1、PBS緩沖液配方不管是免疫組化，還是細胞培養中，常用到PBS緩沖液，下面是常用配方，供大家參考。用于細胞培養的PBS需含有氯化鉀稱取8gNaCI、0.2gKCI、1.44gNa2HPO4禾口0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸餾水中，用HCI調節溶液的pH值至7.4,最后加蒸餾水定容至1L,滅菌即可。0.01MPBS緩沖液稱取NaCI8g，KCI0.2g，Na2HPO4?12H2O3.63g,KH2PO40.24g,溶于900ml雙蒸水中，用鹽酸調pH值至7.4,加水定容至1L,常溫保存備用。一般免疫組化用PBS，主要用來清洗，都只包含Na2HPO4?12H2O(磷酸氫二鈉)和NaH2PO

2、4?2H2O(磷酸二氫鈉)兩種組分，母液的配制：0.2MNa2HPO4:稱取71.6gNazHPO4-12H2O，溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取31.2gNaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水各種濃度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2MPB(pH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。然后只需將0.2MPB(pH=7.4)按相應比例適當稀釋即可，如：0.1MPB(PH=7.4):取500ml0.2MPB，加水稀釋至1000ml即可。0.01MPB(PH=7.4):取50ml0.2MPB，加水稀

3、釋至1000ml即可。0.02MPB(PH=7.4):取100ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml即可若需要NaCL的話，加入NaCL至0.9%(g/100ml)即可。另：其它各種另PH值的0.2MPB(100ml)配方：pH0.2MNaH2PO4(ml)0.2MNa2HPO4(ml)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419m

4、l81ml7.516847.613877.710.50.57.88.591.57.97938.05.394.7關于磷酸緩沖溶液的一些問答PBS可以為三種溶液的英文縮寫，分別是1. 磷酸鹽緩沖溶液(phosphatebufferedsolution)、磷酸鹽緩沖鹽水(phosphatebufferedsaline)及2. 磷酸鹽緩沖鈉(phosphatebufferedsodium)，phospphosp其配制方法不同，pH值不同，發揮的生物學作用亦不完全相同如無特殊說明，生物學上常用的PBS是中性磷酸鹽緩沖溶液(hatebufferedsolution)。無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽水(PBS)(0.

5、15Mol/LPH7.2)NaCl8.0g(如為Na2HPO412H2O，則為2.89g)KH2PO40.2g將上述試劑依次溶于1000ml去離子水中，完全溶解后，115C高壓滅菌10min15min,存在4C冰箱中備用。此液可用于配制和稀釋細胞分散劑以及洗滌細胞培養物。常用的都是第二種。問題1:磷酸鹽緩沖鹽水(phosphatebufferedsodium),為什么用第三種或第一種呢：這么多年以來我都以為PBS就是磷酸鹽緩沖溶液，其他兩種說法的英語名稱常見到，不過我一直都以為他們是差不多的東西。不同的漢語翻譯倒是第一次聽說。我們公司用的PBS有很多種，抗體組用的中和PBS配方就比較簡單，沒有

6、K+離子，只起到緩沖PH的作用；Na2HPO4+KH2PO4按照不同比例混勻，可以得到不同PH的緩沖液，用于不同目的，這個在分子生物學中用得很多；用于活細胞或者細菌處理的，為了保持滲透壓，會加入其他的溶液，最常見的就是NaCI和KCl調節離子濃度。以上是個人的理解，歡迎批評。：問題2:既然抗體組的PBS是起到緩沖PH的作用，那加入80G的NACL作用是什么？需要平衡滲透壓嗎？還有加入K離子的是不是因為細胞上NA-K泵的原因啊，血清里面又沒有細胞，何來NA-K泵一說??？我覺得之所以這么配，其實就是對血清中緩沖環境的一種模擬罷了，血清里面又沒有細胞，何來NA-K泵一說?。繂栴}3:不加NACL會怎么樣??？多省錢啊在中和磷酸鹽緩沖液中，NaCI的主要作用應當是保持一定的離子濃度，以維持抗體的活性。在離子濃度過高或過低的情況下，蛋白質都會變性，抗體當然不例外。ps:哺乳類需用生理鹽水濃度是0.9%。稱取0.9克氯化鈉，溶解在少量蒸餾水中，稀釋到100毫升。