1、基因工程重點馬春玲2011年11月選擇（3030分）分） 名詞解釋（3030分）分） 簡答（4040分）分） 緒論（緒論（0-5分）分）1、基因工程的概念2、基因工程誕生理論三大發現 和技術的三大發明3、基因工程的基本過程第二章第二章 基因工程工具酶（基因工程工具酶（10-20分）分）1、工具酶定義2、限制性核酸內切酶 限制和修飾作用， 基因工程中，受體菌株的表型 定義 類型 命名 基本特性（識別序列、切割方式）3、連接酶 定義 連接條件 種類4、DNA聚合酶定義分類、來源大腸桿菌DNA聚合酶I：基本性質、基本用途Klenow酶：基本性質、基本用途T4-DNA聚合酶：基本性質、基本用途T7-D

2、NA聚合酶：基本性質、基本用途反轉錄酶：基本性質、基本用途Taq DNA聚合酶：基本性質、基本用途 5、末端脫氧核苷酰轉移酶：定義、 基本性質、基本用途6、核酸酶：定義、分類 核糖核酸酶A、核糖核酸酶H：特點 脫氧核糖核酸酶I ：特點、基本用途 S1核酸酶：基本特性7、堿性磷酸酶：基本用途 第三章第三章 基因工程載體基因工程載體(10-20(10-20分分) ) 1、基因工程載體的定義、功能、應具備的條件2、質粒載體:質粒載體定義、組成元件；質粒特性，理想質粒載體的必備條件常用的質粒載體類型（各類型定義）pBR322 pUC18/193、噬菌體載體 - DNA載體載體：構建、特點4、柯斯質粒

3、（定義）5、人工染色體（定義）第四章第四章 核酸操作的基本技術核酸操作的基本技術(10分分)1、核酸提取技術基本原理基因組DNA提取、質粒提取、RNA提取基本原理2、核酸的檢測與保存DNA/RNA的質量鑒定方法電泳指示劑和DNA染色劑：類型、作用4、核酸雜交技術定義類型：各種類型特點雜交三要素探針：定義、分類、標記方法 3、凝膠電泳技術定義、原理、分類瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳:特點電泳指示劑和DNA染色劑：類型、作用第五章第五章 PCR技術技術(10分左右分左右)聚合酶鏈式反應PCR：定義PCR擴增原理PCR反應過程PCR反應體系PCR反應條件PCR技術的特點PCR的種類：了解反向P

4、CR、兼并PCR的原理和應用 第六章第六章 DNA文庫的構建和目的基因的文庫的構建和目的基因的篩選篩選(5-10分分) 1、基因文庫定義、組成、2、基因組DNA文庫：定義、基本程序3、cDNA文庫：定義、基本程序4、基因組DNA文庫與cDNA文庫的比較5、目的基因的獲得：未知核酸序列基因的獲得方法已知核酸序列基因的獲得方法 第七章第七章 DNA體外重組與基因轉移體外重組與基因轉移(5-10分左右分左右)1、DNA分子體外重組技術：定義、需要的工具酶2、連接類型3、受體細胞：定義、應具備的條件4、轉化：定義、原理、步驟5、轉染：定義、步驟6、高壓電穿孔轉化：原理、影響因素 第八章第八章 重組子的篩選與鑒定重組子的篩選與鑒定(10分左右分左右)1、轉化子、重組子、目的重組子：定義2、重組體篩選和鑒定方法：篩選方法的選擇與設計依據3各種篩選方法原理和步驟（掌握3種以上 ）第九章第九章 外源基因的表達外源基因的表達(10分左右分左右)1、基因表達定義2、外源基因通過表達產生目的蛋白的目的3、表達載體、表達系統：定義4、外源基因在原核細胞中表達具備條件5、表達載體的一般組成（基本基因元件及各個元件的主要功能）6、常用的大腸桿菌表達載體、常用的大腸桿菌表達載體7、提高外源基因在大腸桿菌中表、提高外源基因在大腸桿菌中表達效率的途徑達效率的途徑8、提高外源基因