1、【實 驗】葉綠體中色素的提取和分離葉綠體中色素的提取和分離 主講人：趙午平主講人：趙午平 色素的提取和分離實驗一、實驗目的v 進行綠葉中色素的提取和分離v 探究綠葉中含有色素種類數目和顏色v 培養合作和嚴謹的科學精神 色素的提取和分離實驗二、實驗原理v提取提取：葉綠體色素易溶于無水乙醇（酒精、汽油、苯、石油醚等）等有機溶劑中，可以用無水乙醇提取綠葉中的葉綠體色素。v分離分離：紙層析法 不同的葉綠體色素隨層析液在濾紙上擴散速度不同。不同的色素會在擴散過程中分離開來，形成條帶。 色素的提取和分離實驗三、實驗材料【實驗材料實驗材料】：新鮮新鮮菠菜綠葉菠菜綠葉【實驗藥品實驗藥品】：層析液（石油醚：丙酮

2、：苯層析液（石油醚：丙酮：苯=20:2:1=20:2:1），無水乙醇，），無水乙醇，SiOSiO2 2，碳酸鈣，碳酸鈣【實驗用具實驗用具】：研缽研缽，藥匙，紗布，小燒杯，量筒（，藥匙，紗布，小燒杯，量筒（1010mLmL），），玻璃漏斗，干燥濾紙玻璃漏斗，干燥濾紙， 剪刀，試管，毛細吸管，棉塞剪刀，試管，毛細吸管，棉塞, ,天平，天平，鉛筆鉛筆色素的提取和分離實驗提取葉綠體色素v取材取材：取新鮮菠菜葉取新鮮菠菜葉5g5g，撕去葉脈，盡量剪碎，放入研，撕去葉脈，盡量剪碎，放入研缽。缽。v研磨：研磨：向研缽中放入少量向研缽中放入少量石英砂石英砂和和碳酸鈣碳酸鈣（量約為藥匙（量約為藥匙的的1/31/

3、3），加入），加入1010mlml無水乙醇無水乙醇，充分、迅速地研磨至勻，充分、迅速地研磨至勻漿狀態。漿狀態。v過濾：過濾：在小燒杯上放上在小燒杯上放上4 4層紗布，將研磨液倒入小燒杯，層紗布，將研磨液倒入小燒杯，過濾制備得到濾液。過濾制備得到濾液。四、實驗步驟 實驗步驟實驗步驟1. 提取葉綠素提取葉綠素色素的提取和分離實驗v制備濾紙條制備濾紙條：將干燥的定性濾紙剪成長與寬略小將干燥的定性濾紙剪成長與寬略小于試管長與寬的濾紙條，將其一端剪去兩個角，于試管長與寬的濾紙條，將其一端剪去兩個角，并在距這一端并在距這一端1cm1cm處用鉛筆劃線。處用鉛筆劃線。v畫濾液細線畫濾液細線：用毛細吸管吸取少量

4、濾液，用毛細吸管吸取少量濾液，沿鉛筆沿鉛筆線均勻畫出細線線均勻畫出細線（細而齊）（細而齊）。待濾液干后，。待濾液干后，重復重復畫線畫線3-43-4次次。分離葉綠體色素四、實驗步驟色素的提取和分離實驗v固定裝置：固定裝置：將適量的層析液倒入試管中，將適量的層析液倒入試管中，將畫好線的濾紙條將畫好線的濾紙條插入層析液中插入層析液中，用棉，用棉塞塞塞緊試管口塞緊試管口。v觀察現象觀察現象：10min10min后，將濾紙條取出，風干。后，將濾紙條取出，風干。觀察色素帶及其顏色，作好記錄。觀察色素帶及其顏色，作好記錄。分離葉綠體色素四、實驗步驟1 1、選材時應注意選擇、選材時應注意選擇鮮嫩、色濃綠、無漿

5、鮮嫩、色濃綠、無漿汁汁的菠菜葉片。的菠菜葉片。2 2、研磨要、研磨要快快，收集的濾液要用，收集的濾液要用棉塞塞住棉塞塞住，層析時要加蓋，盡量減少有機溶劑的揮層析時要加蓋，盡量減少有機溶劑的揮發。（無水乙醇和層析液都易揮發、易發。（無水乙醇和層析液都易揮發、易燃且有一定毒性）燃且有一定毒性）3 3、每次點樣前要把燒杯中的濾液、每次點樣前要把燒杯中的濾液搖勻搖勻。五、注意事項色素的提取和分離實驗五、注意事項4 4、盡量避免手上的雜質沾到濾紙條上。、盡量避免手上的雜質沾到濾紙條上。5 5、實驗時保持、實驗時保持通風，安全通風，安全操作操作6 6、實驗注重團隊、實驗注重團隊合作合作，組員們共同完成實驗。，組員們共同完成實驗。六、實驗結果葉綠素的提取與分離七、實驗總結最寬（最多）：葉綠素最寬（最多）：葉綠素a最窄（最少）：胡蘿卜素最窄（最少）：胡蘿卜素相鄰距離最近：葉綠相鄰距離最近：葉綠素素a和葉綠素和葉綠素b色素在濾紙上自上而下分色素在濾紙上自上而下分布依次為：胡蘿卜素、葉布依次為：胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素黃素、葉綠素a、葉綠素、葉綠素b 葉綠體中的色素能夠在濾紙上彼此分離的原因是（ ）A色素提取液中色素已經分層B陽光的照射使不同色素彼此分開C乙醇有使色素溶解并彼此分離的特性D各種色素在濾紙上隨層析液擴散的速度不同八、課堂反饋D聚焦高考（2012上