1、From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O出凝血基礎知識培訓出凝血基礎知識培訓概述概述 血液止血過程涉及到血管、血小板、凝固系統、血管、血小板、凝固系統、抗凝系統、纖溶系統抗凝系統、纖溶系統。此外還與機體自身的防護，如免疫應答、細胞的吞噬作用、激肽生成過程有關。 簡單的說，當血管破損，血小板聚集，凝血酶生成，交聯纖維蛋白在聚集血小板的基礎上形成，鞏固用于堵住傷口堵住傷口的塞子。繼而激活纖溶系統，溶解多余的纖維蛋白，避免形成血栓栓塞，最終修復破損的血管，以維持血管的完整和通暢維持血管

2、的完整和通暢。From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O出凝血的過程出凝血的過程血小板RBC出血出血黏附黏附聚集聚集凝固反應凝固反應初級血栓二級血栓內皮層血管內皮受損纖維蛋白凝塊From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O出凝血的過程出凝血的過程凝血酶黏附和聚集纖維蛋白止血塊血小板的黏附和聚集0 min10 min5 min二級止血初級止血凝固From the desk

3、of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OActivated plateletsActivated plateletsResting plateletsResting platelets血小板的結構血小板的結構From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O血小板的生理功能血小板的生理功能 血小板是一個多功能的無核細胞，其主要生理作用是參與正常的血栓與止血。血小板的功能主要包括粘附(adhesion)、

4、聚集(aggregation)、釋放(release)反應以及其他凝血功能。此外，血小板還參與各種炎性、免疫反應及保持血管完整性的功能。l血小板粘附血小板粘附：是指血小板粘著在受損血管內皮膠原上的過程。這是血小板參與止血反應的第一步，此過程需要有vWF和血小板膜GPIb受體參與。l血小板聚集血小板聚集：是指血小板之間相互粘附的過程。此過程需要有纖維蛋白原和血小板膜GPIIb/IIIa受體參與。l血小板釋放血小板釋放:是指在誘導劑的作用下儲存在血小板內的顆粒包括-顆粒、致密顆粒或溶酶體顆粒中的許多物質釋放到血小板外的過程。From the desk of K .S .H OFrom the de

5、sk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O一期止血一期止血最先是由血管受損后引起血小板的的生理反應以阻止出血機制 -血小板經凝血酶等刺激而活化 -血小板經 GPIb 和 von Willebrand 因子 (VWF)之間的交互 作用黏附變形 -血小板顆粒物質的釋放以補充更多血小板到受損部位 -血小板的聚集在GPIIb/IIIa和纖維蛋白原交互作用下以形成 最初的栓子 引發二期止血 (凝固蛋白)From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O一期止血

6、的檢測實驗一期止血的檢測實驗出血時間出血時間 - Assesses all components of Virchows triad -體內測試 直接在患者身上執行 -使用替代的工具進行“體外”出血時間的檢測血小板聚集血小板聚集 -檢測血小板聚集的能力，通過體外添加不同的誘導劑 -主要用于評價血小板糖蛋白 IIb/IIIa 受體的功能 Von Von WillebrandWillebrand 因子因子 (VWF) (VWF) 測試測試 -測定VWF的數量和功能, 協同血小板在受損部位發揮黏附的作用 -評價VWF 與血小板糖蛋白 Ib 受體交互作用的功能From the desk of K .S

7、 .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O二期止血二期止血血液凝固血液凝固過程過程機制機制 -凝血因子相繼激活形成凝血酶 -凝血酶使纖維蛋白原形成纖維蛋白 -纖維蛋白加固在一級止血中形成的血小板栓子成為更穩固的 血栓塊 (二級止血栓子) 防止防止受損部位進一步的血液受損部位進一步的血液流失流失From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O 血液凝固簡稱凝血，是血液由液體狀態轉變為凝膠 狀態的過程。此過程是由多種酶和

8、輔助因子參與的復 雜過程。其核心是生成凝血酶，后者將纖維蛋白原轉 變成纖維蛋白。 當凝血活動達到止血目的時，機體迅速啟動抗凝系 統阻止凝血繼續下去，避免造成血管阻塞。 凝血和抗凝兩者間的動態平衡是正常機體維持體內 血液液體流動狀態和防止血液丟失的關鍵。 凝血機制凝血機制From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O血液中的凝血因子血液中的凝血因子From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K

9、.S .H O 凝血因子l 組織因子組織因子(TF)：凝血過程中的啟動因子。血管內皮細胞、神經 膠質、血管平滑肌和上皮細胞都能表達TF。因此能在血管和器 官外圍形成保護，只要血液漏出血管，TF就會啟動凝血過程。lVII因子因子(F-VII)：在血管損傷時，VII因子與TF結合啟動凝血過程。 也許是因為在血漿中沒有有效的抑制物中和游離的F-VIIa，所 以近些年來，基因重組的F-VIIa被導入臨床作為一種治療手段， 1，用于血友病治療，血友病患者有針對外源性F-VIII的抑制物 時；2，更為廣泛的出血問題和一般外科干預治療。l凝血酶原凝血酶原(F-II)：凝血酶原被F-X-F-V復合物激活后，可

10、以激活很 多蛋白酶。包括：促凝因子F-V、F-VIII、F-XI，抗凝因子PC，一 系列跨膜激活蛋白酶受體（PARs），凝血酶激活纖溶抑制物（TAFI）。 凝血因子lVIII因子因子(F-VIII)：VIII因子是F-IXa激活F-X的必要輔助因子，由凝血 酶或F-Xa激活，由APC滅活，缺乏VIII因子導致血友病A。lIXIX因子因子( (F F-IX)IX)：缺乏IX因子會導致血友病B，因為F-IX的主要功 能是參與F-X的激活，TF-F-VIIa或F-XIa能激活F-IX。lXIXI因子因子( (F F-XI)XI)：XI因子由凝血酶激活，以前認為XI因子由接觸 因子XII因子激活。但現

11、在的觀點是XI因子由凝血酶反饋激活， 繼而激活IX因子、X因子，從而大量激活凝血酶，使凝血過程進 入放大期。l血管性血友病因子血管性血友病因子( (vWF)vWF)：vWF由內皮細胞、巨核細胞、血小板合 成，并在各種刺激(包括凝血酶的刺激)下釋放入血。血液循環中 也有一定量的vWF(由內皮細胞釋放)。vWF的兩個主要功能： 1，作為VIII 因子的載體并穩定VIII 因子；2，誘導血小板GPIb 粘附在膠原纖維上。經典的凝血機制經典的凝血機制血凝瀑布學說血凝瀑布學說 當缺乏F-XII、激肽釋放酶原、高分子量激肽原時，體外實驗會顯示凝血時間延長，但機體為什么沒有出現出血傾向？ 為什么缺乏F-VI

12、II或F-IX時，機體會出現嚴重的出血，而外源凝血途徑不能阻止出血？ 為什么缺乏F-XI引起的出血程度要比F-VIII或F-IX因子缺乏輕得多？體外試驗時，為什么凝血酶爆發性生成前有一個延緩期？From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O經典理論產生的幾個問題經典理論產生的幾個問題組織因子途經組織因子途經 血管血管損傷血管損傷TFTF/aaa凝血酶原凝血酶原aa凝血酶凝血酶纖維蛋白原纖維蛋白原纖維蛋白纖維蛋白XIXIaTFPI(-)Vaaau外源性的因子在組織因子的結合下既可激活因子

13、，又可激活內源性的第因子，從而打破了內源與外源的界限。u因子缺乏時并不引起出血，這說明第因子并不一定只被因子激活，現已證明本身具有自身激活作用。u凝血酶（因子）也可激活因子，原來認為只有因子才能激活因子。uTF被激活并與因子結合后會被組織因子途徑抑制物（TFPI）所抑制；后者已成為一種新型抗凝劑。是組織因子、 、因子的天然抑制物。傳統的凝血途徑的修改傳統的凝血途徑的修改 組織因子聯合FVIIa 在創傷處啟動凝固 少量形成的凝血酶激活血小板 凝血因子在血小板表面形成復合物 大量形成的凝血酶使纖維蛋白原轉化成纖維蛋白 纖維蛋白加固了血小板栓子 (一期止血) 并使止凝血完成更新的二期止血更新的二期止

14、血From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O內源途徑XIIXIIXVIII共同XVII途徑APTT內源+共同纖維蛋白原纖維蛋白凝塊VII外源途徑組織因子PT外源+共同From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O實驗室檢

15、查實驗室檢查TTFbgp 血液收集于枸櫞酸鈉抗凝的試 管中p 由于枸櫞酸鈉結合了鈣使血液 保持流動，可用于檢測凝固功 能。p 將試管經過離心分離血漿層 (白細胞 & 血小板) 和紅細胞p 用于測試的血漿 - 血漿含有纖維蛋白原 - 血清不含有纖維蛋白原p 血漿是“乏血小板的” 血小板層留 在淡黃色層里 血漿淡黃色層紅細胞層樣樣 本本From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OPT的的檢測檢測原理原理 in Blood in PlasmaPT 試劑試劑FibrinIIIExtr

16、insic System測測量凝血量凝血時間時間without組織組織因子因子Calcium (Ca2+)without正常范正常范圍圍10-14 secIX37癈癈Ca2+, PLCa2+, PLXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIVIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIVIIIIIXVIIIBloodSamplingTrisodiumCitrateFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O演算纖維蛋白原演算纖維蛋白原DODDOD1DOD2DO

17、D3500mg/dl250mg/dl125mg/dlDOD3DOD2DOD10125 250500Mg/dlFIB時間DODFIBFIBFIBDOD x FIBFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OPTPT單位的表達方式單位的表達方式1、以秒(s)表示:參考值為11-14s。待測者的結果超過正常對照3s以上有臨床意義。2、凝血酶原時間比值(PTR)：待測血漿的凝血酶原時間與正常血漿凝血酶原時間的比值。參考值為0.82-1.15。3.國際標準化比值(INR):即PTRISI。參考

18、值為0.8-1.5。ISI為國際敏感度指數。指數越大，組織凝血活酶的敏感性越低。4.活性%From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OAPTT的的檢測檢測原理原理 in Blood in PlasmawithoutwithoutwithoutIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIXXIIIXIIXIXVIIIV

19、IIVIVIIIIIIAPTT ReagentActivatorPLIntrinsic SystemMeasure Clotting TimeEllagic acid, silica etc.Calcium (Ca2+)Normal Range20-40 secCaCl2IVPhospholipidFibrin37癈癈XIIIXXIVIIIXVIIICa2+, PLCa2+, PLBloodSamplingTrisodiumCitrateFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OF

20、rom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H Op 若僅 APTT 延長，最可能的缺乏 是 Factors XII, XI, IX 或 VIIIp 若僅 PT 延長，最可能是 Factor VII 缺乏 p 當兩種初篩實驗均延長時，缺乏 的是共同途徑的 Factors X, V, II和 I.凝血疾病的篩查凝血疾病的篩查APTTPTXIIXIIXVIIIXVIIIVIIFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the

21、desk of K .S .H O延長的延長的 PT / APTTPT / APTT PT PT延長延長 APTTAPTT正常正常 PT PT正常正常 APTTAPTT延長延長 PT PT延長延長 APTTAPTT延長延長缺乏缺乏VIIVIIVIIIVIIIX XVitamin KVitamin KIXIXV VXIXIII IIXIIXIII I接觸因子接觸因子Vitamin KVitamin K延長由于延長由于Warfarin Warfarin 治療治療肝素肝素WarfarinWarfarin 治療治療抑制物抑制物 ( (特異的或特異的或 LA)LA) 肝臟疾病肝臟疾病From the d

22、esk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFbg的的檢測檢測原理原理 (Clauss方法方法) in Blood in PlasmawithoutwithoutwithoutIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIThrombin ReagentFibrinMeasureClotting TimeThrombinNormal Range180-360 mg/dLCalculated forFibrinogen concentrat

23、ion37癈癈IIIBloodSamplingTrisodiumCitrateFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O in Blood in PlasmawithoutwithoutwithoutIXXIIIXVIIIVIIIIIIIIIXXIIXIXVIIVIVIIIIThrombin ReagentFibrinThrom

24、bin37癈癈IIIBloodSamplingTrisodiumCitrate凝血酶時間凝血酶時間(TT)(TT)測定測定Measure Clotting TimeNormal Range16-18 sec凝血酶時間 (TT)p 評估血漿中纖維蛋白原的功能p TT 凝固時間延長 - HEPARIN - 直接凝血酶抑制劑 - 低纖維蛋白原血癥 - 纖維蛋白原結構異常 - 纖維蛋白降解產物升高凝固與抗凝凝固與抗凝: : 一種平衡的行為一種平衡的行為產生凝血酶抑制凝血酶形成From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk

25、of K .S.H O凝固抑制凝固抑制外源途徑XII組織因子纖維蛋白原纖維蛋白凝塊內源途徑XIIXVIIIXIIVII抗凝血酶蛋白 C 系統V抗凝系統抗凝系統IIIIIIIVVVIIVIIIIXXXITFPIPSPCAT-IIIPLAPAXIIIFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O抑制物抑制物p 天然抑制物 - 蛋白 C (活化的) 和蛋白 S 抑制凝血因子 FVIIIa 和 FVa - 抗凝血酶(AT) 抑制 FXIa, FIXa, FXa, FVIIa/TF, 和凝血酶 (II

26、a)p 病理抑制物 - 獲得或自體免疫抗體對應特異性凝固因子p 藥物抑制劑 - 肝素和低分子量肝素 - Warfarin - 直接凝血酶抑制劑From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O抗凝血酶抗凝血酶(AT)(AT) 抗凝血酶抗凝血酶( (antithrombinantithrombin，ATAT ) )由肝臟、血管內皮由肝臟、血管內皮 細胞、巨核細胞合成，是依賴肝素的絲氨酸蛋白酶抑細胞、巨核細胞合成，是依賴肝素的絲氨酸蛋白酶抑 制劑，是人體內主要的血漿抗凝物質，尤其對凝血酶制劑，是人體

27、內主要的血漿抗凝物質，尤其對凝血酶 的滅活能力占所有抗凝蛋白的的滅活能力占所有抗凝蛋白的70%70%80%80%。 ATAT與絲氨酸蛋白酶作用的活性位點位與絲氨酸蛋白酶作用的活性位點位Arg393,Arg393, ser394 ser394處處, ,蛋白酶攻擊該鍵使其裂解并引起蛋白酶攻擊該鍵使其裂解并引起ATAT變構，變構， 從而形成從而形成ATAT與酶與酶1 1：1 1復合物復合物, ,這種共價結合是不可逆這種共價結合是不可逆 的的, ,肝素作用于肝素作用于ATAT的賴氨酸殘基從而大大增強的賴氨酸殘基從而大大增強ATAT的抗的抗 凝酶活性（凝酶活性（20002000倍以上倍以上）。From

28、the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O肝素和抗凝血酶的抑酶作用肝素和抗凝血酶的抑酶作用Antithrombin ThrombinFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OHeparin Heparin 蛋白蛋白C C系統是人體內另一重要的抗凝系統，它是通過一組蛋系統是人體內另一重要的抗凝系統，它是通過一組蛋 白的相互作用，最終使因子白的相互作用，最終使因子V V和和滅活，從而起到抗凝作用

29、。滅活，從而起到抗凝作用。 蛋白蛋白C C系統除蛋白系統除蛋白C C（protein Cprotein C，PCPC）外，還包括：）外，還包括： 蛋白蛋白S S（protein Sprotein S，PSPS）、）、 血栓調節蛋白（血栓調節蛋白（thrombomodulinthrombomodulin，TMTM）、）、 活化蛋白活化蛋白C C抑制物抑制物(activated protein inhibitor(activated protein inhibitor APCI) APCI) 內皮細胞蛋白內皮細胞蛋白C C受體（受體（endothelial protein C receptoren

30、dothelial protein C receptor， EPCREPCR）。）。 蛋白蛋白C C系統系統From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O蛋白蛋白C C系統系統 PCPC是由肝細胞合成的依賴維生素K的糖蛋白，是PC抗凝系統中的中心物質。 在血漿中PC為無活性的絲氨酸蛋白酶原，它必須轉變為具有絲氨酸蛋白酶活性的活性蛋白C，才能發揮抗凝作用，凝血酶-TM復合物是其生理激活劑。 PSPS也是由肝細胞合成的依賴維生素K的蛋白質，但不具有蛋白酶活性，在血漿中以游離形式和與4b結合的形式

31、存在，發揮抗凝輔助作用的是游離形式。 TMTM是一種單鏈糖蛋白，已知TM存在于除腦血管外的所有血管內皮細胞中。TM主要是與凝血酶結合成復合物，激活PC。From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O蛋白蛋白C C的抗凝途徑的抗凝途徑From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OBlood FlowThrombomodulinThrombinEPCRProtein CThrombinAPC損

32、傷處下游的抗凝作用損傷處下游的抗凝作用Thrombus血管損傷處發生的血栓血管損傷處發生的血栓蛋白蛋白C C的主要抗凝作用的主要抗凝作用Blood FlowVIIIaVaThrombusPSPSAPCAPCVaiVIIIaiFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O抗凝血酶抗凝血酶(AT)(AT)檢測檢測抗凝血酶抗凝血酶活性活性測定測定( (發色底物法發色底物法) )原理：原理： 在待測血漿中加入過量的凝血酶，凝血酶與血漿中的在待測血漿中加入過量的凝血酶，凝血酶與血漿中的ATAT形成形成

33、1 1: :1 1的復合物，剩余的凝血酶作用于顯色肽，裂的復合物，剩余的凝血酶作用于顯色肽，裂解出顯色基團，顯色程度與剩余凝血酶的量呈正相關，解出顯色基團，顯色程度與剩余凝血酶的量呈正相關，而與血漿而與血漿ATAT: :AgAg呈負相關。呈負相關。參考值：參考值： 108.5 108.55.3%5.3%From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O抗凝血酶抗凝血酶(AT)(AT)檢測檢測 AT AT: :AgAg含量含量測定測定(ELISA(ELISA法法) ) 原理：原理： 將抗將抗ATA

34、T抗體包被在固相板，標本中的抗體包被在固相板，標本中的ATAT與固相的抗與固相的抗ATAT抗體相結合，再加入酶標記的抗抗體相結合，再加入酶標記的抗ATAT抗體，形成抗體抗體，形成抗體- -抗抗原原- -酶標記抗體的復合物，加入顯色劑后，根據顯色的酶標記抗體的復合物，加入顯色劑后，根據顯色的深淺來判斷標本中深淺來判斷標本中ATAT的含量。的含量。 參考值：參考值： 290 29030.2mg/L30.2mg/LFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O抗凝血酶檢測的臨床意義抗凝血酶檢測的臨

35、床意義 ATAT缺乏是發生靜脈血栓與肺栓塞的常見原因之一，但與動缺乏是發生靜脈血栓與肺栓塞的常見原因之一，但與動 脈血栓形成關系不大。脈血栓形成關系不大。 一一. .遺傳性遺傳性ATAT缺乏：缺乏： 遺傳性遺傳性ATAT缺乏是一種常染色體顯性遺傳性疾病，患病率約缺乏是一種常染色體顯性遺傳性疾病，患病率約1/5000,1/5000,發病多在發病多在19-2519-25歲，患者常在手術、創傷、感染、妊娠歲，患者常在手術、創傷、感染、妊娠 或產后發生靜脈血栓，并可在多出反復發生血栓。此病可分為或產后發生靜脈血栓，并可在多出反復發生血栓。此病可分為 兩型：兩型：1.1.交叉反應物交叉反應物(cross

36、 reaction material)(cross reaction material)陰性型陰性型(CRM(CRM），），即抗原與活性均下降；即抗原與活性均下降；2.(CRM(CRM）型，即抗原正常，活性下降。）型，即抗原正常，活性下降。 共同表現是對肝素的親和力降低，從而對凝血酶的滅活能力明共同表現是對肝素的親和力降低，從而對凝血酶的滅活能力明顯減弱。顯減弱。From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O 二二. .獲得性獲得性ATAT缺乏：缺乏： 1. 1.合成降低，主要見于肝硬化、重

37、癥肝炎、肝合成降低，主要見于肝硬化、重癥肝炎、肝 癌晚期等。癌晚期等。 2. 2.丟失增加，見于腎病綜合征。丟失增加，見于腎病綜合征。 3. 3.消耗增加，見于血栓前期和血栓性疾病，如心腦血管疾病、消耗增加，見于血栓前期和血栓性疾病，如心腦血管疾病、 DICDIC、外科手術后、深靜脈血栓形成、外科手術后、深靜脈血栓形成 、肺梗死、妊高癥等。、肺梗死、妊高癥等。 三三.AT.AT水平增高：水平增高： 在血友病、口服抗凝藥物、使用黃體酮類藥物時，在血友病、口服抗凝藥物、使用黃體酮類藥物時，ATAT水平增高。水平增高。 From the desk of K .S.H OFrom the desk o

38、f K .S.H OFrom the desk of K .S.H O蛋白蛋白C C的檢測的檢測 蛋白蛋白C C活性活性測定測定(PC(PC: :A,A,發色底物法發色底物法):): 原理：原理： 從蛇毒中提取的從蛇毒中提取的ProtacProtac作為作為PCPC的激活劑的激活劑, ,可特異性可特異性 激活激活PC,PC,生成的活性生成的活性PCPC（APCAPC）作用于特異發色底物）作用于特異發色底物（ChromozymChromozym-APC ),-APC ),并釋放出產色基團對硝基苯胺并釋放出產色基團對硝基苯胺, , 顏色的深淺與顏色的深淺與PCPC: :A A的相對活性（的相對活性

39、（% %）呈正相關。）呈正相關。 參考值：參考值： 100.24 100.2413.18%13.18%From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O 蛋白蛋白C:AgC:Ag含量測定（含量測定（PC:AgPC:Ag, ,免疫火箭電泳法）免疫火箭電泳法） 原理：原理： 在電場的作用下，一定量的待測血漿（含有在電場的作用下，一定量的待測血漿（含有PCPC抗原）抗原）在含有抗人在含有抗人PCPC抗體的瓊脂糖凝膠中電泳，擴散一定時間，抗體的瓊脂糖凝膠中電泳，擴散一定時間，抗原與相應抗體反應形成不可見

40、的沉淀。電泳后在抗原與相應抗體反應形成不可見的沉淀。電泳后在1%1%磷磷鉬酸溶液中顯色形成有色的火箭免疫沉淀峰，該峰的高鉬酸溶液中顯色形成有色的火箭免疫沉淀峰，該峰的高度與度與PCPC抗原濃度呈正相關，由此計算抗原濃度呈正相關，由此計算PCPC: :AgAg的含量。的含量。 參考值：參考值： 102.5 102.520.1%20.1%From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O蛋白蛋白C C檢測的臨床意義檢測的臨床意義 一一. .遺傳性遺傳性PCPC缺乏：主要見于反復不明原因的血缺乏：主要

41、見于反復不明原因的血 栓形成。栓形成。 二二. .獲得性獲得性PCPC缺乏：常見于缺乏：常見于DICDIC、肝功能不全、大、肝功能不全、大 手術后、長期制動、口服抗凝劑患者。手術后、長期制動、口服抗凝劑患者。 三三.PC.PC抗原或活性增高：主要見于代償性增加如抗原或活性增高：主要見于代償性增加如 冠心病、糖尿病、腎病綜合征、妊娠后期等。冠心病、糖尿病、腎病綜合征、妊娠后期等。From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O蛋白蛋白C GlobalC Global試驗試驗檢測方法：檢測方法：

42、在待測血漿中加入蛇毒溫育，蛇毒可直接激活PC轉 變為APC。隨后加入APTT試劑以檢測依賴PC活性的血漿凝固時間（Protein C activity-dependent clotting time，PCAT）。若待測血漿中的PC系統正常，則加入Ca2+后 血漿凝固時間顯著延長。為了避免諸多因素的影響,本 試驗設計了對照組，即在試驗過程中以緩沖液代替PC 激活劑，血漿不依賴PC活性的血漿凝固時間(PCAT/O) 其結果應短于60秒。From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O參考值：參考值

43、： PCATPCAT為為8585200200秒，秒，PCAT/OPCAT/O為為33335555秒（秒（n n234234），），PCAT:PCAT/0PCAT:PCAT/0 本實驗結果應以正常化比率本實驗結果應以正常化比率(Normalized (Normalized Ratio,NRRatio,NR) ) 來表示。來表示。 NR NR(PCAT:PCAT/0)(PCAT:PCAT/0)樣本樣本CFCF CF CFSV/(PCAT:PCAT/0)SV/(PCAT:PCAT/0)正常人血漿正常人血漿 CF CF：校準系數，：校準系數，SVSV：試劑對正常人血漿的敏感值。：試劑對正常人血漿的敏感

44、值。 NR:0.69-1.56 NR:0.69-1.56From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O臨床意義：臨床意義： PCAT:PCAT/0小于0.8，說明蛋白C系統有缺陷。 本試驗多用于蛋白C、蛋白S、FV Leiden突變和 FII 20210 GA突變的檢測，起到蛋白C系統篩選 檢測作用。 本試驗也有假陽性，見于凝血因子V、VIII活性升 高，口服抗凝劑和狼瘡抗凝物等。 From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom

45、the desk of K .S.H O凝固與纖溶凝固與纖溶: : 一種精密的平衡一種精密的平衡形成血栓溶解血栓產生凝血酶產生凝血酶產生纖溶酶產生纖溶酶From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O纖溶的降解產物纖溶的降解產物纖溶酶纖溶酶纖維蛋白原纖維蛋白原凝血酶凝血酶纖溶酶纖溶酶纖維蛋白纖維蛋白纖維蛋白原纖維蛋白原降解產物降解產物FibrinogenolysisFibrinogenolysisprimaryprimaryactivationactivation纖維蛋白纖維蛋白降解產物降解產物FibrinolysisFibrinolysissecondarysecondaryactivationactivationFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O纖維蛋白纖維