1、黃芩中黃芩中黃芩苷類黃芩苷類化合物的提取、化合物的提取、分離與鑒定分離與鑒定2022-5-4黃黃芩芩苷苷（B Ba ai ic ca al li in n）O OO OO OO OH HO OH HO OH HO OH HH HO OC CO OO OH HO O漢漢黃黃芩芩苷苷（W Wo og go on no os si id de e）O OO OO OO OH HO OH HO OH HO OH HC CO OO OH HO OO OC CH H3 3O OO OH HO OH HO OH HO O黃黃芩芩素素（B Ba ai ic ca al le ei in n）O OO OH H

2、O OO OC CH H3 3H HO O漢漢黃黃芩芩素素（W Wo og go on ni in n）水解水解黃芩中黃酮類化合物的基本結構黃芩中黃酮類化合物的基本結構葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸苷元苷元黃芩苷的相關特性黃芩苷的相關特性淡黃色淡黃色的針晶，因含有的針晶，因含有-OH-OH、-COOH-COOH而顯酸性，可溶于堿性而顯酸性，可溶于堿性試劑中。試劑中。理化性質藥理價值抗氧化抗氧化-清除氧自由基及抗氧化作用清除氧自由基及抗氧化作用抗菌抗菌-對微生物的抑制作用對微生物的抑制作用抗抗HIV-HIV-對人類免疫病毒對人類免疫病毒HIVHIV的抑制的抑制免疫調節免疫調節-對免疫功能的調節作用對免疫功

3、能的調節作用張喜平，田華，程琪輝.黃芩苷的藥理作用研究現狀.中國藥理學通報，2003,19（11）：12121215提提取取流流程程黃芩粗粉（100g）濾液1濾渣投入8倍量的沸水中，煎煮20min,用脫脂棉過濾（第一次）投入6倍量沸水煎煮2次（第二次、第三次），每次20min,用脫脂棉過濾濾液2、3濾渣合并濾液1、2、3，滴加濃硫酸至pH 1-2,充分攪拌，加熱至80，保溫30min，濾過濾液沉淀原理：黃芩苷和苷元在熱水中的溶解度較大，在酸中不溶而析出。離心機的使用4 3000 34 3000 3轉子數轉子數 轉速轉速 時間時間原理：通過離心機轉子高速旋轉產生的強大原理：通過離心機轉子高速旋轉

4、產生的強大離心力離心力，懸浮液與，懸浮液與懸浮顆粒之間因為重力的差異，而導致不同的懸浮顆粒之間因為重力的差異，而導致不同的沉降速度沉降速度。樣品要對稱放置樣品要對稱放置停止后才能打開停止后才能打開離心機使用注意樣品瓶外面無水樣品瓶外面無水打開打開交交叉叉對對稱稱第二次下進下進上出上出索式提取器索式提取器沉淀轉入錐形瓶中，加濃度95%的乙醇超聲洗滌2-3次，每次50 mL,離心乙醇液沉淀（主含黃芩苷）將其置于索式提取器中，加甲醇提取至液色極淡為止甲醇提取液結晶濃縮至10 mL，放置析晶，抽濾結晶結晶結晶法結晶法1.結晶法的操作結晶法的操作2.結晶溶劑的選擇結晶溶劑的選擇將需要結晶處理的固體物質或

5、粗晶加熱溶解在一定量的溶劑中，制成過飽和溶液，趁熱過濾，除去不溶性雜質，將濾液慢慢冷卻放置，析出結晶，過濾即得。結晶溶劑的選擇是關鍵。對結晶溶劑的要求：對欲純化成分加熱時溶解，冷卻時析出； 對雜質則冷熱都不溶或都溶； 溶劑的沸點適中； 與欲結晶的成分不發生化學反應； 盡可能安全、價廉、易得等。常用結晶溶劑：水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等等。第三次第三次結晶（黃芩苷）取結晶1g置圓底燒瓶中，加甲醇100 mL,加熱回流20 min，趁熱過濾甲醇溶液濃縮至10 mL，放置析晶，抽濾精制黃芩苷由于上節課得到的黃芩苷結晶太少，回流這一步就暫時不做。鑒鑒 定定1.1.顯色反應顯色反應鹽酸鎂粉

6、反應：取樣品少許，加稀乙醇熱溶，加鎂粉少許，滴加濃鹽酸數滴，觀察溶液顏色的變化。 三氯化鐵反應：取樣品少許，溶于水或乙醇中，加1%三氯化鐵醇溶液一滴，觀察溶液顏色的變化。Molish反應：取樣品少許置于試管中，加0.5 ml 乙醇溶解，再加入1%-萘酚溶液數滴；然后沿管壁加入濃鹽酸約0.5ml，觀察兩溶液界面處顏色的變化。ABC上節課的黃芩苷結晶2.色譜鑒定（1 1）樣品的制備（黃芩苷的水解）：樣品的制備（黃芩苷的水解）： 精密稱取黃芩苷約0.5g，置干燥25ml錐形瓶中，加入濃硫酸3ml，用玻棒攪拌均勻，滴加蒸餾水約2ml使黃芩苷溶解，得透明橙紅色溶液。水浴加熱15min左右，放冷。將此溶液

7、在攪拌下傾入20ml冰水中，析出黃色沉淀，抽濾并用水洗滌至無酸性反應，干燥。 水解所得黃色沉淀，用氯仿反復提取，合并氯仿溶液，濃縮回收氯仿至干，殘留物再用甲醇重結晶得黃色針晶，為黃芩素，供苷元的鑒定。(不做) 濾去苷元后的水溶液，加固體碳酸鋇使水溶液至中性，濾去碳酸鋇沉淀。濾液濃縮至23ml，供糖的鑒定。酚羥基的酚羥基的鑒別鑒別10 mL左右左右2 2個點個點樣品：水解所得糖的溶液。對照品：葡萄糖醛酸展開劑：正丁醇-醋酸-水（4:1:5，上層）顯色劑：苯胺-鄰苯二甲酸試液于105烘10min，顯色。（2）糖的紙色譜鑒定黃芩苷的聚酰胺薄層色譜鑒定 樣品：自制黃芩苷的乙醇溶液 對照品：黃芩苷對照品的乙醇溶液 展開劑：冰乙酸（610 mL） 顯色劑：2%的三氯