1、第四章第四章 藥物定量分析與分析方法驗證藥物定量分析與分析方法驗證 第一節第一節 定量分析方法的分類與特點定量分析方法的分類與特點 第三節第三節 藥品質量標準分析方法驗證藥品質量標準分析方法驗證基本內容基本內容定量分析樣品的前處理方法定量分析樣品的前處理方法 第二節第二節基本要求基本要求 一、熟悉定量分析樣品的前處理方法一、熟悉定量分析樣品的前處理方法 二、明確二、明確定量分析方法的分類與特點定量分析方法的分類與特點 三、掌握定量分析方法驗證的內容三、掌握定量分析方法驗證的內容。第一節第一節 定量分析方法的定量分析方法的 特點特點n容量分析法容量分析法n光譜法光譜法n色譜法色譜法 一、容量分析

2、法一、容量分析法（一）容量分析法的特點（一）容量分析法的特點 容量分析法是將已知濃度的滴定液由容量分析法是將已知濃度的滴定液由滴定管滴加到待測藥物的溶液中，直到所滴定管滴加到待測藥物的溶液中，直到所加滴定液與被測藥物按加滴定液與被測藥物按化學計量反應完全化學計量反應完全為止，然后根據滴定液的濃度和消耗的體為止，然后根據滴定液的濃度和消耗的體積，就可以計算出被測藥物的含量。積，就可以計算出被測藥物的含量。 通常用于測定高含量和中含量組通常用于測定高含量和中含量組分，即被測組分的分，即被測組分的 含量在含量在1以上。以上。 容量分析法比較準確，一般相對容量分析法比較準確，一般相對誤差可達誤差可達0

3、.2以下。以下。 簡便、快速、準確簡便、快速、準確1.1.滴定度（滴定度（T T）的概念的概念 2. 2. 滴定度的計算滴定度的計算 （二）容量分析法的計算（二）容量分析法的計算3. 百分含量的計算百分含量的計算 （1）直接滴定法）直接滴定法 含量含量% = V F T/W 100% F = 實際標定的濃度實際標定的濃度/理論規定的濃度理論規定的濃度 （2）間接滴定法）間接滴定法 Sb5+ + 2KI Sb3+ + 2K+ + I2 I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6 H+生成物滴定法生成物滴定法例如例如 葡萄糖酸銻鈉的含量測定葡萄糖酸銻鈉的含量測定H+剩余滴定法剩余滴定

4、法含量含量% = （ TVF )加入加入 (TVF)剩余剩余 /W100% *兩個溶液的滴定度相同兩個溶液的滴定度相同這種情況下常需要做空白試驗進行校正：這種情況下常需要做空白試驗進行校正：含量含量% = （V 空白空白 V 剩余剩余) T F /W100%CCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥鈉例如：司可巴比妥鈉的含量測定例如：司可巴比妥鈉的含量測定 間接碘量法間接碘量法 做空白試驗做空白試驗 求滴定度？求滴定度？ 寫出含量計算式？寫出含量計算式？ 二、光譜分析法二、光譜分析法 （一）紫外（一）紫外- -可見分光光度法（可見分光光度法（200200nmnm76

5、0nm)760nm) 靈敏度高，可達靈敏度高，可達10-4g/ml 10-7g/ml 1. 特點特點 準確度高，準確度高，SRD（%）為為2% 5%5% 儀器價格低廉，操作簡單，易普及，應用儀器價格低廉，操作簡單，易普及，應用 范圍廣。范圍廣。 2. 2. 朗伯朗伯- -比耳定律（比耳定律（LambertBeer定律定律 ）：）： A = ECLA = ECL A = E CL A = E CL E E：吸收系數吸收系數 C:C:濃度（濃度（g/100mlg/100ml） L:L:液層厚度液層厚度要求供試品溶液的要求供試品溶液的A應在應在0.3 0.73、應應 用用 情情 況況定性鑒別：定性鑒

6、別： a.a.maxmax或或E E1%1%1cm 1cm b.b.A Amaxmax /A /Aminmin c.c.與標準品溶液的吸收光譜比與標準品溶液的吸收光譜比較較 純度檢查：純度檢查：在某波長，藥物無吸收，而在某波長，藥物無吸收，而 在某波長，藥物無吸收，而所在某波長，藥物無吸收，而所含雜質有吸收，可檢查某雜質的限含雜質有吸收，可檢查某雜質的限度。度。 如：腎上腺素中腎上腺銅的檢查如：腎上腺素中腎上腺銅的檢查腎上腺素腎上腺素 2 2mg/mg/mLmL 的的0.050.05mol/L mol/L HClHCl液液, ,310310nmnm處測得的處測得的A0.05,A0.05,腎上腺

7、銅的腎上腺銅的E=435 ,E=435 ,求其限量求其限量 L=腎上腺素的濃 度腎上腺銅的濃 度100%=腎素CElA100%=0.06% 對照品比較法：對照品比較法：C Cx x=(=(A Ax x/ /A Ar r) )C Cr r; ; 含量含量%=%=C Cx xD/WD/W100 %100 % 常用方法常用方法 吸收系數法：吸收系數法： 標準曲線法：如比色法標準曲線法：如比色法 計算分光光度法：數學分離法計算分光光度法：數學分離法 含量測定含量測定（二）熒光分析法（二）熒光分析法1 1、原理：物質在受到激發光（、原理：物質在受到激發光（exex）, ,照射后產生照射后產生 了較長波長

8、的熒光（了較長波長的熒光（emem）, ,當激發光強當激發光強 度、波長或所用溶劑溫度等條件固定時，度、波長或所用溶劑溫度等條件固定時， 物質在一定濃度范圍內，其熒光強度與溶物質在一定濃度范圍內，其熒光強度與溶 液中該物質的濃度成正比關系。液中該物質的濃度成正比關系。 靈敏度高，可達靈敏度高，可達10-10g/ml 10-12g/ml ； 在低濃度進行測定，防止熒光強度與在低濃度進行測定，防止熒光強度與C不不 成正比及自熄滅作用成正比及自熄滅作用 ；用基準物溶液校正；用基準物溶液校正 儀器靈敏度，防止樣品液熒光衰減；儀器靈敏度，防止樣品液熒光衰減； 2、特點、特點: 因靈敏度高，固干擾因素多，

9、必須做空白。因靈敏度高，固干擾因素多，必須做空白。 制備熒光衍生物，可提高其靈敏度和制備熒光衍生物，可提高其靈敏度和 選擇性。選擇性。 用樣品量少，操作簡單，方法快速，應用用樣品量少，操作簡單，方法快速，應用 范圍較廣。范圍較廣。 3、含量測定、含量測定 常用的方法對照品比較法常用的方法對照品比較法: Cx = (Rx-Rxb)/(Rr-Rrb) C Cs sC Cx x供試品溶液濃度供試品溶液濃度 ；C CR R對照品溶液濃度對照品溶液濃度；R Rx x供試品溶液熒光強度；供試品溶液熒光強度； R RXbXb供試品溶液試劑空供試品溶液試劑空白熒光強度；白熒光強度；R Rr r對照品溶液熒光強

10、度；對照品溶液熒光強度；R Rrbrb對對照品溶液試劑空白熒光強度。照品溶液試劑空白熒光強度。 Ch.P收載地高辛片、利血平片、洋地黃收載地高辛片、利血平片、洋地黃毒苷片毒苷片。 4 4、應、應 用用 鑒別：鑒別：exex和和emem 熒光激發光譜熒光激發光譜, , 發射光譜發射光譜 含量測定：含量測定：a.a.標準曲線法標準曲線法b.b.比例法（對照法）比例法（對照法） 標 空 白標標空 白樣FFFF=標樣CC 按分離原理分為：吸附；分配；離子交換；按分離原理分為：吸附；分配；離子交換；排阻色譜排阻色譜 按分離方法分為：按分離方法分為：PC；TLC；柱色譜；柱色譜；GC；HPLC三、色譜分析

11、法三、色譜分析法方法分類方法分類 （一）（一）HPLC法法 色譜柱的理論板數：色譜柱的理論板數： n=5.54(tR/Wh/2)2 2、系統性試驗、系統性試驗 分離度：分離度： R = 2（tR1 tR2)/(W1 + W2); 要大于要大于1.5 拖尾因子：拖尾因子： T = W0.05h/2d1 應在應在0.951.05 重復性：重復性： 連續進樣連續進樣5次，次，RSD不大于不大于2.0% 1、一般要求：色譜柱、流動相、一般要求：色譜柱、流動相重復性重復性 取各品種項下的對照溶液取各品種項下的對照溶液, ,連續進樣連續進樣5 5次次, ,除另有規定外除另有規定外, ,其峰面積測定值的相對

12、標其峰面積測定值的相對標準差應準差應2.0%2.0%SD=1)(nXXi RSD%=XSD100% 內標法加校正因子測定供試品中主成分含量內標法加校正因子測定供試品中主成分含量3. 測定方法測定方法 標準曲線法標準曲線法 外標法測定供試品中主成分含量外標法測定供試品中主成分含量 外標一點法外標一點法 應用示例：應用示例： RP-HPLC法測定鹽酸黃酮哌酯片含量，用標法測定鹽酸黃酮哌酯片含量，用標準曲線法準曲線法 如頭孢拉丁；頭孢羥氨芐；頭孢唑啉鈉用外標如頭孢拉丁；頭孢羥氨芐；頭孢唑啉鈉用外標一點法一點法常用反相常用反相 HPLC HPLC 色譜法色譜法 流動相：水、甲醇流動相：水、甲醇- -水

13、、乙腈水、乙腈- -水水固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠 （ODSODS或或C18C18）4 4、應用、應用 定性： 根據t tR R 含量測定：a、內標法 b、外標法 雜質檢查 1. 峰面積歸一化法峰面積歸一化法 2. 不加校正因子的主成分自身對照法不加校正因子的主成分自身對照法 （高低濃度對照法）（高低濃度對照法） 3. 加校正因子的內標法加校正因子的內標法 4. 外標法：測定雜質的濃度外標法：測定雜質的濃度 （二）（二）GC法法 1 1、一般要求（、一般要求（ChPChP 2010 2010）載氣：載氣：N N2 2色譜柱：填充柱色譜柱：填充柱 毛細管柱毛細管柱進

14、樣口溫度：高于柱溫進樣口溫度：高于柱溫30-5030-50進樣量：不大于數微升進樣量：不大于數微升檢測器：常用氫焰離子化檢測器（檢測器：常用氫焰離子化檢測器（FIDFID）檢測溫度一般高于柱溫檢測溫度一般高于柱溫, ,不得低于不得低于1 150,50,以以免水氣凝結免水氣凝結, ,常用常用250-350.250-350. 內標法加校正因子測定供試品中主成分含量內標法加校正因子測定供試品中主成分含量 2. 測定方法測定方法 標準曲線法標準曲線法 外標法測定供試品中主成分含量外標法測定供試品中主成分含量 外標一點法外標一點法 標準溶液加入法：標準溶液加入法： 供試品兩等份，其中一份供試品兩等份，其

15、中一份 加入對照品一定量，測定得兩張圖譜。加入對照品一定量，測定得兩張圖譜。 Ax加加/Ax=（Cx+Cx）/Cx 在相同背景下測定，誤差小在相同背景下測定，誤差小3 3、系統適用性試驗（、系統適用性試驗（ChPChP 2010 2010） 除另有規定，按除另有規定，按HPLCHPLC項下的規定項下的規定色譜柱的理論板數（色譜柱的理論板數（n n）n=5.54（2/1WtR）2=16（WtR）2 分離度（分離度（R R）R=2121)2WWttRR R1.5 拖尾因子拖尾因子T=105. 02dWh （T=0.951.05） 重復性重復性 取各品種項下的對照溶液取各品種項下的對照溶液, ,連續

16、進樣連續進樣5 5次次, ,除另有規定外除另有規定外, ,其峰面積測定值的相對標其峰面積測定值的相對標準差應準差應2.0%2.0%SD=1)(nXXi RSD%=XSD100% 4 4、應用、應用 定性：根據定性：根據t tR R含量測定：含量測定：a a內標法內標法 b b外標法外標法 c c標準溶液加入標準溶液加入法法 雜質檢查 1. 峰面積歸一化法峰面積歸一化法 2.內標法加校正因子測定法內標法加校正因子測定法 3. 外標法：測定雜質的濃度外標法：測定雜質的濃度 4. 標準溶液加入法標準溶液加入法: 是對外標法的改進是對外標法的改進 加入雜質的加入雜質的 對照品溶液對照品溶液目的：目的：

17、 是為了滿足所選分析方法對試樣的要求，是為了滿足所選分析方法對試樣的要求，使使 之處于可測定狀態。之處于可測定狀態。 第二節第二節 樣品分析的前處理方法樣品分析的前處理方法 1、一般情況下，原料藥選擇適當的溶劑溶解后，、一般情況下，原料藥選擇適當的溶劑溶解后， 即可以選擇相應的分析方法進行分析。即可以選擇相應的分析方法進行分析。 2、制劑，需要進行的前處理主要是要除去制劑敷、制劑，需要進行的前處理主要是要除去制劑敷 料以及共存的其他組分；或者使藥物溶解出來料以及共存的其他組分；或者使藥物溶解出來 （如軟膏制劑）（如軟膏制劑） 3、含金屬、含鹵素藥物的分析時，如果利用金屬、含金屬、含鹵素藥物的分

18、析時，如果利用金屬 和鹵素的特征進行分析，必須使該元素以無機和鹵素的特征進行分析，必須使該元素以無機 結合狀態存在，需要在測定前進行處理。本章結合狀態存在，需要在測定前進行處理。本章 的測定前處理僅涉及此部分內容。的測定前處理僅涉及此部分內容。 概述：概述：（一）含鹵素有機藥物（一）含鹵素有機藥物 系指藥物分子結構中所含鹵素直接與系指藥物分子結構中所含鹵素直接與芳環芳環或或脂肪鏈脂肪鏈相連者。相連者。* *不包括不包括某些有機藥物的某些有機藥物的鹵酸鹽或氫鹵酸鹽鹵酸鹽或氫鹵酸鹽 結構特點：結構特點：C CX X（二）（二）含金屬有機藥物含金屬有機藥物1、金屬原子不與碳原子直接相連，結合、金屬原

19、子不與碳原子直接相連，結合弱，通常為弱，通常為有機酸及酚的金屬鹽或配位有機酸及酚的金屬鹽或配位化合物化合物 。M-O2、金屬原子、金屬原子直接與碳原子以共價鍵相連直接與碳原子以共價鍵相連，結合比較牢固。結合比較牢固。M-C 以上的結合形式，有的結合力弱，以上的結合形式，有的結合力弱，不需要有機破壞既可以轉化為適合于不需要有機破壞既可以轉化為適合于分析的形式，有的結合力強，需要有分析的形式，有的結合力強，需要有機破壞才可以轉化為機破壞才可以轉化為適合于分析的形適合于分析的形式。式。 一）含金屬的有機藥物的結合形式一）含金屬的有機藥物的結合形式1、金屬離子不直接與、金屬離子不直接與C原子相連：原子

20、相連： 通常為有機酸或酚類的金屬鹽或配位化合通常為有機酸或酚類的金屬鹽或配位化合 物，常稱為物，常稱為含金屬的有機藥物；含金屬的有機藥物；*若有機結構部分不干擾測定，可若有機結構部分不干擾測定，可不經有機破壞不經有機破壞 直接在溶液中進行定性定量分析。直接在溶液中進行定性定量分析。 2、金屬離子直接與、金屬離子直接與C原子以共價鍵相連：原子以共價鍵相連： 稱為稱為有機金屬藥物，需有機金屬藥物，需經有機破壞經有機破壞使其轉使其轉 變成為無機鹽類后進行分析。變成為無機鹽類后進行分析。二）鹵原子的結合形式（活潑性）二）鹵原子的結合形式（活潑性）n鹵原子與碳原子直接相連鹵原子與碳原子直接相連n 鹵原子

21、的活潑性和它直接相連鹵原子的活潑性和它直接相連的烴基的結構有很大關系：的烴基的結構有很大關系：（1）乙烯型鹵和芳鹵：）乙烯型鹵和芳鹵： 不活潑不活潑CH2CH XX堿性溶液中加還原劑（如鋅粉）回流堿性溶液中加還原劑（如鋅粉）回流（2）烯丙型鹵和芐鹵：）烯丙型鹵和芐鹵： 活潑活潑CH2XCH2CH CH2X（3）鹵代烷型：）鹵代烷型： 介于兩者之間介于兩者之間 堿性溶液直接回流堿性溶液直接回流CH2CH (CH2)nX n22. 分子中所含鹵原子的個數分子中所含鹵原子的個數 分子中所含鹵原子的個數越多，活潑分子中所含鹵原子的個數越多，活潑性越強，特別是同一碳上含多個鹵原子或性越強，特別是同一碳上

22、含多個鹵原子或一個苯環上含多個鹵原子時，活潑性增強一個苯環上含多個鹵原子時，活潑性增強更加明顯。更加明顯。 含金屬或鹵素的有機藥物含金屬或鹵素的有機藥物 定量分析前的處理方法定量分析前的處理方法不經有機破壞的分析方法不經有機破壞的分析方法經有機破壞的分析方法經有機破壞的分析方法 一、不經有機破壞的分析方法一、不經有機破壞的分析方法1.1. 直接測定法直接測定法; ;2.2. 經水解后測定法經水解后測定法; ; 3.3. 經還原分解后測定法經還原分解后測定法 （一）直接測定法（一）直接測定法 適合于：適合于：金屬原子不直接與碳原子相連的金屬原子不直接與碳原子相連的含金屬藥物或某些含金屬藥物或某些

23、CM（金屬原子直接與（金屬原子直接與碳原子相連）鍵結合不牢固的有機金屬藥物。碳原子相連）鍵結合不牢固的有機金屬藥物。 在水溶液中可以電離，因而不需有機破壞，在水溶液中可以電離，因而不需有機破壞，可直接選用適當的方法進行測定。可直接選用適當的方法進行測定。1、 配位滴定法配位滴定法n本法利用金屬離子可與EDTA形成配合物，用EDTA滴定。n如明礬（如明礬（KAl(SO4)212H2O ）含量的測定）含量的測定的含量測定測定黃色恰變橙色標液滴加指示劑緩沖溶液加冷至室溫分鐘沸水浴稀釋加水標液準確加入克精稱明礬樣品mlVZnSOdXOpHNaAcHAcmlmlVEDTAS2412)6(10252、 氧

24、化還原滴定法n本法利用不同價態的金屬離子的氧化還原性，本法利用不同價態的金屬離子的氧化還原性，選用適當的滴定劑測定含量。選用適當的滴定劑測定含量。n利用藥物中可游離的金屬離子的氧化性測定利用藥物中可游離的金屬離子的氧化性測定含量含量n例例1 富馬酸亞鐵的含量測定富馬酸亞鐵的含量測定 溶于熱的稀硫酸后釋放出亞鐵離子，用鈰溶于熱的稀硫酸后釋放出亞鐵離子，用鈰量法測定量法測定n如如富馬酸亞鐵的含量測定富馬酸亞鐵的含量測定 取本品約取本品約0.3g，精密稱定，精密稱定，加稀硫酸加稀硫酸 15ml，加熱溶解后，加熱溶解后，放冷，加新沸過的冷水放冷，加新沸過的冷水50ml與鄰二氮菲指示液與鄰二氮菲指示液2

25、 滴，立即用硫酸鈰滴，立即用硫酸鈰滴定液滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結果用滴定，并將滴定的結果用空白試驗校正。每空白試驗校正。每1ml硫酸鈰滴定液硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當于相當于16.99mg 。 富馬酸亞鐵富馬酸亞鐵 CHCHCCOO0Fe原理原理Fe2+ + Ce4+ Ce3+ + Fe2+ NN3Fe2+ eNN3Fe3+紅色紅色淺藍色淺藍色OCCHOFeHCCOOOOCCHOHCCO+Fe2+例例2 葡萄糖酸銻鈉的含量測定葡萄糖酸銻鈉的含量測定 在酸性條件下加入碘化鉀，用硫代硫酸在酸性條件下加入碘化鉀，用硫代硫酸鈉滴定，碘量法測定鈉滴定，碘量法測定 Sb5+

26、+ 2KI Sb3+ + 2K+ + I2 I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6 H+（二）（二） 經水解后測定法經水解后測定法 1.堿水解后測定法堿水解后測定法 本法是將含鹵素有機藥物溶于適當溶劑（如本法是將含鹵素有機藥物溶于適當溶劑（如乙醇）中，加入氫氧化鈉溶液（或一定量過量的乙醇）中，加入氫氧化鈉溶液（或一定量過量的硝酸銀滴定液）后，加熱回流使其水解，將有機硝酸銀滴定液）后，加熱回流使其水解，將有機結合的鹵素轉變為無機的鹵素離子，然后采用銀結合的鹵素轉變為無機的鹵素離子，然后采用銀量法（量法（Volhard法）測定。法）測定。 本法適用于含鹵素有機藥物結構本法適用于含

27、鹵素有機藥物結構中鹵素中鹵素原子結合不牢固的藥物（如鹵原子結合不牢固的藥物（如鹵原子和脂肪碳原子相連者）。原子和脂肪碳原子相連者）。 原理原理 三氯叔丁醇在氫氧化鈉溶液中加熱回流三氯叔丁醇在氫氧化鈉溶液中加熱回流水解，氯元素全部轉變成氯化鈉，然后用剩余水解，氯元素全部轉變成氯化鈉，然后用剩余滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再加入定滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再加入定量過量的硝酸銀滴定液，使量過量的硝酸銀滴定液，使Cl-生成生成AgCl沉淀，沉淀，過量的硝酸銀，以過量的硝酸銀，以Fe3+為指示劑，用硫氰酸銨為指示劑，用硫氰酸銨液回滴定。液回滴定。 例例:三氯叔丁醇的測定三氯叔丁醇的測定CCl

28、3 C(CH3)2 OH + 4NaOH 回流回流(CH3)2 CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2ONaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCNAgSCN + NH4NO3（淡棕紅色）（淡棕紅色）(Ksp=1.561010 )(Ksp=1.010 12 )Fe3+ + SCN Fe (SCN) 2+ 2.用酸水解后測定法用酸水解后測定法 某些含金屬的有機藥物，用某些含金屬的有機藥物，用適當的酸性水溶液溶解并轉化為適當的酸性水溶液溶解并轉化為可溶性鹽，適合于分析。可溶性鹽，適合于分析。 如如硬脂酸鎂的測定硬脂酸鎂的測定 取本品約取本品約0.1g

29、，精密稱定，精密加硫酸滴精密稱定，精密加硫酸滴定液定液(0.05mol/L) 50ml，煮沸至油滴澄清，繼煮沸至油滴澄清，繼續加熱續加熱10min，放冷至室溫，加甲基橙指示液放冷至室溫，加甲基橙指示液12滴，用氫氧化鈉滴定液滴，用氫氧化鈉滴定液 ( 0.1 mol/L ) 滴定。每滴定。每1 ml 硫酸滴定液硫酸滴定液( 0.05mol/L )相當于相當于2.016mg的的MgO。原理：原理：Mg(C17 H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2 C17 H35COOH2NaOH + H2SO4 Na2SO4 + 2H2O 1、堿性條件下或、堿性條件下或酸性條件下酸性條件下還原后測

30、定還原后測定（三）經還原分解后測定（三）經還原分解后測定 本法是將含鹵素有機藥物在堿性條本法是將含鹵素有機藥物在堿性條件下或酸性條件下，加還原劑（如鋅件下或酸性條件下，加還原劑（如鋅粉）加熱回流，藥物產生粉）加熱回流，藥物產生還原裂解反還原裂解反應應，使有機結合的鹵素，使有機結合的鹵素轉變為無機的轉變為無機的鹵素離子鹵素離子，然后采用銀量法（，然后采用銀量法（Fajans法）法）測定。測定。 本法適用于有機藥物分子結構中本法適用于有機藥物分子結構中的碘與苯環或者雜環直接相連，結合的碘與苯環或者雜環直接相連，結合較為牢固。可以用此法較為牢固。可以用此法將有機結合狀將有機結合狀態的態的鹵鹵素轉化為

31、無機狀態，適合于分素轉化為無機狀態，適合于分析。析。 例如例如 泛影酸的測定泛影酸的測定 取本品約取本品約0.4g，精密稱定，精密稱定，加氫氧化鈉溶加氫氧化鈉溶液液30ml與鋅粉與鋅粉1.0g，加熱回流加熱回流30min，放冷，放冷，冷凝管用少量水洗滌，濾過，燒瓶與濾器用水冷凝管用少量水洗滌，濾過，燒瓶與濾器用水洗滌洗滌3次，每次次，每次15ml，洗液與濾液合并，加冰洗液與濾液合并，加冰醋酸醋酸5ml與曙紅鈉指示液與曙紅鈉指示液5滴，用硝酸銀滴定液滴，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當于相當于20.46mg的的C11H9 I

32、 3N2O4。COOHINHCOCH3IIH3COCHN+ 11NaOH + Zn回流回流COONaN H2 H2N+ 3NaI + 2CH3COONa+ 2Na2ZnO2 + H2O二、經有機破壞的分析方法二、經有機破壞的分析方法 適用于適用于金屬原子與碳原子結合牢固的有機金屬原子與碳原子結合牢固的有機金屬藥物金屬藥物,即采用上述方法難以將有機結合的待即采用上述方法難以將有機結合的待測原子轉變為可測定的無機離子（或氧化物、測原子轉變為可測定的無機離子（或氧化物、無氧酸等）的無氧酸等）的有機金屬藥物有機金屬藥物。包括：濕法破壞和干法破壞兩種。包括：濕法破壞和干法破壞兩種。(一一) 濕法破壞濕法

33、破壞即即酸破壞法。酸破壞法。依據所用試劑的不同依據所用試劑的不同（1）硝酸高氯酸法：）硝酸高氯酸法： 經破壞后得到的無機金屬離子一般成高價態。經破壞后得到的無機金屬離子一般成高價態。*此法破壞能力強，反應較劇烈，所以破壞時此法破壞能力強，反應較劇烈，所以破壞時 不能將溶液蒸干，以免發生爆炸。不能將溶液蒸干，以免發生爆炸。*本法不適合含氮雜環類有機物，破壞不完全。本法不適合含氮雜環類有機物，破壞不完全。*適合：生物樣品和含動植物藥制劑的破壞。適合：生物樣品和含動植物藥制劑的破壞。 （2 2）硝酸硫酸法：）硝酸硫酸法： 適合大多有機物質的破壞，無機離子均氧化成適合大多有機物質的破壞，無機離子均氧化

34、成高高價態。價態。 不適合能與硫酸形成不溶性鹽的金屬離子。不適合能與硫酸形成不溶性鹽的金屬離子。（3 3）硫酸硫酸鹽法：）硫酸硫酸鹽法： 常用的硫酸鹽：硫酸鉀或無水硫酸鈉。常用的硫酸鹽：硫酸鉀或無水硫酸鈉。加硫酸鹽的目的：提高硫酸的沸點，加硫酸鹽的目的：提高硫酸的沸點，增強硫酸的氧化增強硫酸的氧化 破壞能力破壞能力以使樣品破壞完全；以使樣品破壞完全； 防止硫酸在加熱過程中過早分解成防止硫酸在加熱過程中過早分解成SOSO2 2而損失。而損失。 *金屬離子以金屬離子以低低價態存在；價態存在； 常用于：含砷或銻的有機藥物的破壞常用于：含砷或銻的有機藥物的破壞As3+Sb 3+； 凱氏定氮法凱氏定氮法

35、氮測定法。氮測定法。 （4）其它濕法：其它濕法： 硝酸硝酸硫酸硫酸高氯酸法；高氯酸法； 硫酸硫酸氧化劑法（過氧化氫法、高錳氧化劑法（過氧化氫法、高錳 酸鉀）破壞后，金屬呈酸鉀）破壞后，金屬呈高高價態價態。 HNO3-H2SO4-HClO4法、法、 H2SO4-H2O2法、法、 H2SO4-KMnO4法。法。 分解劑分解劑 和和 氧化劑氧化劑 - 破壞共價鍵破壞共價鍵 應用實例：凱氏定氮法應用實例：凱氏定氮法用于蛋白質、氨基酸、含有氨基的藥物、含用于蛋白質、氨基酸、含有氨基的藥物、含有酰胺結構的藥物的含量測定有酰胺結構的藥物的含量測定常量法和半微量法常量法和半微量法1、消化、消化： 藥物置凱氏燒

36、瓶中，加入藥物置凱氏燒瓶中，加入硫酸、硫酸鉀，硫酸、硫酸鉀，有時還可以加入合適的催化劑如硫酸銅，有時還可以加入合適的催化劑如硫酸銅，加熱，加熱，是藥物中的有機結構氧化分解為二氧化碳和水，是藥物中的有機結構氧化分解為二氧化碳和水，有機結合的氮轉化為無機氨，并與過量的硫酸有機結合的氮轉化為無機氨，并與過量的硫酸結合為硫酸銨或硫酸氫銨。結合為硫酸銨或硫酸氫銨。操作過程：操作過程： 本法是往樣品中加入濃硫酸作氧化劑，本法是往樣品中加入濃硫酸作氧化劑，加入硫酸鹽提高硫酸的沸點，增強硫酸的加入硫酸鹽提高硫酸的沸點，增強硫酸的氧化破壞能力，且防止硫酸的分解損失。氧化破壞能力，且防止硫酸的分解損失。 采用了濕

37、法破壞中的硫酸采用了濕法破壞中的硫酸-硫酸鹽法：硫酸鹽法：2、測定法、測定法 將消化后的溶液轉入將消化后的溶液轉入C瓶中，加入過瓶中，加入過量的量的40%氫氧化鈉溶液，前面連接水蒸氫氧化鈉溶液，前面連接水蒸氣裝置，后邊連接冷凝管，接受瓶中加氣裝置，后邊連接冷凝管，接受瓶中加入硼酸，接受液用標準酸溶液進行酸堿入硼酸，接受液用標準酸溶液進行酸堿中和滴定。計算含量。中和滴定。計算含量。凱氏定氮蒸餾裝置凱氏定氮蒸餾裝置撲米酮的含量測定：撲米酮的含量測定： 含有兩個含有兩個N原子（原子（2個酰胺氮）個酰胺氮）(二二) 干法破壞干法破壞 適用于濕法不易破壞完全的有機物適用于濕法不易破壞完全的有機物以及某些

38、不能用硫酸進行破壞的有機以及某些不能用硫酸進行破壞的有機藥物。藥物。 不適用于含易揮發性金屬（如汞、不適用于含易揮發性金屬（如汞、砷等）有機藥物的破壞。砷等）有機藥物的破壞。1、高溫熾灼法、高溫熾灼法 將藥物高溫灰化，無機物轉化將藥物高溫灰化，無機物轉化為無機元素或無機鹽的形式，可供為無機元素或無機鹽的形式，可供分析。分析。也稱堿破壞法也稱堿破壞法 有機物有機物Ca(OH)2或或Na2CO3或或MgNO3(MgO)小火灼燒，炭化，高溫熾灼，完全灰化以達分小火灼燒，炭化，高溫熾灼，完全灰化以達分解。解。*加堿加堿Ca(OH)2或或Na2CO3或或MgNO3(MgO)的的目的幫助灰化完全。目的幫助

39、灰化完全。 *中國藥典有機藥物中砷鹽檢查堿破壞法。中國藥典有機藥物中砷鹽檢查堿破壞法。*1）加熱灼燒時溫度在）加熱灼燒時溫度在420以下，以免某以下，以免某些被測金屬化合物揮發；些被測金屬化合物揮發； 2）灰化是否完全影響測定結果的準確度；）灰化是否完全影響測定結果的準確度； 如需檢查灰化放冷稍過量的稀鹽酸水如需檢查灰化放冷稍過量的稀鹽酸水 （1：3）或硝酸水（）或硝酸水（1：3），振），振 搖，若呈色或有不溶有機物，可搖，若呈色或有不溶有機物，可 在水浴上將溶液蒸干，小火炭化在水浴上將溶液蒸干，小火炭化 后，再行灼燒。后，再行灼燒。 3）本法破壞后，所得灰分往往不易溶解，但）本法破壞后，所得

40、灰分往往不易溶解，但 此時切勿棄去。此時切勿棄去。a.石灰法：石灰法： 氫氧化鈣小火灼燒炭化后，氫氧化鈣小火灼燒炭化后，500600熾熾灼完全灰化，待砷轉化為非揮發性的亞砷酸鈣灼完全灰化，待砷轉化為非揮發性的亞砷酸鈣Ca3(AsO3)2，再依法檢查。，再依法檢查。*本法操作簡單，但應注意完全灰化，否則可使本法操作簡單，但應注意完全灰化，否則可使 砷斑較淺且重現性差。砷斑較淺且重現性差。b.無水碳酸鈉堿融法無水碳酸鈉堿融法: 環狀結構的有機酸堿金屬鹽苯甲酸鈉、對環狀結構的有機酸堿金屬鹽苯甲酸鈉、對氨基水楊酸鈉，采用石灰法不能破壞完全，可采氨基水楊酸鈉，采用石灰法不能破壞完全，可采用此法。用此法。

41、c.硝酸鎂乙醇溶液法：硝酸鎂乙醇溶液法： 熾灼破壞分解有機物，使砷轉化為非揮發性熾灼破壞分解有機物，使砷轉化為非揮發性的砷酸鎂的砷酸鎂Mg(AsO4)2，殘渣質輕，殘渣質輕，HCl易溶。易溶。*本法操作簡單，易于灰化，并且砷能定量回收。本法操作簡單，易于灰化，并且砷能定量回收。但應注意灰化完全，使硝酸鎂完全分解為氧化鎂。但應注意灰化完全，使硝酸鎂完全分解為氧化鎂。*如有硝酸鹽或亞硝酸鹽殘留，則在酸性溶液中如有硝酸鹽或亞硝酸鹽殘留，則在酸性溶液中生成硝酸和亞硝酸，影響砷化氫氣體的生成。生成硝酸和亞硝酸，影響砷化氫氣體的生成。 注意事項：注意事項：（1）加熱或灼燒時，應控制溫度在）加熱或灼燒時，應

42、控制溫度在 以下；以下；（2）一定要灰化完全。）一定要灰化完全。2、氧瓶燃燒法、氧瓶燃燒法（1）原理）原理 將有機藥物放入將有機藥物放入充滿氧氣充滿氧氣的的密閉密閉燃燒瓶燃燒瓶中進行中進行燃燒燃燒，并將燃燒所產生的欲測物質，并將燃燒所產生的欲測物質吸收吸收于適當的于適當的吸收液吸收液中，然后根據欲測物中，然后根據欲測物質的性質，采用適宜的分析方法進行鑒別、質的性質，采用適宜的分析方法進行鑒別、檢查或含量測定檢查或含量測定NaClHClOClCNaOH2 溶液點燃 適用于含鹵素、硫、氮、硒等有機適用于含鹵素、硫、氮、硒等有機 藥物的分析藥物的分析 本法特點是簡便、快速、本法特點是簡便、快速、破壞

43、完全，尤其適用于微量破壞完全，尤其適用于微量樣品的分析。樣品的分析。 （ 2） 儀器與材料儀器與材料 儀器裝置儀器裝置 燃燒瓶為燃燒瓶為500、1000或或2000ml無無色、磨口、厚壁、硬質玻璃錐型瓶；色、磨口、厚壁、硬質玻璃錐型瓶；瓶塞瓶塞空心，底部熔封鉑絲一根，下端空心，底部熔封鉑絲一根，下端呈螺旋狀或網狀呈螺旋狀或網狀 稱樣用材料及稱樣稱樣用材料及稱樣 A. A. 固體樣品固體樣品 無灰濾紙無灰濾紙 B. B. 液體樣品液體樣品 紙袋紙袋 吸收液吸收液 A. 作用：作用：吸收液的作用是將樣品經吸收液的作用是將樣品經燃燒分解所產生的各種價態的鹵素、燃燒分解所產生的各種價態的鹵素、硫、氮、

44、硒等，硫、氮、硒等，定量地吸收并轉變為定量地吸收并轉變為一定的便于測定的價態一定的便于測定的價態氧氣氧氣B. 吸收液的選擇吸收液的選擇 氟氟 水水 氯氯 NaOH溶液溶液溴溴 H2O2-NaOH NaOH-硫酸肼飽和溶液硫酸肼飽和溶液碘碘 NaOH硫酸肼飽和溶液硫酸肼飽和溶液硫硫 NaOH或或H2O2 硒硒 硝酸溶液硝酸溶液（3）操作方法）操作方法燃燒瓶燃燒前的準備燃燒瓶燃燒前的準備用洗液洗凈后，按各藥品項下的規定加入用洗液洗凈后，按各藥品項下的規定加入吸收液，將瓶口用水濕潤，小心急速地通吸收液，將瓶口用水濕潤，小心急速地通入氧氣入氧氣1min。 樣品的準備樣品的準備 取樣品適量，精密稱定后按

45、規取樣品適量，精密稱定后按規定方法包裹，固定于鉑絲下端的網內定方法包裹，固定于鉑絲下端的網內或螺旋處。或螺旋處。樣品的燃燒樣品的燃燒 點燃包有供試品的濾紙尾部，迅速放點燃包有供試品的濾紙尾部，迅速放入燃燒瓶中，按緊瓶塞，加水少量封閉瓶入燃燒瓶中，按緊瓶塞，加水少量封閉瓶口，俟燃燒完畢（應無黑色碎片），充分口，俟燃燒完畢（應無黑色碎片），充分振搖，使生成的煙霧完全吸入吸收液中，振搖，使生成的煙霧完全吸入吸收液中，放置放置15min，用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，合并洗液及吸收液，同法另做空白試驗。合并洗液及吸收液，同法另做空白試驗。然后按各藥品項下規定的方法進行然后按各藥品項下

46、規定的方法進行鑒別、鑒別、檢查或含量測定。檢查或含量測定。 待分解樣品量待分解樣品量 燃燒瓶的體積燃燒瓶的體積 35mg（微量分析）微量分析） 150250ml 2030mg（半微量分析）半微量分析） 300500ml 5060mg 1000ml 0.60.7g或更多或更多 2000ml或特殊結或特殊結 構的燃燒瓶構的燃燒瓶例例 碘苯酯的含量測定碘苯酯的含量測定 ChP（2000）原理原理 碘苯酯系有機碘化物，用氧瓶燃燒分碘苯酯系有機碘化物，用氧瓶燃燒分解，轉變為碘化物，繼而氧化為游離的碘，解，轉變為碘化物，繼而氧化為游離的碘，并被定量地吸收于吸收液中，和氫氧化鈉反并被定量地吸收于吸收液中，和

47、氫氧化鈉反應，生成碘化物與碘酸鹽，加入溴應，生成碘化物與碘酸鹽，加入溴- -醋酸溶醋酸溶液，使全部轉變為碘酸鹽，過量的溴以甲酸液，使全部轉變為碘酸鹽，過量的溴以甲酸及通空氣去除。加入碘化鉀，使與碘酸鹽反及通空氣去除。加入碘化鉀，使與碘酸鹽反應析出應析出游離碘，用硫代硫酸鈉液滴定，碘與游離碘，用硫代硫酸鈉液滴定，碘與淀粉結合所顯的藍色消失即為終點淀粉結合所顯的藍色消失即為終點 。 取本品約取本品約20mg，精密稱定，照氧瓶燃燒法精密稱定，照氧瓶燃燒法進行有機破壞，用氫氧化鈉試液進行有機破壞，用氫氧化鈉試液2ml與水與水l0ml為為吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶

48、液(取醋酸鉀取醋酸鉀10g，加冰醋酸適量使溶解，加溴加冰醋酸適量使溶解，加溴0.4ml，再加冰再加冰醋酸使成醋酸使成1000m1)l0ml，密塞，振搖，放置數分密塞，振搖，放置數分鐘，加甲酸約鐘，加甲酸約lml，用水洗滌瓶口，并通入空氣流用水洗滌瓶口，并通入空氣流約約35min以除去剩余的溴蒸氣，加碘化鉀以除去剩余的溴蒸氣，加碘化鉀2g，密塞，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液密塞，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液(0.02Mol/L)滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續滴定至藍色消失，并將滴定的結果用空白試驗校滴定至藍色消失，并將滴定的結果用空白試驗校正。正。每每lml的硫

49、代硫酸鈉滴定液的硫代硫酸鈉滴定液(0.02mol/L)相當于相當于1.388mg的的C19H29IO2。 滴定度的計算滴定度的計算 放大反應放大反應2mol碘苯酯碘苯酯1molI21molI21molNaIO+1molNaI1molNaIO1/3molNaIO3+2/3molNaI321molNaI+Br2321molNaIO3即即2mol碘苯酯碘苯酯2molNaIO32mol NaIO3+10I 6molI2即即2mol碘苯酯碘苯酯1molI2 6molI212molI12molNa2S2O3反應摩爾比為反應摩爾比為1 6mlmgncMT/388. 1634.41602. 098：140.

50、氧瓶燃燒法中的裝置有A. 磨口硬質玻璃錐形瓶B. 磨口軟質玻璃錐形瓶C. 鉑絲D. 鐵絲E. 鋁絲96：133（99x：138）選擇氧瓶燃燒法所必備的實驗物品A. 磨口硬質玻璃錐形瓶B. 鉑絲C. 普通濾紙D. 氫氣 E. 無灰濾紙99：76氧瓶燃燒法測定含氯有機藥物時所用的吸收液多數為A. H2O2溶液B. H2O2NaOH溶液C. NaOH溶液D硫酸肼飽和液E. NaOH硫酸肼飽和液99：134. 氧瓶燃燒法可用于A. 含鹵素有機藥物的含量測定B. 醚類藥物的含量測定C. 檢查甾體激素類藥物中的氟D. 檢查甾體激素類藥物中的硒E. 芳酸類藥物的含量測定第三節第三節 藥品分析方法的驗證藥品分

51、析方法的驗證 一、一、目的目的 證明所采用的分析方法適合于相應的檢測證明所采用的分析方法適合于相應的檢測要求，要求，能夠真實地反映藥品內在的質量能夠真實地反映藥品內在的質量。方法方法驗證過程和結果均應記載在藥品標準起草和修驗證過程和結果均應記載在藥品標準起草和修訂說明中。訂說明中。 二、用途二、用途（一）藥品質量標準起草時，分析方（一）藥品質量標準起草時，分析方 法需經驗證。法需經驗證。（二）藥物原分析方法進行修訂或變更（二）藥物原分析方法進行修訂或變更 時，分析方法需經驗證。時，分析方法需經驗證。三、需驗證的分析項目三、需驗證的分析項目1. 1. 鑒別試驗；鑒別試驗；2. 2. 雜質定量或限

52、度檢查；雜質定量或限度檢查；3. 3. 原料或制劑中有效成分含量測定；原料或制劑中有效成分含量測定；4. 4. 制劑中其它成分（降解產物、防腐劑等）制劑中其它成分（降解產物、防腐劑等） 的測定；的測定；5. 5. 溶出度、釋放度等檢查中，其溶出量溶出度、釋放度等檢查中，其溶出量 等的測試方法。等的測試方法。 驗證內容有：準確度、精密度驗證內容有：準確度、精密度（重復性、中間精密度和重現性）、（重復性、中間精密度和重現性）、專屬性、檢測限、定量限、線性、范專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍、耐用性，共八項內容。圍、耐用性，共八項內容。四、驗證內容四、驗證內容 一、準確度一、準確度 是指用該方法測

53、定結果與真實值或參考值接是指用該方法測定結果與真實值或參考值接 近的程度，一般用回收率表示。準確度應在近的程度，一般用回收率表示。準確度應在 規定的范圍內測試。規定的范圍內測試。 測定回收率測定回收率R（recovery）的具體方法可采用的具體方法可采用 “回收試驗法回收試驗法”和和“加樣回收試驗法加樣回收試驗法”。 n1、 原料藥原料藥 用對照品做回收率用對照品做回收率n 2、 制劑制劑 要考察輔料對回收率的影響要考察輔料對回收率的影響 回收試驗回收試驗 空白（敷料組成）空白（敷料組成）+ +已知量已知量A A的的對照品，測定，測定值的均值為對照品，測定，測定值的均值為 M M%100AMR

54、 模擬了被測定物的環境，從而真實反映模擬了被測定物的環境，從而真實反映 測定方法的準確程度測定方法的準確程度3、如果被測定物的背景是不能夠模擬的，、如果被測定物的背景是不能夠模擬的，該如何考慮背景的影響？該如何考慮背景的影響？ 前提：具有已知含量的供試品前提：具有已知含量的供試品 比如中藥的有效成分的測定？比如中藥的有效成分的測定？ 加樣回收試驗加樣回收試驗 已準確測定藥物含量已準確測定藥物含量P P的真實樣品的真實樣品+ +已知量已知量A A的的對照品，測定值為對照品，測定值為M M%100APMR回收率回收率% = （測定平均值（測定平均值 空白值）空白值）/加入量加入量100% 含量測定

55、方法的回收率測定總結：含量測定方法的回收率測定總結： 原料藥：用對照品進行測定原料藥：用對照品進行測定 制劑：采用在空白輔料中加入對照制劑：采用在空白輔料中加入對照品品 的方法。的方法。如不能得到制劑的全部組分，即如不能得到制劑的全部組分，即空白空白輔料，輔料，可向制劑中加入已知量的被測物可向制劑中加入已知量的被測物進行測定，前提是進行測定，前提是制劑中被測定物的含制劑中被測定物的含量是已知的。加樣回收試驗量是已知的。加樣回收試驗 中藥分析的準確度用加樣回收試驗中藥分析的準確度用加樣回收試驗衡量。衡量。 二、精密度二、精密度 是指在規定的測試條件下，同一個均勻是指在規定的測試條件下，同一個均勻

56、樣品，經多次測定結果樣品，經多次測定結果 之間的接近程度。之間的接近程度。 （一）精密度表示方法（一）精密度表示方法 相對標準偏差相對標準偏差(relative standard deviation, RSD)也稱變異系數也稱變異系數 (coefficient of variation, CV) RSD=標準偏差標準偏差/平均值平均值100%=SD/X 100%1 1、 重復性重復性 在相同條件下，由同一個分析人員測定在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結果的精密度。在規定的范圍內，至所得結果的精密度。在規定的范圍內，至少用少用9 9次測定結果評價，即制備三個不同次測定結果評價，即制備三個不

57、同濃度樣品各測三次的結果進行評價。濃度樣品各測三次的結果進行評價。 2. 中間精密度中間精密度 同一同一實驗室，實驗室，不同不同時間由時間由不同不同分析人員，分析人員，用用不同不同設備所得結果的精密度。設備所得結果的精密度。 在實驗地點沒有變化的情況下在實驗地點沒有變化的情況下考察隨機考察隨機變動因素的影響，變動因素的影響，如如不同日期、不同分析不同日期、不同分析人員、不同設備，只是人員、不同設備，只是地點地點沒有變化。沒有變化。 3. 重現性重現性 不同不同實驗室，實驗室，不同不同分析人員測定結果的精分析人員測定結果的精密度。所有的因素都發生了變化。當分析方密度。所有的因素都發生了變化。當分

58、析方法將被法定標準采用時，應進行重現性試驗。法將被法定標準采用時，應進行重現性試驗。 三、專屬性三、專屬性 是指在其他成分是指在其他成分(如雜質、降解產物、如雜質、降解產物、輔料等輔料等) 存在下，采用的方法能準確測定存在下，采用的方法能準確測定出被測物的特性。出被測物的特性。 鑒別反應、雜質檢查、含量測定方鑒別反應、雜質檢查、含量測定方法，均應考察其專屬性。法，均應考察其專屬性。 四、檢測限（四、檢測限（limit of detection, LOD） 是指試樣中被測物能被檢測出的是指試樣中被測物能被檢測出的最低濃度或量最低濃度或量。它反映方法是否具有靈敏的檢測能力，即是否具它反映方法是否具

59、有靈敏的檢測能力，即是否具備備足夠的靈敏度。足夠的靈敏度。 （一）（一）常用的方法常用的方法 1. 1. 目視法目視法 用已知濃度被測物，試驗出能被可用已知濃度被測物，試驗出能被可 靠地檢測出的最低濃度或量。靠地檢測出的最低濃度或量。SeeSee圖圖4-54-5 2. 2.儀器分析方法（信噪比法）儀器分析方法（信噪比法） GCGC和和HPLCHPLC法：進樣已知低濃度的樣品法：進樣已知低濃度的樣品一般以一般以S S/ /N N = 2 = 2或或3 3時的相應濃度或注入儀器的量時的相應濃度或注入儀器的量確確定定LODLOD，此時的溶液濃度即為此時的溶液濃度即為LOD 。 seesee圖圖4-6

60、 4-6 五、定量限（五、定量限（limit of quantitation, LOQ) 是指樣品中是指樣品中被測物能被被測物能被定量測定定量測定的最低量的最低量，其其 測定結果應具一定測定結果應具一定準確度和精密度準確度和精密度。 一般以一般以S/N=10 S/N=10 時的溶液濃度進行實驗，確定時的溶液濃度進行實驗，確定 具有一定具有一定準確度和精密度準確度和精密度的的最低量最低量。 六、線性六、線性 是指在設定的范圍內，測定結果（響應值）與試是指在設定的范圍內，測定結果（響應值）與試樣中被測物濃度呈樣中被測物濃度呈正比正比關系的關系的程度程度。 UVUV法：首先制備一個標準系列，濃度點法