1、T100ThermalCycler中文操作手冊手冊內容1 工作環境2 T100ThermalCycler的介紹3 T100ThermalCycler創建、編輯和儲存程序4運行程序5管理文件夾和反應程序文件6工具7儀器日常維護1 工作環境1.1 工作溫度15-31C1.2 工作和存儲濕度20-80%1.3 工作電源100-240VAC(±10%),50-60HZ.1.4 PCR許可證有2 T100ThermalCycler的介紹2.1 T100ThermalCycler各部分簡介口蓋加熱模塊散熱口LE"森燈觸屏USB接口T100ThermalCycler前面T100Therm

2、alCycler具有96孔的反應模塊，可以使用標準96孔板、聯管或單管等多種耗材。儀器支持的樣品反應體積為1-100ul,推薦的反應體積為15-50UL儀器主要包括以下幾個部分：加熱模塊：放置裝有樣品的標準96孔板、聯管或單管熱蓋：加熱樣品管的頂部，防止樣品蒸發和冷凝觸屏：用于反應程序的編輯、修改和運行，實時顯示運行程序USB接口：外接USB,導出數據LED指示燈：儀器正常運行時，指示燈亮散熱口:提供通風，用于儀器的快速升溫和降溫2.2 觸屏BtOMDllilT100ThermalCyclerHnvPiEiQCQlSawdPnrioccl*bneufaal*Tool*MY_T1MF徵。1加11

3、0.50儀器開機后，顯示觸屏界面，界面提供儀器的名字，日期和時間，觸屏上的四個按鍵分別代表的意義如下：NewProtocol:創建一個新的反應程序SavedProtocols查看、編輯、運行儲存的程序Incubate：可長時間運行一個恒定的溫度，與水浴鍋功能相似Tools：設置、儀器自檢、儀器信息、軟件升級2.3 放置樣品向上打開儀器熱蓋，將樣品管放到相應的位置，合上熱蓋。熱蓋的主要功能是在程序運行時，加熱樣品管的頂部，防止樣品蒸發和冷凝。放置樣品管時，要確保管子與反應模塊完全接觸，且反應模塊必須完全干凈。3 T100ThermalCycler創建、編輯和儲存程序3.1 創建新的程序，點擊觸屏

4、界面的“NewProtocol"按鈕，進入編輯界面。3.2 也可選擇編輯儲存的程序，點擊觸屏界面的“SavedProtocols”按鈕，選擇一個程序，點擊“Edite"，進入編輯界面。選擇SavedProtocols,點擊Edite3.3 新的程序編輯界面打開，如圖所示wHNamtUNSAVEDVTwnt2PCR反應的模板3.4 按照需要的實驗程序，首先設置反應體積，在Volume中輸入體積數，可輸入范圍為1-100ul,推薦反應體積為15-50U1。其次設置熱蓋的溫度，在Lid中輸入溫度，可卒&入范圍為40-11OC,推薦溫度為105C。最后，點擊反應程序的每一步

5、時，顯示為綠色，分別設置該步反應的溫度和時間。點擊溫度按鈕，如95C,出現數字鍵盤，輸入需要的溫度，點擊“OK”，確認。同樣的操作編輯時間。15:33106C0:30Name：UNSAVED2Op-NewProtocolOKCancel使用數字鍵盤編輯溫度“GOTO”可以設置反應的循環數，如“34X”，即共35個循環，也可設置循環的起始反應步驟，如“Step2”，即循環反應從第2步開始至第4步結束，箭頭指示的過程。3.5 插入新的反應步驟，點擊一個步驟，顯示為綠色，點擊“Insert”將在該步驟后面插入新的反應步驟。在“InsertStep”界面選擇需要插入反應步驟的類型，“Temperatu

6、re”即可插入溫度反應，“Gradient”即可插入溫度梯度反應“GOTO”即可插入PCR循環反應。點擊“Delete"，即可刪除選擇的步驟。NewProtocol106在Stepl后面插入新的反應步驟3.6 添加或刪除溫度梯度。選擇一個反應步驟，點擊“Options"，進入步驟優化窗口。NewProtocol1田OKCancel步驟優化窗口選擇“Gradient”，在“Backrow”輸入溫度梯度的最高溫度，在“Frontrow”輸入溫度梯度的最低溫度，右邊會顯示從A到H每一行的溫度值。注意：該儀器溫度梯度跨度范圍為1-25C步驟優化窗口顯示溫度梯度點擊“OK”，返回程序

7、主界面，最低和最高溫度的溫度梯度顯示在反應步驟中，可以點擊溫度，直接修改溫度梯度，不用再進入“OptionBackandfrontrowtemperaturesProtocolntn5t»p2顯示62C-72匕的溫度梯度3.7 溫度的遞增、時間的延伸和改變升溫速率。選擇一個反應步驟，點擊“Options"，進入步驟優化窗口。每一個實驗步驟都包括“Increment”、“Extend"、“RampRate"，“Increment”輸入X,即每個循環后溫度增加XC,“Extend”輸入Y,即每個循環后時間延長Y秒，“RampRate”輸入Z,即升溫速率為Z。

8、點擊“OK”，確認。Step4設置了溫度遞增，每循環增加3.8 改變“GOTO”參數。“GOTOStep”表示多個步驟的重復循環反應。選擇一個"GOTOStep”，點擊“Step”按鈕，進入數字鍵盤，修改數字為X,即可決定循環反應的起始步驟為X,如“Step2”，即循環反應從第2步開始至第4步結束，箭頭指示的過程。點擊“X”按鈕，進入數字鍵盤，修改數字為Y,即表示再重復Y個循環，總循環數為Y+1,如“34X”，即共35個循環。3000:300:301:00MX500OC反應程序中GOTOStep2和34個循環3.9 點擊“Run”，無需儲存，直接運行編輯好的反應程序。也可點擊“Sav

9、e”按鈕，進入儲存界面，在Folder后輸入或選擇儲存程序的文件，在Name后輸入反應程序命稱，點擊“Save”，返回程序主界面。然后點擊“Run”，運行程序。NewPratocol曲w命名為STDGRAD的應程序儲存在EVA文件中4運行程序4.1 開始運行程序，有如下方法：創建新的程序，點擊“Run”從“SavedProtocols"中選擇程序，點擊“Run”從“SavedProtocols"中選擇程序，點擊“Ed計e”，修改后，點擊“Run”前面已經詳細介紹了創建和編輯新的反應程序，下面介紹從“SavedProtocols"中選擇程序，運行。首先從開機界面中，

10、點擊“SavedProtocols”,進入選擇界面。其次從“Folders”文件夾中選擇文件，如“MAIN”。再次選擇“Files”文件中的反應程序，如“ISCRIPT"，“Preview”中會顯示所選程序的詳細設置，包括每一步的反應溫度和時間等信息。從“SavedProtocols"中選擇"ISCRIPT'jgff選擇好程序后，點擊“Run”，出現對話框，詢問是否修改反應體積，點擊OK”直接運行程序，或者點擊“Volume”修改體積后，再運行程序。SavedProtocolsAlesPreview1537RECEMFoldersIPRF15KEMAINR

11、unISCRIPT?0I05#CBVolume50pl.500J”一口3EVAVolume50|ilOKCancelQHomeFoldvrOptKsn，Fil*OpHOfW運行確認對話框程序運行后，運行進程可以通過兩種狀態顯示，分別是“Status”和“Clock”。“Status”狀態顯示整個實驗程序的每個步驟，以及正在進行的步驟。狀態顯示整個實驗程序的剩余時間。點擊“ViewStatus”和“ViewClock"，可在二者之間進行自由切換。Nun:ISCR1PI2:04:36RemainingStatus狀態Clock狀態4.2 暫停和恢復程序運行一個PCR反應程序允許暫停的，暫

12、停時，加熱模塊會維持在當前實驗步驟的反應溫度，熱蓋也維持原本的溫度，直到反應程序恢復繼續運行。當正在升溫或降溫時，程序暫停，儀器會繼續升溫或降溫，直到到達設定的溫度，才會保持不變。在“Status”狀態時，點擊“Pause”按鈕，反應程序暫停。點擊“Resume按鈕，反應程序繼續運行。反應程序在Step4時暫停4.3 跳過反應程序中的某一步，可以縮短反應時間。在在“Status”狀態時，點擊“SkipStep”按鈕，即可跳過當前步驟，多次點擊“SkipStep”按鈕，即可跳過多個步驟。4.4 取消反應程序。當程序取消時，加熱模塊立刻停止溫度加熱。不要立即關閉儀器電源，儀器需要時間使加熱模塊降溫

13、。在在“Status”狀態時，點擊“Cancel”按鈕，選擇“Yes”確認。4.5 孵育功能。開機主界面，點擊“Incubate”按鈕，進入孵育功能界面。編輯“Blocktemperature"，輸入溫度值，即設置孵育溫度。編輯“Holdtime"，輸入時間，即設置孵育時間，也可設為無窮時間。編輯“Lidtemperature"，輸入溫度值，推薦105c保持熱該溫度，防止樣品蒸發或冷凝。點擊“Run”，運行孵育程序。結束孵育功能時，點擊“Cancel”。incubateBlocktemperatureHoldtimeLidtemperature孵育功能界面5管理文

14、件夾和反應程序文件開機進入主界面，點擊“SavedProtocols”，進入選擇界面，包括以下文件夾:T100的SavedProtocols界面MAINfolder:儀器自帶的一些標準反應程序，可以編輯、刪除和重命名RECENTfolder:儲存的是最近使用過的20個程序CUSTOMfolder:可以設置為實驗室成員的個人文件夾USBfolder:外接SUB里的反應程序5.1 新建文件夾，從"SavedProtocols”選擇界面，點擊“FolderOptions”,選擇“New”，輸入8個字節的名稱，點擊“OK”，完成新建文件夾界面5.2 復制文件夾或文件，從“SavedProto

15、cols"選擇界面，選擇文件夾或文件，點擊“FolderOptions”或“FileOption”,選擇“Copy”，最后選擇文件或文件火新的儲存位置，點擊“Save”，即可完成。5.3 刪除文件夾或文件，從“SavedProtocols"選擇界面，選擇文件夾或文件，點擊“FolderOptions”或“FileOption"，選擇“Delete”，即可完成完整的文件夾或單個文件的刪除。5.4 重命名文件夾或文件，從“SavedProtocols”選擇界面，選擇文件夾或文件，點擊“FolderOptions”或“FileOption"，選擇“Rename

16、"，輸入新的名稱，點擊“OK”，確認。6工具開機進入主界面，點擊“Tools”，進入選擇界面，包括以下文件夾:Logs：觀察反應運行程序界面，可以被拷貝到USBAbout:觀察軟件的版本和儀器的機身號UpdateFirmware:升級儀器的版本ServiceLogin:可以從Bio-Rad廠家獲得幫助服務6.1 儀器的系統設置，從“Tools”界面，選擇“Settings”，進入界面，會看到儀器的系統設置，包括“Cyclername”設置儀器的名稱，“Date”設置日期年月日等信息，“Time”設置詳細時間信息，“Displaybrightness”設置顯示屏亮度，“samplevo

17、lume”設置默認的樣反應體積，“Standbydelay”設置一段時間后，為了節約電資源，儀器會進入待機狀態，"Endofrunbeep”設置運行結束后，儀器會發出聲音，提醒用戶。系統設置界面6.2 儀器自檢功能，從“Tools”界面，選擇“Self-Test”，點擊“Start"，儀器運行自檢程序，檢測儀器各部件的性能。儀器自檢界面6.3 升級儀器版本，從“Tools”界面,選擇“UpdateFirmware”，點擊“Start”,儀器運行升級程序，可升級到最新版本。儀器升級6.4 觀察軟件的版本和儀器的機身號，從“Tools”界面，選擇“About"，即可看到儀器版本，機身號和儀器運行的總時間。About112Firmwareversion:1.153Serialnumber:TC123456Totalhoursrun:9423About界面7儀器日常維護本機適用于實驗室任何