種培養基隨機抽取 1%作為樣品，選取其中的基質顆粒接入無菌 PDA培養基中，置于28恒溫培養；c)恒溫培養48h后應檢查有無微生物長

8、出，并判斷培養基滅菌是否合格。7.3接種7.3.1接種室(箱)的清潔滅菌處理7.3.1.1接種室應為接種專用，室內要求清潔無菌。在搬入接種物和被接種物前應先進行衛生清潔處理，再進行消毒處理。7.3.1.2接種室（箱）藥物消毒處理可選用甲醛和高錳酸鉀混合熏蒸（每平方米一般應使用40%甲醛10mL、高錳酸鉀8mL，時間應不低于20min）。噴霧滅菌處理可用0.1%氯化汞或5%苯酚溶液。7.3.1.3接種超凈臺（接種箱）應先用75%酒精進行表面擦拭消毒，再用紫外燈照射預凈20min。7.3.2接種物的滅菌接種用培養基可以先放入培養室與培養室一起消毒滅菌。菌種放入超凈臺時，應用75%酒精進行表面擦拭消

9、毒滅菌。7.3.3接種操作在無菌室(箱)或凈化工作臺上應嚴格按無菌操作接種。a)b)c)接種的品種應單品種操作，中間不得更換品種。應一個品種操作完成后，再換另一品種；母種、原種、栽培種的接種都應從開口處一點接種，不應打孔多點接種；接種完成后應及時貼好標簽，按照品質管理要求，記錄品種、接種時間等必要信息。7.3.4接種室(箱)后處理3 DB 1408/T 0252022接種室每次使用后，應及時清理清潔、排除廢氣、清除廢物，臺面要用75%酒精擦拭消毒。7.4培養7.4.1培養室滅菌處理使用培養室時，應提前2d進行滅菌處理：a)b)c)首先應采用無揚塵方法進行清潔；清潔后應進行藥物消毒，藥物消毒處理

10、應參照7.3.1的方法進行；藥物消毒處理后再采用紫外線照射滅菌（1m3配置紫外線燈應不低于1.5W）。7.4.2培養條件a)b)c)溫度：241；空氣相對濕度：75%以下；通風良好處避光培養。7.4.3培養期的檢查各級菌種培養期間應定期檢查。及時揀出不合格菌種，并做好檢查記錄。a)b)母種每48h檢查一次；原種和栽培種長滿袋前每周檢查2次，長滿袋以后每周檢查1次。7.57.6成品檢驗培養結束后應對成品進行抽樣檢驗，成品檢驗應符合NY/T 1846的要求。入庫管理入庫之前應確認產品正常，并做好入庫登記。a)b)母種應在51貯存，保藏期應不超出90d；原種應在51貯存，保藏期應不超出40d。短期儲

11、藏可在溫度151、清潔、通風、干燥(相對濕度60%65%)、避光的室內存放，但不應超出20d；栽培種應盡快使用。在溫度151、清潔、通風、干燥(相對濕度60%65%)、避光的室內存放應不超出20d。在51下可貯存90d。c)4 DB 1408/T 0252022AA附錄 A（規范性附錄）生產條件與設備表A.1廠區布局與廠房設置區域廠房名稱滅菌室功能設置要點培養基滅菌水電、安全設備齊全、通風排氣良好、進出原料便利。室內清潔、防塵、散熱通氣良好。冷卻室接種室滅菌后培養基的冷卻菌種生產的接種有較好的防塵性能、內壁及屋頂光滑、便于清洗和消毒、通風換氣良好。無菌區域有較好的防塵性能、內壁及屋頂光滑、便于清洗和消毒、通風換氣良好。溫度、濕度、通風調節良好、防蟲防鼠防雜菌。培養室接種后的菌種培養儲存庫菌種產品存放菌種質量檢驗菌種質量檢驗晾曬培養基原材料儲存生產原料等要求與培養同樣的設置條件。質量檢驗室栽培試驗場原料晾曬場原料儲存庫水電等條件具備、有利于安裝各種檢驗試驗用設備和設施。水電等條件具備、有利于安裝各種檢驗試驗用設備和設施。地面平整、光照好、空曠、遠離火源。防雨、防潮、防火、防蟲、防鼠、防雜菌。一般區域辦公區域原料配制、調整、分裝及滅菌準備配料分裝室水電方便、空間充分。質量管理室