1、排石合劑質量標準研究(一)    摘要:排石合劑為我院新開發的一種制劑，以金錢草為君藥輔以懷牛 膝和車前子等組成?？捎糜谥委熌蚵犯腥?、血尿和泌尿系統結石等疾病。建立本品的質量標 準為質控提供依據。處方中的黃酮和皂苷用定性方法鑒別，金錢草和懷牛膝用TLC進行鑒別 ，其中的總黃酮按中華人民共和國藥典1995年版所載比色法測定實驗表明在0.008 0.048 mg/mL范圍內濃度與吸收度呈良好的線形關系，其低、中、高濃度的加樣回收率分 別為100.39%、102.36%和101.17%，本方法簡便、快速且重現性好。 Studies on the Quality

2、 Standard of Pai shi Mixture AbstractPai shi mixture is a newly developed herbal prepara tion composed of Glechoma longituba (Nakai) Kupr. as the main compo nent supplement ed by Achyranthes bidentata, Plantago asiatica and several other minor ingredients. It was proposed for the treatment of urinar

3、y infection, hem at uria and urinary calculi. The object of the present study is to establish a sta n dard for the quality control of the product. The presence of flavonoids and sap o nins were varified by specific qualitative identification. G. longitub a and A. bidentata were distinguishing by TLC

4、. Content o f total flavonoids was determined b y colorimetry as described in the 1995 edition of Chinese Pharm acopoeia. The plot of concentration against absorption gave a straight line ( W TBXr=0.999 6) over the range of 0.0080.048 mg/mL. The averag e recovery of low, middle and high concentratio

5、ns were 100.39%, 102.36% and 10 1.17% respect ively. The method proved to be simple, rapid and reproducible. Key wordsPai shi Mixturetotal flavonoidcolorimetryGlechoma longituba (Nakai) Kupr. 排石合劑是我院的一種自制制劑，由金錢草、懷牛膝、車前子等中藥組成，具有利尿排石、 清熱消炎、涼血止血等功效，用于治療泌尿系統結石、尿路感染、血尿等疾病，療效很好。 為了制定控制內在質量的標準，我們根據處方中藥物的性質

6、，對其中所含的黃酮類、皂苷類 成分及 金錢草、懷牛膝等藥物分別做了鑒別試驗，并進行了總黃酮的含量測定，從而為質量標準的 制定提供了依據。 1儀器與試藥 UV-210PC 型紫外分光光度計(日本島津)；紫外光燈(上海顧村電器廠)；硅膠G板(青島海洋 化工廠)；聚酰胺薄膜(臺州市路橋四青生化材料廠)；蘆丁、齊墩果酸對照品(中國藥品生物 制品檢定所)；排石合劑及藥材原料由我院制劑室提供。 2鑒別試驗 2.1皂苷類成分 2.2黃酮類成分：取本品15 mL于具塞試管中，用甲醇約10 mL提取，離心，取上清液于分 液漏斗中，用適量乙酸乙酯萃取2 次，合并乙酸乙酯層，減壓蒸干，用無水乙醇約5 mL溶解 ，取

7、2 mL，加鎂粉少許、鹽酸數滴，可見有大量氣泡產生，溶液漸變紅色，微熱，溶液呈透 明的紅棕色。 2.3金錢草的TLC1：取本品10 mL，用乙酸乙酯10 mL提取2 次，合并乙酸乙酯 層 ，減壓濃縮至3 mL作為供試品溶液。取金錢草5 g，加100 mL水煎煮，煎煮液減壓濃縮，加 乙酸乙酯適量提取2 次，合并乙酸乙酯層，減壓濃縮至3 mL作為陽性對照品溶液，同時制備 不含金錢草的陰性對照液。吸取上述溶液各5 L，分別點于聚酰胺薄膜上 ，以水-乙醇- 乙酰丙酮(421)展開后，噴以2% AlCl3乙醇液顯色后，于110 烘5 min，于紫外光燈 下觀察。 2.4懷牛膝的TLC2：取本品20 mL

8、，用乙醚(25，20，20 mL)提取3 次，水層 再 用乙酸乙酯(15，10，10 mL)提取3 次，水層再用水飽和的正丁醇(15，10 mL)提取2 次，合 并正丁醇層，減壓蒸干，殘渣加乙醇10 mL溶解，加鹽酸1 mL，加熱回流1 h，濃縮至約5 mL ， 加水10 mL，用石油醚(60 90 )20 mL振搖提取，蒸干，殘渣加乙醇1 mL溶解，作為供 試品溶液。另取齊墩果酸對照品加無水乙醇配成每毫升含1 mg的溶液作為對照品溶液。同時 制備懷牛膝的陽性對照液和不含懷牛膝的陰性對照液。分別吸取對照溶液、供試品 溶液適量點于同一硅膠G板上，以氯仿-甲醇(401)為展開劑展開后，噴以5%磷鉬

9、酸試液顯 色后于105 烘5 min，除陰性對照液外其它試液均可見在同一位置上顯藍色斑點。 3總黃酮的含量測定3 3.1測定波長的選擇：精密稱取蘆丁對照品5 mg于25 mL容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度(20 0 g/mL)。精密吸取對照品溶液4 mL于25 mL容量瓶中，加水至6 mL，加5%的NaNO2溶液1 mL，搖勻，放置6 min；加10%的AlCl3溶液1 mL，搖勻，放置6 min；再加5%的NaOH溶液1 0 mL，最后用水稀釋至刻度，搖勻，放置15 min后于波長350600 nm間掃描，可見在510 n m處有最大吸收。 3.2標準曲線的制備：精密吸取對照品溶液0.0，1.0

10、，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 mL于2 5 mL容量瓶中，各加水至6 mL，以下按3.1項下自“加5%的NaNO2溶液1 mL”起處理 ， 以第一份為空白，在510 nm處測定吸光度A。得回歸曲線為C=0.081 55A+2.378×10-3(r=0.999 6)。 。 3.3樣品加樣回收率試驗：精密吸取已知含量的樣品溶液適量于 10 mL容量瓶中，精密加 入對 照品溶液，用甲醇稀釋到刻度，渦旋混勻，轉移至離心管中離心，精吸上清液5 mL于25 mL 容量瓶中，加水至6 mL，以下按3.1項下自“加5%的NaNO2溶液1 mL”起處理，測定 其 吸光度，由回歸方程求出總黃

11、酮的含量，計算回收率，結果低、中、高三個濃度的加樣回收 率分別為100.39±2.88，102.36±0.99，101.17±0.36(n=3)。 3.4樣品含量測定：精密吸取經一定稀釋的本品適量置10 mL容量瓶中，用甲醇稀釋到刻 度，渦旋混勻，轉移至離心管中離心，精吸上清液4 mL于25 mL容量瓶中，加水至6 mL，以 下按3.1項下自“加5%的NaNO2溶液1 mL”起處理，測定其吸光度，由回歸方程求出 總黃酮的含量(相當于含蘆丁的量)，結果見表1。 4與質量有關的項目測定 按中國藥典1995版檢測，結果見表1。 表1樣品測定結果 批號 981201 99

12、0101 990601 相對密度 1.17&n bsp;1.17 1.12 pH測定 4.61 4.82 4.54 總黃酮含量 8.92±0.04 11.88±0.01 8.60±0.18 注：總黃酮系1 mL合劑中黃酮(相當于蘆丁的量)的毫克數。 5討論 5.1排石合劑中成分復雜，干擾因素多。本實驗做過排石合劑、金錢草水煎液及 除去金錢草外的其他幾味中藥水煎液經甲醇提取后，同上所述進行一系列的顯色反應后的掃 描曲線，發現前兩者的掃描曲線相似，而后者在相應位置上卻沒有吸收峰，所以用本法的含 量基本可以反映君藥金錢草的質量。 5.2本實驗參考中華人民共和國藥典，采用比色法測定處方中總黃酮的含量，經顯色穩定 性考察發現溶液的吸光度在1560 min內基本保持不變，因此建議測定應在該時間段內完成 。 5.3上述試驗結果表明，排石合劑中可定性的檢出皂苷類、黃酮類、金錢草、懷牛膝等。 依據上述結果，建議標準中規定，相對密度應不小于1.08，pH值在