1、2010版版GMP培訓培訓潔凈環境監測的內容潔凈環境監測的內容 1、空氣潔凈度測試（懸浮粒子監測） 2、潔凈室內表面空氣中微生物測試 3、溫濕度測試 4、空氣壓差測試 5、風速和風量均勻度測量 6、潔凈室內空氣自凈時間測試 7、高效過濾器HEPA完整性測試相關術語相關術語潔凈室狀態 空態（as-built）： 潔凈室（區）在凈化空氣調節系統已安裝完畢且功能完備的情況下，但是沒有生產設備、原材料或人員的狀態。 靜態 (at-rest） 靜態a：潔凈室（區）在凈化空氣調節系統已安裝完畢且功能完備的情況下，生產工藝設備已安裝、潔凈室（區）內沒有生產人員的狀態。 靜態b：潔凈室（區）在生產操作全部結束

2、，生產操作人員撤離現場并經過20 min自凈后。 動態（operational）：潔凈室（區）已處于正常生產狀態，設備在指定的方式下進行，并且有指定的人員按照規范操作。相關術語相關術語氣流形式 單向流（unidirectional airflow）：沿單一方向呈平行流線并且與氣流方向垂直的斷面上風速均勻的氣流。與水平面垂直的叫垂直單向流（vertical unidirectional airflow ) ，與水平面平行的叫水平單向流（horizontal unidirectional airflow ）。 非單向流（non-unidirectional airflow）：具有多個通路循環特性或

3、氣流方向不平行的氣流。潔凈工作臺 （clean bench） 一種工作臺或者與之類似的一個封閉圍擋工作區。其特點是自身能夠供給經過過濾的空氣或氣體，按氣流形式分為垂直單向流工作臺、水平單向流工作臺等。相關術語相關術語 潔凈度 （cleanliness） 潔凈環境內單位體積空氣中含大于或等于某一粒徑懸浮粒子的統計數量來區分的潔凈程度。 懸浮粒子（airborne particle） 用于空氣潔凈度分級的空氣懸浮粒子尺寸范圍在0.1-1000 mm的固體和液體粒子。對于懸浮粒子計數測量儀，一個微粒球的面積或體積產生一個響應值，不同的響應值等價于不同的微粒直徑。相關術語相關術語菌落（colony f

4、orming units） 微生物培養后，由一個或幾個微生物繁殖而形成的微生物集落，簡稱CFU。浮游菌(airborne microbe) 按照標準（GBT 16293-2010）提及的方法收集懸浮在空氣中的活微生物粒子，通過專門的培養基，在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數。浮游菌濃度（airborne microbe concentration） 單位體積空氣中含浮游菌菌落數的多少，以計數濃度表示，單位是CFU/m3或CFU/L相關術語相關術語沉降菌（settling microbe） 用標準（ GBT 16294-2010 ）提及的方法收集空氣中的活微生物粒子，通過專門的培養基，在適宜的

5、生長條件下繁殖到可見的菌落數。沉降菌菌落數（settling microbe plate count） 規定時間內每個平板培養皿收集到空氣中沉降菌的數目，以CFU/皿表示。潔凈環境監測的法規依據潔凈環境監測的法規依據新版新版GMP對藥品生產環境的要求對藥品生產環境的要求 第四十六條 為降低污染和交叉污染的風險，廠房、生產設施和設備應當根據所生產藥品的特性、工藝流程及相應潔凈級別要求合理設計、布局和使用。 無菌藥品，附錄1 第三十八條 無菌藥品生產的潔凈區空氣凈化系統應當保持連續運行，維持相應的潔凈度級別。因故停機再次開啟空氣凈化系統，應當進行必要的測試以確認仍能達到規定的潔凈度級別要求。潔凈環

6、境監測的法規依據潔凈環境監測的法規依據新版新版GMP對藥品生產環境的要求對藥品生產環境的要求 無菌藥品生產級別潔凈環境監測的法規依據潔凈環境監測的法規依據新版新版GMP對藥品生產環境的要求對藥品生產環境的要求 潔凈區微生物監測的動態標準潔凈環境監測的法規依據潔凈環境監測的法規依據溫濕度、換氣、氣流組織溫濕度、換氣、氣流組織 第四十二條 廠房應有適當的照明、溫度、濕度和通風，確保生產和貯存的產品質量以及相關設備性能不會直接或間接地受到影響。 第四十八條 應當根據藥品品種、生產操作要求及外部環境狀況等配置空調凈化系統，使生產區有效通風，并有溫度、濕度控制和空氣凈化過濾，保證藥品的生產環境符合要求。

7、 潔凈區與非潔凈區之間、不同級別潔凈區之間的壓差應不低于10帕斯卡。必要時，相同潔凈度級別的不同功能區域（操作間）之間也應保持適當的壓差梯度。潔凈環境監測的法規依據潔凈環境監測的法規依據溫濕度、換氣、氣流組織溫濕度、換氣、氣流組織 第四十八條 口服液體和固體制劑、腔道用藥（含直腸用藥）、表皮外用藥品等非無菌制劑生產的暴露工序區域及其直接接觸藥品的包裝材料最終處理的暴露工序區域，應當參照應當參照“無菌藥品無菌藥品”附錄中附錄中D級潔凈區的級潔凈區的要求設置要求設置，企業可根據產品的標準和特性對該區域采企業可根據產品的標準和特性對該區域采取適當的微生物監控措施取適當的微生物監控措施。 潔凈環境監測

8、的法規依據潔凈環境監測的法規依據溫濕度、換氣、氣流組織溫濕度、換氣、氣流組織 第五十三條 產塵操作間（如干燥物料或產品的取樣、稱量、混合、包裝等操作間）應保持相對負壓或采取專門的措施，防止粉塵擴散、避免交叉污染并便于清潔。 第一百九十條 在干燥物料或產品，尤其是高活性、高毒性或高致敏性物料或產品的生產過程中，應采取特殊措施，防止粉塵的產生和擴散。潔凈環境監測的法規依據潔凈環境監測的法規依據溫濕度、換氣、氣流組織溫濕度、換氣、氣流組織 第一百九十七條 生產過程中應盡可能采取措施，防止污染和交叉污染，如設置必要的氣鎖間和排風；空氣潔凈度級別不同的區域應有壓差控制；應降低未經處理或未經充分處理的空氣

9、再次進入生產區導致污染的風險。潔凈室的控制參數潔凈室的控制參數1 懸浮離子和微生物懸浮離子和微生物：主要影響產品純度、交叉污染和無菌程度。2 溫度和相對濕度溫度和相對濕度：主要影響產品工藝條件和細菌的繁殖條件、由操作舒適度帶來的對產品質量的影響。3 換氣次數換氣次數：影響潔凈度和人員舒適度。4 工作面截面風速工作面截面風速：影響潔凈度和人員舒適度。5 靜壓差靜壓差：影響潔凈度。6 照度照度：影響產品的工藝條件。7 噪聲噪聲：影響人員舒適度。8 新風量新風量：影響人員舒適度。9 自凈時間自凈時間：代表系統的“ 恢復能力”。測試指標測試指標 溫度和相對濕度的測試。潔凈室（區）的溫度和濕度應與其生產

10、及工藝要求相適應（無特殊要求時，溫度在18-26，相對濕度在45-65%為宜）。 靜壓差的測試。潔凈室與非潔凈室之間的靜壓差應大于10 Pa；相鄰不同潔凈級別的潔凈室之間的壓差應大于5 Pa；潔凈區與室外壓差應大于12 Pa。 風量、風速的測試 a) 非單向流潔凈室系統的各項實測風量及換氣次數應大于各自的設計風量或換氣次數，但不應超過20%；室內各風口的風量與各風口設計風量之差均不應超過設計風量的15%。 b) 單向流凈室實測室內平均風速應大于設計風速，但不應超過15%。懸浮粒子測試方法懸浮粒子測試方法 在空態或靜態測試時，懸浮粒子采樣點數目及其布置應力求均勻，并不得少于最少采樣點數目；在動態

11、測試時，懸浮粒子采樣點數目及其布置應根據產品的生產及工藝關鍵操作區設置。 1 1 采樣次數的限定采樣次數的限定 對任何小潔凈室（區）或局部空氣凈化區域，采樣點數目不得少于2個，總采樣點次數不得少于5次。每個采樣點的采樣次數可以多于1次，且不同采樣點的采樣次數可以不同。 懸浮粒子測試方法懸浮粒子測試方法2 采樣點位置采樣點位置 a) 采樣點一般在離地面0.8 m高度的水平面上均勻布置。 b) 采樣點多于5點時，也可以在離地面0.8-1.5 m高度的區域內分層布置，但每層不少于5點。懸浮粒子測試方法懸浮粒子測試方法3 采樣注意事項采樣注意事項 a) 對于單向流潔凈室（區），粒子計數器的采樣管口應正

12、對氣流方向；對于非單向流潔凈室（區），粒子計數器的采樣管口宜向上。 b) 布置采樣點時，應盡量避開回風口。 c) 采樣時，測試人員應在采樣口的下風側，并盡量少活動。 d) 采樣完畢后，宜對粒子計數器進行自凈。 e) 應采取一切措施防止采樣過程的污染。懸浮粒子測試方法懸浮粒子測試方法4 測試狀態測試狀態 a) 空態、靜態和動態三種狀態均可進行測試。 b) 空態或靜態時，室內測試人員不得多于2人。5 測試時間測試時間 a) 在靜態測試時，對單向流潔凈室（區），測試宜在生產操作人員撤離現場并經過10 min自凈后開始；對非單向流潔凈室（區），測試宜在生產操作人員撤離現場并經過20 min自凈后開始；

13、 b) 在動態測試時，則須記錄生產開始的時間以及測試時間。懸浮粒子測試方法懸浮粒子測試方法6 采樣采樣 按照粒子計數器的操作規程，選擇合適的粒徑、采樣量、采樣時間及每個采樣點的采樣次數進行采樣。7 結果計算結果計算 a）計算每個采樣點的平均懸浮粒子濃度（粒/m3） b）計算潔凈室的平均粒子濃度（粒/m3） c）計算標準差SE8 結果評定結果評定 判斷懸浮粒子的潔凈度級別應同時滿足以下兩個條件： a) 每個采樣點的平均懸浮粒子濃度必須不大于規定的級別界限； b) 全部采樣點才懸浮粒子濃度平均值均值的95%置信上限必須不大于規定的級別界限。浮游菌測試方法浮游菌測試方法1 最少采樣點數目最少采樣點數

14、目 參照懸浮粒子測試方法。2 采樣點的位置采樣點的位置 參照懸浮粒子測試方法。3 采樣次數采樣次數 每個采樣點一般采樣一次。4 采樣量采樣量 最小采樣量潔凈度級別采樣量 L/次100100010 000500100 000100300 0001005 采樣注意事項采樣注意事項 a) 對于單向流潔凈室（區）或送風口，采樣器采樣口朝向應正對氣流方向；對于非單向流潔凈室（區），采樣口向上。 b) 布置采樣點時，應盡量避開塵粒較集中的回風口。 c) 采樣時，測試人員應在采樣口的下風側，并盡量少活動。 d) 應采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。 e) 培養皿在用于檢測時，為避免培養皿

15、運輸或搬運過程造成的影響，宜同時進行陰性對照試驗，每次或每個區域取1個對照皿，與采樣皿同法操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養皿一起放入培養箱內培養，結果應無菌落生長。6 測試狀態（測試狀態（參照懸浮粒子測試方法）7 測試時間（測試時間（參照懸浮粒子測試方法）浮游菌測試方法浮游菌測試方法浮游菌測試方法浮游菌測試方法8 采樣及培養采樣及培養 按照浮游菌采樣器的操作規程進行采樣。全部采樣結束后，將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。采用大豆酪蛋白瓊脂培養基（TSA）配置的培養基經采樣后，在30-35培養箱中培養，時間不少于2 d；采用沙氏培養基（SDA）配置的培養基經采樣后，在20-25培養箱中培養，

16、時間不少于5 d。9 結果觀察及計算結果觀察及計算 用計數方法得出各個培養皿的菌落數，并計算出每個測點的浮游菌平均濃度（CFU/m3或CFU/L ）。浮游菌測試方法浮游菌測試方法潔凈度級別藥品生產質量管理規范CFU/m3100510 000100100 000500300 0001000潔凈室（區）浮游菌技術要求潔凈室（區）浮游菌技術要求沉降菌測試方法沉降菌測試方法1 1 最少采樣點數目（最少采樣點數目（參照懸浮粒子測試方法） 2 2 采樣點的位置（采樣點的位置（參照懸浮粒子測試方法）3 3 采樣次數（采樣次數（參照懸浮粒子測試方法）4 4 最少培養皿數最少培養皿數 在滿足最少采樣點數目的同時

17、，還宜滿足最少培養皿數。最少培養皿數潔凈度級別最少培養皿數1001410 0002100 0002300 00025 5 采樣注意事項（采樣注意事項（參照懸浮粒子測試方法）沉降菌測試方法沉降菌測試方法6 6 測試狀態（測試狀態（參照懸浮粒子測試方法）7 7 測試時間（測試時間（參照懸浮粒子測試方法）8 8 采樣及培養采樣及培養 將已制備好的培養皿按采樣點布置圖逐個放置，然后從里到外逐個打開培養皿蓋，使培養基暴露在空氣中。靜態測試時，培養皿暴露時間為30 min以上；動態測試時，培養皿暴露時間為不大于4 h。全部采樣結束后，將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。培養方法同浮游菌測試培養方法。9 9 結

18、果觀察及計算結果觀察及計算 用計數方法得出各個培養皿的菌落數，并計算出每個測點的沉降菌平均菌落數（CFU/皿）。沉降菌測試方法沉降菌測試方法潔凈室（區）沉降菌技術要求潔凈室（區）沉降菌技術要求潔凈度級別藥品生產質量管理規范CFU/皿，0.5 h1001-10 0003100 00010潔凈區控制微粒污染的途徑潔凈區控制微粒污染的途徑 控制微粒污染的途徑主要為三個方面： A A：有效地阻止室外的污染侵入室內（或防止室內污染逸出室外，如青霉素） 最主要途徑：空氣凈化處理的方法室內的壓力等； B B：迅速有效地排除室內已經發生的污染； 最主要途徑：氣流組織； C C：控制污染源，減少污染發生量潔凈區

19、控制微粒污染的途徑潔凈區控制微粒污染的途徑 上述三項都與凈化系統的風量（風速）或換氣次數有關。在較好的氣流組織下，足夠的凈化送風量不僅能保證潔凈室的正壓，同時對潔凈系統的自凈時間影響很大（JGJ7190）。而自凈時間將直接影響潔凈室的動態性能（即實用性）。 最主要途徑：涉及發生污染的設備和裝置的管理和進入潔凈室的人與物的凈化換氣次數和風速換氣次數和風速換氣次數和風速換氣次數和風速 （可能存在的問題）可能存在的問題） 換氣次數如果只講風速的話，將無法對潔凈廠房進行評價。設想如果在廠房內只安裝了一個面積很小的過濾器，然而只需要很少的風量通過，就會在風口產生一定的風速，然而無論多大的廠房只要有這一點

20、風速就可以算潔凈區的話很不合理。因為風速體現的是風量和面積（過濾器的面積）的流速關系，而換氣次數體現的是風量和體積（廠房體積）的倍數關系，也就是說體現了整個潔凈室內每小時潔凈空氣輪換的次數。空氣壓差空氣壓差空氣壓差的監測空氣壓差的監測空空 氣氣 壓壓 差差從理論上講，壓差有二個作用： A A：在門窗關閉的情況下，防止潔凈室外的污染由縫隙摻入潔凈室內； B B：在門開啟時，保證有足夠的氣流向外流動，盡量削減由開門動作和人的進入瞬時帶進來的氣流量，并在以后門開啟狀態下，保證氣流方向是向外的，以便把帶入的污染減小到最低程度。 壓差的測試：壓差的測試：應在所有的門都關閉的條件下，由高壓向低壓、由平面布

21、置上與外界最遠的里間房間開始，依次向外測試；有孔洞相通的不同等級相鄰的潔凈室（區），其洞口處宜有合理的氣流流向等。潔凈室自凈時間潔凈室自凈時間 有的廠房自凈能力很差，污染后會長時間的靜不下來。一般原因是風量不夠、壓差相反、氣流形式差等原因。其實自凈能力是衡量凈化系統好壞的一項重要指標。自凈能力強的廠房，動態狀況就比較好，并且最具有實用性。 自凈時間：自凈時間表明了潔凈室的“恢復能力”。潔凈室自凈時間潔凈室自凈時間 一般單向流潔凈室的自凈時間為10min以內比較好，而非單向流潔凈室的自凈時間則應不大于30min。 本項測定必須在潔凈室停止運行相當時間，室內含塵濃度已接近大氣塵濃度時進行。先測出潔

22、凈室室內懸浮粒子濃度，立即開機運行，定時讀數直到室內懸浮粒子濃度達到最低限度為止，這段時間即為自凈時間。自凈時間代表了凈化系統對污染源的稀釋或消除能力。溫度與相對濕度溫度與相對濕度 主要影響產品工藝條件和細菌的繁殖條件、由操作舒適度帶來的對產品質量的影響 可能存在的問題： 因為溫濕度對風速風量、潔凈度、微生物都有一定的影響，特別是對潔凈度和微生物的影響，所以也要引起足夠的重視。（比如溫度升高塵埃粒子運動速度加快，如果濕度增加塵粒自重就增加，比較容易消除塵粒，但有利細菌生長、繁衍，微生物污染的風險顯著增大，還會產生靜電問題，可能使灰塵吸附在金屬表面。濕度降低塵粒還會更容易揚起。）數據分析中可能發

23、生的問題數據分析中可能發生的問題檢測項目不全塵粒最大允許數塵粒最大允許數的檢測未按兩種粒徑同時檢測換氣次數換氣次數檢測時以截面風速代替靜壓差靜壓差檢測未注明相對位置塵粒最大允許數塵粒最大允許數的檢測評價中缺少95置信上限值檢測結果的評價檢測結果的評價檢測數據的采集 溫度、相對濕度：采用溫度、濕度計在潔凈室中心位置，系統至少穩定運行一段時間后讀出數值并記錄 靜壓差：采用微壓差計，在系統風量平衡，運行穩定時測量，測量時所有的門應該關閉。檢測結果的評價檢測結果的評價 換氣次數：換氣次數由送風量換算而得。 對于非單向流潔凈室，使用風量表直接測量，直接讀出送風量值（m3/h），并根據各潔凈室送風量值(m

24、3/h)換算出換氣次數。也可用風速儀測量，測點數不應少于10點，按平均風速計算送風量值，然后換算出換氣次數。 層流風速：采用風速儀，在工作面上測量，讀出數值，算出平均值。檢測結果的評價檢測結果的評價 塵粒最大允許數：現場檢測人員：2人，測點高度距地面0.8米，測點布置按 GB/T 16292，一般為均勻布置，多于5點可以分層；每測點采樣次數不少于12次。 數據計算 結果評價檢測結果的評價檢測結果的評價 浮游菌：現場檢測人員：2人，測點高度距地面0.8米，測點布置按GB/T16293標準，一般為均勻布置，多于5點可以分層；每測點采樣次數不少于1次。經3035培養不小于48小時后計數。 沉降菌：現

25、場檢測人員：2人，測點高度距地面0.81.5米，測點布置按GB/T16294標準，一般為均勻布置，多于5點可以分層；每測點采樣次數不少于1次。經3035培養不小于48小時后計數。可考慮真菌的測試（沙堡勞氏瓊脂）。檢測結果的評價檢測結果的評價 檢測數據經過整理后，可以與標準值比較后得出結論。 檢測時應做好記錄，記錄應包含足夠的信息。 標題、記錄的唯一性標識（如編號等）、工序或潔凈室名稱、檢測日期、采用標準、采用儀器名稱及編號、檢測項目、檢測數據及其計算、簽名等。48環境監測方案潔潔凈凈區區監監測測年度潔凈級年度潔凈級別確認別確認日常環境監測日常環境監測動態監測動態監測靜態監測靜態監測無菌生產區無

26、菌生產區A/B最終滅菌最終滅菌C級的主要級的主要功能間功能間C級區域級區域D級區域級區域潔凈環境監控整體要求（一）潔凈環境監控整體要求（一）監控區監控區（潔凈度級別）監控頻率監控頻率監控項目監控項目最終滅菌產品生產區域稱量配料、配液（C級區）每周一次空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌1表面微生物灌封間（C/A級區）每周兩次空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌1表面微生物操作者手套表面微生物軋蓋間、洗塞間（C/A級區）每周一次空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌1表面微生物操作者手套表面微生物容器精洗區（D級區）兩周一次空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌1表面微生物1.每月一次潔凈環境監控整體要求（

27、二）潔凈環境監控整體要求（二）監控區監控區（潔凈度級別）監控頻率監控頻率監控項目監控項目非最終滅菌產品生產區域稱量配料、配液（C/A級區）每周兩次空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌1表面微生物無菌灌封輔助區（C級區）每周兩次空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌1表面微生物無菌灌封間(B/A級區)每班一次每批一次空氣懸浮粒子空氣浮游菌空氣沉降菌表面微生物操作者手套和操作服表面微生物1.每月一次潔凈環境監控整體要求（三）潔凈環境監控整體要求（三）監控區監控區（潔凈度級別）監控頻率監控頻率監控項目監控項目取樣間(C/A級區)每周一次每次取樣空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌表面微生物微生物實驗室無菌實驗室(B/A級區)每次實驗空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌表面微生物操作者手套表面微生物限度檢查實驗室（C/A級區）每次實驗空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌1表面微生物操作者手套表面微生物抗生素效價測定室（D級區）每周一次空氣懸浮粒子1空氣浮游菌空氣沉降菌表面微生物1.每月一次潔凈區監測的位置潔凈區監測的位置取樣位置選擇時考慮因素：哪些部