1、本章主要內容第一節 性能評價在臨床實驗室的應用范圍第二節 性能評價與驗證的基本方法第三節 室內與室間比對實驗n性能評價性能評價 n自行研究或開發了一個檢測方法，為了使方法的檢測結果符合臨床要求，必須對方法的性能作詳細而全面的實驗，這時的實驗是對性能的評價。 n通常是生產廠家完成 n性能驗證性能驗證 n對他人或廠商的評價資料中的幾個主要性能的證實。 n實驗室自己完成性能評價在臨床實驗室的應用范圍性能評價在臨床實驗室的應用范圍IFCC根據實驗方法的準確度與精密度的不同可以分為決定性方法、參考方法、決定性方法、參考方法、常規方法常規方法三級。 準確度增加準確度增加應用范圍增加應用范圍增加 不同方法的

2、關系不同方法的關系 參考物，也稱標準品或標準物質，是一類具有一種或多種成分、含量均勻確定的物質。 參考物用以校準儀器設備、評價測量方法或給其它物質賦值。 參考物的結果含量一般表示為： 標準值總不確定度 用于常規質量控制，用來控制患者標本的測定誤差。 質控物不能用于儀器的校準。決定性方法決定性方法用途：評價參考方法及一級標準品一級標準品一級標準品發展及評價參考方法，校準決定性方法及參考方法，為二級標準品定值參考方法參考方法為二級標準品及質控品定值，評價常規方法二級標準品二級標準品常規方法的標準品，為質控品定值常規方法常規方法臨床實驗室的常規定量分析 質控品質控品質量保證評價校準校準評價定值評價校

3、準定值各級分析方法與標準品的互相關系各級分析方法與標準品的互相關系測定結果測定控制 量值溯源的目的，是讓常規標本的檢測結果得到和參考系列相同的測量值。參考方法常規方法患者新鮮標本參考值結果常規測定結果結果一致一級參考校準測定得到三 量值溯源掌握幾個基本概念二級參考校準二、量值溯源的概念量值的溯源性 通過一條具有規定不確定度的不間斷的比較鏈，使測量結果或標準的值能夠與規定的參考標準，通常是與國家標準或國際標準聯系起來的特性。 現實問題是：是否可以讓常規的檢測系統，對患者標本的檢測，得到的測定值和參考實驗室相同的檢測量值。這就是通過一條連續（不間斷）的比較鏈在一定的誤差條件下，使患者標本檢測結果與

4、國家或國際的參考系統在參考實驗室，使用參考方法、參考品得到的結果聯系起來。為此，生產廠商必須對完成檢測涉及的檢測系統各要素（儀器、試劑、校準品、和操作程序）進行嚴格的標準化，來實現溯源性。 （廠家提供標準化的檢測系統）關于檢驗結果溯源的解釋 臨床檢驗標準化可以簡單理解為：為了實現臨床檢驗結果的溯源性，檢測系統的生產廠商和臨床實驗室的所有努力，進行有秩序的特定活動所制定并實施各項規則的過程為標準化。三、標準化檢驗要有規程，按規程去操作，檢驗要有規程，按規程去操作，操作要有記錄，記錄要有分析。操作要有記錄，記錄要有分析。標準化涉及的內容標準化涉及的內容n嚴格的質量管理；n訓練有素的人員；n良好的必

5、要設備和環境要求；n操作的每個步驟都有具體明確的操作規程；n有詳細記錄；n每個檢測項目都要有一個完整文件資料，證實分析性能、溯源性、操作要求、質量要求等。四、參考物的量值溯源了解大大小小 精密度是指同一樣本在一定條件下多次重復測得的一系列單次值之間的接近程度，是表示測定結果中隨機誤差大小的指標。 精密度一般以變異系數CV%表示 重復性試驗是評價精密度的常用方法。 返回節目錄返回節目錄 1 1系統誤差系統誤差： 由方法、儀器、試劑或操作的明顯恒定誤差引起，一系列測定值存在有相同傾向的偏差，表現有恒定系統誤差和比例系統誤差。其不準確度表示為絕對偏差和相對偏差 。特點：單向性，沒有隨機性，有一定的大

6、小和方向；找到原因，采取措施后可以基本消除。恒定系統誤差比例系統誤差比較方法試驗方法真值樣本均值測定值SERE四、準確度的評價評價方法準確度的常用試驗：1. 方法比較試驗2. 回收試驗3. 干擾試驗 （1）比較方法的選擇3. 試驗要點（2） 測定步驟從經驗上講，若b0.97，或b1.03，已有可能b和1之間有統計上顯著性差異。比較方法候選方法比例系統誤差恒定系統誤差美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）標準液量（）血清量（）標準液量（mlmlml加入濃度回收濃度100回收率接近100 分析不受基質影響。 無論在純溶液還是復雜的基質環境中，分析方法的反應能力是一樣的。（準確度不受影響）回收率明

7、顯偏離100 分析明顯受不同的基質影響。 在不同的基質環境下，分析方法的反應能力有明顯差異。（準確度受影響）回收率的理解： 精密度是指同一樣本在一定條件下多次重復測得的一系列單次值之間的接近程度，是表示測定結果中隨機誤差大小的指標。 精密度一般以變異系數CV%表示 重復性試驗是評價精密度的常用方法。4. 允許誤差和性能可接受方式 1988年美國通過了臨床實驗室修正法規CLIA88，該法規對檢驗項目規定了允許誤差，現成為許多國家和地區臨床檢驗的最低質量指標。我國也已在臨床檢驗中應用該質量指標，用來評估全國或省、市的室間質量評估成績，評估檢測系統性能可接受性。 檢測系統性能最重要的是不精密度和不準

8、確度。由重復實驗對方法的隨機誤差作出估計；用方法比較實驗得到被評價方法和比較方法結果的均值間偏倚。 醫生和患者不關心檢驗結果的誤差是不精密引起的還是由于不準確引起，重要的是它造成的后果有多大。所以判斷檢測系統或方法性能可否接受，是看總誤差的水平。 應用方法決定圖（MD圖）能以圖像的方式表達不精密度和不準確度與總允許誤差的比較。 二、如何畫方法性能決定圖（簡介）總允許誤差示意圖0.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.00.00.51.01.52.02.53.03.54.04.55.0允許不精密度（%）允許不準確度（%） 最終判斷可接受性將依據每個實驗室的情況和方法的具體

9、應用。 （1）具有不符要求性能的方法 不能用于常規。除非沒有其它方法可以替代。 （2）具有臨界性能的方法 若應用在極其穩定、極少有問題的高度控制的儀器系統上；或者由經嚴格訓練、經驗豐富的檢驗人員應用，他們很重視預防性保養，小心地監視儀器性能，熟練精通統計控制圖上指示的問題等，還是可以接受的。（固有性能差，要求外加誤差要非常小）（3）具有良好性能的方法 一般應是可接受的，但是仍然需要高度的預防性保養和每天質量控制，以確保常規性能。（4）具有優秀性能的方法 是最合適的，在不同總誤差指標和需要適當控制檢驗過程的操作特性間的關系，證實達到了最高要求的水平六、檢測限評價 可檢測的最低分析物濃度為檢測系統

10、的分析靈敏度或稱檢測限。 分析靈敏度：具有定性含義的 檢測低限 具有定量含義的 生物檢測限 功能靈敏度 如果空白響應量（吸光度）的波動服從正態分布規律，則95空白響應量：空白均值2s空白 待測樣品響應量只有超過空白均值2s空白才被認為樣品中有分析物99.7空白響應量：空白均值3s空白 待測樣品響應量只有超過空白均值3s空白才被認為樣品中有分析物(一) 檢測低限空白管的波動原因：試劑空白的穩定性，比色皿的一致性，比色計的穩定性，如：某如：某5 5g/Lg/L分析物的分析物的吸光度吸光度落在落在 檢測低限檢測低限 5g/L（定性）（定性）（低于（低于5 5g/Lg/L時其吸光度與空白吸光度有重疊，

11、無法分辨）時其吸光度與空白吸光度有重疊，無法分辨） 稍大于檢測低限的響應信號說明樣品內有分析物，但是，這時還不能正確報告定量結果。因為是單次測定。 對于這個接近檢測低限的樣品做多次重復測定，按照正態分布規律其響應值范圍應該是X2s或X3s，即有50測定結果會“無分析物”，有50的測定結果“有分析物”。 那么多少檢測響應量時才能較好地報告定量結果呢？XB-2sB XBXB+2sB(檢測低限）5050(二) 生物檢測限 對于多個接近檢測低限的樣品做多次重復測定，按照正態分布規律其響應值范圍應該是X2s或X3s，這些較均值小的值就有可能和檢測低限（空白響應量的上限）交叉。 因此，這些樣品檢測響應量的

12、95或99.7單次檢測響應量的最低值也應該比檢測低限大，從而保證樣品在任何情況下，單次檢測響應量都不是空白響應量，這些樣品具有的分析物濃度才可以定量的報告。空白空白均值均值XB+2sB 生物檢測低限的定義： 某樣品單次檢測可能具有的最小響應量剛大于檢測低限響應量，該樣品內含有的分析物濃度為生物檢測限。（可以定量報告結果的限值）(三) 功能靈敏度 以日間重復測定的CV為20時，對應的檢測限樣品具有的平均濃度作為檢測系統可定量報告的最低濃度。 需要多個檢測限濃度的樣品來做精密度試驗，從中選擇CV接近20的對應濃度，作為可定量報告的最低濃度值。分析物濃度越低，精密度實驗CV值越大。可報告范圍指可以報告的所有結果的范圍。 1. 分析測量范圍：沒有進行任何預處理（稀釋，濃縮等）的樣本，由方法儀器直接測出的結果范圍。 2. 臨床可報告范圍：對臨床診斷、治療有意義的待測物濃度范圍，可以通過稀釋、濃縮等方法擴大分析測量范圍。基本步驟5個樣品各測定4次，結果進行統計分析，檢驗有無稀釋變異，線