1、注：這個范本是根據師兄留下的遺產修改而成，基本了概括整個實驗的流程，為了大家不要雷同，所以只寫了標題，但是還是有一些小步驟沒有記錄進去，如油鏡的使用，但是這些我們之前都學過了，所以有所取舍吧。大家認真看看吧。里面可能編號有點不合理或者什么的，請大家根據自己情況修改，不用寫電子報告的實驗的同學，也請按照這份報告寫在紙質版的報告冊上，如果發現問題，第一時間和遂和聯系。謝謝。膿汁和糞便標本中病原菌的檢測年級專業：學號：姓名： 1.實驗目的：（主要寫膿汁和糞便標本中病原菌的檢測，另外附加一些輔助實驗的目的，如了解并熟悉微生物實驗操作方法，實驗方法等等） 2.實驗器材：（還沒有寫完） 接種針、接種環、油

2、性筆、打火機、試管架3.實驗方法與步驟：3.1培養基的制備培養基制備的一般程序： 3.2空氣、手指皮膚的細菌學檢查3.3細菌的分離與培養：采用平板劃線分離法，取膿汁標本在普通平板表面劃線，取糞便標本在伊紅美藍固體培養基表面劃線，使之分散成單個細菌，在37培養1824h ，從而分離出單個菌落。3.4細菌的純培養：取膿汁標本在普通平板上的黃色、白色單菌落，糞便標本在伊紅美藍平板上的紫黑色、淡粉紅色單菌落接種在四個斜面培養基，標記，在37培養18h。3.5細菌的形態學檢查3.5.1革蘭染色法觀察細菌形態涂片 干燥 固定染色。涂片：取一玻片在玻片的左右兩側上加生理鹽水34ul，2滴，分別取黃色和紫黑菌

3、菌苔少許（1mm小菌落的半量）與左右兩側鹽水混勻，涂成1cm2。干燥：在空氣中放置至干燥。固定：在酒精燈上來回橫穿2到3次對其進行固定。染色：結晶紫 初染1分鐘水洗盧戈碘液媒染1分鐘水洗95乙醇脫色約20秒鐘水洗稀釋復紅復染1分鐘水洗吸干,鏡檢。3.5.2取另一玻片，取白色和粉紅色菌苔，操作與上述同。3.6細菌的生化試驗 3.6.1糖發酵試驗 用接種針分別挑少許紫黑和粉紅色的細菌接種到葡萄糖發酵管和乳糖發酵管中，在37下，培養24小時，觀察其產酸產氣情況。3.6.2細菌藥物敏感性試驗 接種環分別取黃、白、紫黑、粉紅色四種菌液36ul×2環，各自在四個平板上，作平板密集劃線接種細菌（紗

4、窗樣）。設計三點，三點之間等邊三角距離，點距離平皿邊緣約15mm。作標記：青、鏈、慶。鑷子火焰消毒，夾取相應的藥物紙片，平貼在已設定的位置上，按壓，最后鑷子火焰滅菌。371824小時培養，觀察結果。3.6.3血漿凝固酶試驗 取二滴兔血漿置于潔凈的玻片上，分別用接種環取白色和黃色菌苔(23個菌落的菌量)與血漿研磨混合，涂勻呈云霧狀，立即觀察結果。3.6.4半固體接種法 接種針斜面取四種不同顏色的細菌，各自接種進四個半固體培養基，從半固體培養基中心，垂直刺入，到達培養基底部4/5處，再循原來的路線，退出接種針。 在37下,培養24小時，觀察結果。3.6.5 痢疾血清玻片凝集反應 取載玻片1張，滴加

5、痢疾血清和生理鹽水各15ul，2滴。用接種環挑取少許紫黑色菌落和粉紅色菌落，各自與上述混合液液滴混勻，觀察結果。4.結果觀察，記錄，分析討論4.1結果觀察(注：凡是有實驗現象的都記錄下來，可以放圖片，最好和實驗記錄相對應，有怎樣的實驗觀察就有對應的實驗記錄)4.2實驗記錄（我只提供部分的記錄表格，也可以用文字記載，有一些需要大家自己作表格；另外，里面的表格有一些是附表，不是實驗記錄表）空氣的細菌學檢查 采樣時間(min)采樣地點菌落形成單位(CFU) 15 手指的細菌學檢查菌落抑菌圈直徑(mm)青霉素鏈霉素慶大霉素黃色菌落白色菌落紫黑菌落粉紅菌落藥敏試驗結果分析青霉素鏈霉素慶大霉素黃色細菌白色

6、細菌紫黑細菌粉紅細菌注：耐藥，中度敏感±，敏感。4.2.4常見腸道感染細菌主要生化反應特征葡萄糖乳糖半固體（動力）大腸埃希菌 +福氏志賀菌+-傷寒沙門菌+-+霍亂弧菌+-+幽門螺桿菌不分解糖類+變形桿菌 - +糖發酵、動力試驗結果判斷紫黑菌落粉紅色菌落葡萄糖乳糖半固體葡萄糖乳糖半固體分解糖產酸不產氣+；分解糖產酸又產氣；不分解糖-細菌有鞭毛+；細菌無鞭毛-腸道桿菌科各菌屬生化反應鑒別表葡萄糖乳糖麥芽糖甘露醇蔗糖半固體埃希菌屬 - 志賀菌屬+/-/+-沙門菌屬/+-霍亂弧菌+-+變桿菌屬-+產酸或陽性， 產酸產氣，-陰性， +/-多數陽性， -/+多數陰性， 不確定。血漿凝固酶實驗記錄痢疾血清實驗記錄由上述實驗結果可得膿汁和糞便標本細菌檢測結果如下表：標本菌落形態血漿 凝固酶葡萄糖乳糖半固體培養基