1、黑龍江寶慶隆生物技術(shù)有限責(zé)任公司文件名稱色譜柱標準管理規(guī)程文件編號SMP-11-007版本號01拷貝號起草人起草日期口月日審核人審核日期口月日審核人審核日期口月日批準人批準日期口月日頒發(fā)部門質(zhì)量管理部執(zhí)行日期口月日分發(fā)部門中心化驗室1目的建立色譜柱標準管理規(guī)程，明確色譜柱的管理和操作方法及要求。2范圍適用于中心化驗室氣相色譜儀和液相色譜儀用的所有色譜柱。3責(zé)任者中心化驗室、質(zhì)量管理部、質(zhì)量受權(quán)人4職責(zé)中心化驗室副主任負責(zé)本標準管理規(guī)程的起草。中心化驗室主任負責(zé)本標準管理規(guī)程的審核。質(zhì)量管理部部長負責(zé)本標準管理規(guī)程的審核。質(zhì)量受權(quán)人負責(zé)本標準管理規(guī)程的批準。5內(nèi)容色譜柱的購入新色譜柱購入時，驗收

2、人檢查外包裝、封口和標簽是否完好，造冊登記，內(nèi)容包括：生產(chǎn)公司、品名、規(guī)格、編號、購進時間、啟用日期、柱內(nèi)保護溶液等。在包裝盒空白處貼上色譜柱專用標簽，標簽上填寫編號、購入日期、用途等，并在色譜柱上貼上簡單標簽,填寫色譜柱臺賬依規(guī)定放至特定位置。標簽格式色譜柱專用標簽格式詳見表1和表2。表1包裝盒標簽編號購入日期啟用日期保護液體用途表2色譜柱用標簽編號保護液體用途色譜柱編號口口皿口-jipon序號，按照色譜柱購入日期進行編號*1k色譜柱品牌的拼音首字母色譜柱種類例如：C18-Agilent-注釋：如果一天內(nèi)購入同一種類色譜柱多個，則在日期后編碼，例如：C18-Agilent-a、C18-Agi

3、lent-b。色譜柱存放和保養(yǎng)每啟用一根新色譜柱，在色譜柱上貼上標簽并注明啟用日期，啟用前依據(jù)柱子的使用說明（注射前潤濕程序、清洗程序和保養(yǎng)程序）對相關(guān)人員進行培訓(xùn)并記錄。色譜柱使用一段時間后，常遇到色譜柱被污染，柱效會有一定程度的下降，采用適當?shù)姆椒ǎň唧w參照柱子的使用說明）對色譜柱進行保護，可以延長色譜柱的使用壽命。如果必要，需進行樣品的預(yù)處理。溶解的樣品進樣前用濾膜過濾，以除去不溶物。流動相中如有不純物質(zhì)將影響柱效，所以溶劑盡量使用色譜級別的，至少是分析純級別，流動相使用前用微孔膜過濾。色譜柱分類存放，按不同柱分類，裝入對應(yīng)的包裝盒中。隨色譜柱說明書也貼上相應(yīng)的標簽放在文件夾中歸檔（歸于

4、檢驗室檔案柜中）保存。每根色譜柱每兩個月保養(yǎng)一次，特別是對于一些使用頻率少的色譜柱，因為放置時間長，容易干柱，每一次做好保養(yǎng)記錄同時記錄于色譜柱使用記錄。色譜柱使用柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動，以免柱床產(chǎn)生空隙。避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧４蠖鄶?shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2，盡量不超過該色譜柱的pH范圍。如

5、使用柱溫控制裝置時，應(yīng)注意在通人流動相后才能升溫。一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi)，需要對樣品進行預(yù)處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進行清洗時，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50ml75ml。保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在

6、柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗；另一種可能是大分子進人柱內(nèi)，使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。在完成分離分析工作之后，不應(yīng)立即停機，需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗，一般以上，以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。如果使用的流動相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意用純水“過渡”即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡；分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。由于品種對色譜柱有較強的選擇性，經(jīng)試驗摸索后，確定每個品種的專用色譜柱，貼上標簽，做到

7、專柱專用。延長柱子的壽命。每次使用完色譜柱后，填寫色譜柱使用記錄。對于確已失效的柱子，申請停用，填寫色譜柱停用記錄，不能隨意丟棄，專門存放。對于使用時間較長柱效降低的柱子，可把它用于檢測產(chǎn)品的中間體。色譜柱再生色譜柱使用一段時間后,常遇到柱子被污染,柱效會有一定程度的下降，采用適當?shù)姆椒▽ιV柱進行保護，可以延長色譜柱的使用壽命。保護柱（預(yù)柱）的使用：對于較昂貴的色譜柱，可以在柱前加一保護柱，防止樣品中雜質(zhì)污染分析柱，對于制備柱,因其進樣量大，使用保護柱尤為重要。再生處理包括正反兩種順序：硅膠柱（未鍵合）：正己烷-二氯甲烷-異丙醇。硅膠基質(zhì)非極性鍵合相（C18,C8,C4,C2,C1,PHEN

8、YL,CN,NHZ5%tK/5%乙月青（甲醇）一乙月青（甲醇）一THF（含蛋白7?染物）B從10%到90%的梯度，A=%TFA水溶液,B二%TFA乙月青溶液。硅膠基質(zhì)極性鍵合相（CN,NH2,DIOL等）：氯仿一異丙醇一二氯甲烷一庚烷。凝膠色譜柱（GPC/GFC等）：通常用稀的氫氧化鈉或非離子型去垢劑沖洗。建議清洗柱子的其他條件：溶劑體積：推薦使用柱體積的1020倍流速：推薦使用常規(guī)流速的1/5T2不同流動相轉(zhuǎn)換：推薦換相時濃度梯度由小到大6相關(guān)文件無7修訂歷史版本號修訂原因修訂內(nèi)容執(zhí)行日期011公司組織架構(gòu)改變2增加文件和記錄的適用性，規(guī)范性1各部門的名稱及職責(zé)改變2文件格式調(diào)整、內(nèi)容優(yōu)化年月日8附件附件1色譜柱臺賬編號及版本號：SMP-11-007-R01-01附件2色譜柱使用記錄編號及版本號：SMP-11-007-R02-01附件3色譜柱停用記錄編號及版本號：SMP-11-007-R03-01色譜柱臺賬頁碼：1/1接收日期啟用日期編號出廠編號生產(chǎn)廠家型號規(guī)格備注月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日月日附件2色譜柱使用記錄色譜柱類型:編號:品牌:型號:頁碼：1/1編號及版本號：SMP-11-007-R02-01使用日期檢品名