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文檔簡介

1、生物化學核酸的化學ATP能量“貨幣”GTP參加蛋白質和嘌呤的合成多級螺旋模型壓縮倍數 7 6 40 5 (8400) DNA 核小體 螺線管 超螺線管 染色單體 2nm 10nm 30(10)nm 400nm 210m 一級包裝 二級包裝 三級包裝 四級包裝 染色體包裝的結構模型DNA與基因組DNATranscription RNA(mRNA、tRNA、rRNA)TranslationProtein基因基因是DNA片段的核苷酸序列,DNA分子中最小的功能單位。結構基因調節基因基因組指一個物種單倍體的染色體所攜帶的一整套基因。(一)DNA與基因真核生物與原核生物基因組的比較:1)真核生物基因分布

2、在多個染色體上,而原核生物只一個染色體。2)真核生物在基因組轉錄后的絕大部分前體RNA必須經過剪接過程才能形成成熟的mRNA,而原核生物的基因幾乎不需要轉錄后加工。3)真核生物細胞中DNA與組蛋白和大量非組蛋白結合,并有核膜將其與細胞質隔離,結果真核細胞的轉錄和翻譯在時間上和空間上都是分離的,而原核細胞的基因轉錄和翻譯是同步的。4)真核生物的基因是不連續的,中間存在不被翻譯的內含子序列,而原核生物幾乎每一個基因都是完整的連續的DNA片段。基因組大小和C值C值 (C Value):在每一種生物中其單倍體基因組的DNA總量是特異的。DNA的長度是根據堿基對的多少推算出來的。C值是每種生物的一個特征

3、,不同生物之間差別很大低等真核生物中與形態學復雜程度相關,但高等真核生物中變化很大生物體進化程度高低與C值不成明顯線性相關親緣關系相近的生物C值相差較大。高等生物的C值不一定就意味著它的C值高于比它低等的生物。C值矛盾/ C值悖論:C值和生物結構或組成的復雜性不一致的現象。C值變化范圍寬意味著在某些生物中有DNA是不編碼的。(二)原核生物基因組的特點1. DNA大部分為結構基因,每個基因出現頻率低。2. 功能相關基因串聯在一起,并轉錄在同一mRNA中(多順反子)。3.有基因重疊現象。ABCDEFG(三)真核生物基因組的特點1. 重復序列單拷貝序列:在整個DNA中只出現一次或少數幾次,主要為編碼

4、蛋白質的結構基因。中度重復序列:在DNA中可重復幾十次到幾千次。高度重復序列:可重復幾百萬次高度重復序列一般富含A-T或G-C,富含A-T的在密度梯度離心時在離心管中形成的區帶比主體DNA更靠近管口;富含G-C的更靠近管底,稱為衛星DNA(satellite DNA)富含A-T富含G-C主體DNA2. 有斷裂基因mRNA1 872bp內含子(intron):基因中不為多肽編碼,不在mRNA中出現。ABCDEG7 700bpF外顯子(exons):為多肽編碼的基因片段。:由于基因中內含子的存在。例外:組蛋白基因(histongene)和干擾素基因(interferon gene)沒有內含子。tr

5、anscriptionRNA的結構與功能RNA分子是含短的不完全的螺旋區的多核苷酸鏈。(一)tRNAtRNA約占RNA總量的15%,主要作用是轉運氨基酸用于合成蛋白質。tRNA分子量為4S,1965年Holley 測定AlatRNA一級結構,提出三葉草二級結構模型。主要特征:1.四臂四環;2.氨基酸臂3端有CCAOH的共有結構;3.D環上有二氫尿嘧啶(D);4.反密碼環上的反密碼子與mRNA相互作用;5.可變環上的核苷酸數目可以變動;6.TC環含有T和;7.含有修飾堿基和不變核苷酸。主要特征:1.四臂四環;2.氨基酸臂3端有CCAOH的共有結構;3.D環上有二氫尿嘧啶(D);4.反密碼環上的反

6、密碼子與mRNA相互作用;5.可變環上的核苷酸數目可以變動;6.TC環含有T和;7.含有修飾堿基和不變核苷酸。tRNA二級結構(二)rRNA占細胞RNA總量的80%,與蛋白質(40%)共同組成核糖體。原 核 生 物 真 核 生 物核糖體rRNA核糖體rRNA70S(30S、50S)16S、5S、23S80S(40S、60S)18S、5S、5.8S、28S(三)mRNA與hnRNAmRNA約占細胞RNA總量的35%,是蛋白質合成的模板。真核生物mRNA的前體在核內合成,包括整個基因的內含子和外顯子的轉錄產物,形成分子大小極不均勻的hnRNA。(四)snRNA和asRNAsnRNA主要存于細胞核中

7、,占細胞RNA總量的0.11%,與蛋白質以RNP(核糖核酸蛋白)的形式存在,在hnRNA和rRNA的加工、細胞分裂和分化、協助細胞內物質運輸、構成染色質等方面有重要作用。asRNA可通過互補序列與特定的mRNA結合,抑制mRNA的翻譯,還可抑制DNA的復制和轉錄。(五)RNA的其它功能1981年,Cech發現RNA的催化活性,提出核酶(ribozyme)。大部分核酶參加RNA的加工和成熟,也有催化C-N鍵的合成。23SrRNA具肽酰轉移酶活性。RNA在DNA復制、轉錄、翻譯中均有一定的調控作用,與某寫物質的運輸與定位有關。核酸的性質(一)一般理化性質1.為兩性電解質,通常表現為酸性。2.DNA

8、為白色纖維狀固體,RNA為白色粉末,不溶于有機溶劑。3.DNA溶液的粘度極高,而RNA溶液要小得多。4.RNA能在室溫條件下被稀堿水解而DNA對堿穩定。5.利用核糖和脫氧核糖不同的顯色反應鑒定DNA與RNA。(二)核酸的紫外吸收性質核酸的堿基具有共扼雙鍵,因而有紫外吸收性質,吸收峰在260nm(蛋白質的紫外吸收峰在280nm)。核酸的光吸收值比各核苷酸光吸收值的和少3040%,當核酸變性或降解時光吸收值顯著增加(增色效應),但核酸復性后,光吸收值又回復到原有水平(減色效應)。Southern 印跡法(Southern blotting):DNA限制片段限制性內切酶帶有DNA片段的凝膠瓊脂糖凝膠

9、電泳堿液浸泡,并中和凝膠上DNA變性變性的單鏈DNA轉移至硝酸纖維素薄膜上放射性標記探針雜交雜交DNA-DNA分子放射自顯影顯示出雜交分子的位置04全國)115下列哪些有關DNA聚合酶鏈式反應(PCR)的說法是正確的A反應需要一對引物 B反應始終在高于70的條件下進行C應需要加連接酶 D反應中不需要加限制性內切酶(05全國)1關于DNA分子的構象,以下哪些說法是正確的?ADNA二級結構(雙螺旋)主要具有A、B、D、E、Z等構象BB型是右手螺旋,其它是左手螺旋C活細胞中B型最多,且穩定不變D.細胞中A、B、Z型等都可能存在,在一定的生理條件下發生部分變構E.不同的構象轉錄活性不一樣,A型最高AD

10、AD(05全國)4.在DNA變性過程中,以下哪些現象會出現?A磷脂鍵的斷裂B.雙螺旋之間氫鍵的斷裂C粘度下降D.沉降速度增加E紫外吸收增加(07全國)107下列有關DNA和mRNA的描述中正確的是: A.mRNA易被水解,DNA則較穩定 BDNA可以配對形成雙鏈結構,而mRNA則不能 C.在一定條件下,DNA和mRNA都可以形成雙鏈結構 D細菌的mRNA與其DNA一樣穩定(07安徽)16胸腺嘧啶只會出現在下列何種分子中( ) AtRNA BmRNA CrRNA DcDNABDEACDD(07安徽)6下列關于DNA雙螺旋結構的描述,正確的是( )A兩條鏈均為左手螺旋 B堿基配對是很準確的,A總是

11、與C配對,G總是與T配對C配對的堿基不充滿雙螺旋空間 D一條長鏈是從5一3,另一條長鏈是從從3一5(08全國)70DNA分子一般有成千上萬甚至數百萬個堿基對組成,基因中核苷酸的專一序列就是一種信息,編碼專一蛋白質的一級序列。雙鏈DNA之所以具有較高的熔解溫度是由于它含有較多的:( )AA+G BC+T CA+T DC+G(09安徽)12在DNA的凝膠電泳中,聚丙烯酰胺比瓊脂糖凝膠電泳A分辨率低,分離范圍廣 B分辨率低,分離范圍小C分辨率低,分離純度低 D分辨率低,操作簡練CD DB(09安徽)13雙鏈DNA中,下列哪一組堿基含量高,則它的的Tm值也高 A腺嘌呤鳥嘌呤 B胞嘧啶胸腺嘧啶 C腺嘌呤

12、胸腺嘧啶 D胞嘧啶鳥嘌呤(09安徽)18關于PCR擴增停滯的原因有很多種,但下列各項中,()不是主要原因A底物(模板)過剩BdNTP的大量消耗C產物的聚集D非特異性產物的競爭性抑制DB(10安徽)16、下列關于Watson and Crick的DNA雙螺旋模型的說法,正確的是( )。 A組成雙螺旋的兩條DNA鏈反向平行 B堿基對位于雙螺旋的內側 C維系雙螺旋結構的作用力主要是堿基堆積力 DDNA雙鏈是左手螺旋(10安徽)20、檢測DNA片段與蛋白質的相互作用常用的技術為( )。 A限制性圖譜分析 BSouthern雜交 C凝膠電泳阻抑分析 Dwestern印跡分析(11全國)16DNA的Tm值

13、較高,是由于下列哪組核苷酸含量較高所致: (1分) AA+G BG+C CA+T DC+TABCCB (11全國)17DNA分子的雙螺旋結構被破壞后,其紫外吸收將會: (1分) A減小 B增加 C不變 D以上都可能(11全國)20下列哪些可使DNA雙螺旋結構穩定: (2分) A磷酸二酯鍵 B氫鍵 C堿基堆積作用 D離子鍵(11安徽)16、下列哪一項關于DNA和RNA的描述是錯誤的是( )A、DNA是雙螺旋結構,RNA是單鏈結構 B、DNA的基本結構是脫氧核糖核酸,RNA的基本單位是核糖核酸 C、DNA只有酸解離,RNA有兩性解離 D、DNA沒有堿基T(胸腺嘧啶),而有堿基U(尿嘧啶)BBCDD(11安徽)20、一個tRNA的反密碼子為3UGC5,它能識別的mRNA的密碼子是( )A、5ACG3 B、5UGC3 C、5TCG3 D、3ACG5(12安徽)16(多選)下列關于核酸的基本結構的說法,正確的是( )ADNA分子是右旋的雙螺旋分子B染色體被吉姆薩染料染色后顯示的G帶是富含G-C核苷酸的

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