1、重點題型1目標微生物的篩選與鑒定1.分離微生物的原理與措施分離微生物的原理與措施（1）原理：自然環境中的微生物是混雜在一起的，因此分離獲得純培養物應首先）原理：自然環境中的微生物是混雜在一起的，因此分離獲得純培養物應首先采用的方法是將單個的細胞與其他細胞分離，再給細胞提供合適的營養和條件，采用的方法是將單個的細胞與其他細胞分離，再給細胞提供合適的營養和條件，使其生長成為可見的群體。使其生長成為可見的群體。（2）常用措施）常用措施接種過程中盡量使細胞分散開來，如平板劃線法、稀釋涂布平板法。接種過程中盡量使細胞分散開來，如平板劃線法、稀釋涂布平板法。運用選擇培養基的作用特點，在培養基中添加某種特定

2、的物質，抑制不需要的微運用選擇培養基的作用特點，在培養基中添加某種特定的物質，抑制不需要的微生物的生長，促進所需微生物的生長。生物的生長，促進所需微生物的生長。2.選擇培養基四種常見制備方法或實例選擇培養基四種常見制備方法或實例【例證【例證1】 （2017全國卷全國卷，37）某些土壤細菌可將尿素分解成某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和和NH3，供植，供植物吸收和利用。回答下列問題：物吸收和利用。回答下列問題：（1）有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產生）有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產生。能。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物

3、CO2作為碳源，原因是作為碳源，原因是_，但可用，但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是_（答出兩點即可）。（答出兩點即可）。（2）為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養基時，應選擇）為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養基時，應選擇（填（填“尿素尿素”“NH4NO3”或或“尿素尿素NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是_。（3）用來篩選分解尿素細菌的培養基含有）用來篩選分解尿素細菌的培養基含有KH2PO4和和Na2HPO4，其作用有，其作用有_（答出兩點即可）。（答出兩點即可）。解析解析（

4、1）只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。能分解尿素）只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。能分解尿素的細菌是一種分解者，屬于異養型生物，不能以尿素的分解產物的細菌是一種分解者，屬于異養型生物，不能以尿素的分解產物CO2作為碳源。能作為碳源。能分解尿素的細菌可以以葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是：一分解尿素的細菌可以以葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是：一方面可氧化分解為細胞生命活動提供能量，另一方面其代謝中間產物可為多種有機方面可氧化分解為細胞生命活動提供能量，另一方面其代謝中間產物可為多種有機物的合成提供原料。物的合成提供原料。（2

5、）為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養基時，應選擇以尿素作為唯一氮源的）為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養基時，應選擇以尿素作為唯一氮源的選擇培養基，而其他兩組都含有含氮物質選擇培養基，而其他兩組都含有含氮物質NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用素的細菌都能利用NH4NO3不能起到篩選作用。不能起到篩選作用。（3）用來篩選分解尿素細菌的培養基含有）用來篩選分解尿素細菌的培養基含有KH2PO4和和Na2HPO4，其作用：，其作用：KH2PO4和和Na2HPO4構成緩沖液，可維持培養基的構成緩沖液，可維持培養基的pH相對穩定；相對穩定；KH2P

6、O4和和Na2HPO4能為微生能為微生物生長提供無機鹽。物生長提供無機鹽。答案答案（1）脲酶分解尿素的細菌是異養生物，不能利用）脲酶分解尿素的細菌是異養生物，不能利用CO2來合成有機物為細來合成有機物為細胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料（胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料（2） 尿素其他兩組都含尿素其他兩組都含有有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到，不能起到篩選作用（篩選作用（3）為細菌生長提供無機鹽離子，作為緩沖劑保持細胞生長過程中）為細菌生長提供無機鹽離子，作為緩沖劑保持細

7、胞生長過程中pH穩定穩定【例證【例證2】 （2014全國卷全國卷）植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題。問題。（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將酶，其中的葡萄糖苷酶可將分解成分解成。（2）在含纖維素的培養基中加入剛果紅（）在含纖維素的培養基中加入剛果紅（CR）時，）時，CR可與纖維素形成可與纖維素形成_色復合物。用含有色復合物。用含有CR的該種培養基培養纖維素分解菌時，培養基上會的該種培養基培養纖維素分解菌時

8、，培養基上會出現以該菌的菌落為中心的出現以該菌的菌落為中心的。（3）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養基（成分見下表）：、乙兩種培養基（成分見下表）：注：注：“”表示有，表示有，“”表示無。表示無。據表判斷，培養基甲據表判斷，培養基甲（填（填“能能”或或“不能不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是原因是；培養基乙；培養基乙（填（填“能能”或或“不能不能”）用于分離和）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是鑒別纖維素分解菌，原因是_。酵母膏酵母膏無機鹽無機

9、鹽淀粉淀粉纖維素粉纖維素粉瓊脂瓊脂CR溶液溶液水水培養基甲培養基甲培養基乙培養基乙答案答案（1）纖維二糖葡萄糖（）纖維二糖葡萄糖（2）紅透明圈）紅透明圈（3）不能液體培養基不能用于分離單菌落不能培養基中沒有纖維素，不會形）不能液體培養基不能用于分離單菌落不能培養基中沒有纖維素，不會形成成CR纖維素紅色復合物，即使出現單菌落也不能確定其為纖維素分解菌纖維素紅色復合物，即使出現單菌落也不能確定其為纖維素分解菌1.（2019湖南、江西十四校聯考）湖南、江西十四校聯考）馬、牛羊的食物主要是草莖類，其中還有大量的馬、牛羊的食物主要是草莖類，其中還有大量的纖維素。它們胃內的微生物，在幫助消化和利用植物纖維

10、素方面起了決定性的作纖維素。它們胃內的微生物，在幫助消化和利用植物纖維素方面起了決定性的作用，土壤中也存在著分解纖維素的微生物。請根據所學的知識，回答下列問題：用，土壤中也存在著分解纖維素的微生物。請根據所學的知識，回答下列問題：（1）纖維素酶是一種復合酶，主要包括）纖維素酶是一種復合酶，主要包括、。（ 2 ） 在 培 養 基 中 進 入 剛 果 紅 染 液 可 以 鑒 別 纖 維 素 分 解 菌 ， 其 原 因 是） 在 培 養 基 中 進 入 剛 果 紅 染 液 可 以 鑒 別 纖 維 素 分 解 菌 ， 其 原 因 是_。（3）分離土壤中纖維素分解菌用到的方法是）分離土壤中纖維素分解菌用

11、到的方法是。稀釋倒平板法稀釋倒平板法涂布平板法涂布平板法單細胞挑取法單細胞挑取法選擇培養分離選擇培養分離A.B.C.D.（4）在微生物的分離與培養的過程中，為了防止雜菌的污染，需要進行嚴格的無菌）在微生物的分離與培養的過程中，為了防止雜菌的污染，需要進行嚴格的無菌操作，如接種環和接種針需要操作，如接種環和接種針需要，培養基需要，培養基需要等。等。（5）下表為鑒別纖維素分解菌的培養基配方，請判斷該培養基為）下表為鑒別纖維素分解菌的培養基配方，請判斷該培養基為培養基，培養基，酵母膏和土豆汁在實驗中的作用是酵母膏和土豆汁在實驗中的作用是_。鑒別纖維素分解菌的培養基配方鑒別纖維素分解菌的培養基配方CM

12、CNa510gKH2PO40.25g酵母膏酵母膏1g瓊脂瓊脂15g土豆汁土豆汁100mL將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1000mL。解析解析（1）纖維素酶包括）纖維素酶包括C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶。酶和葡萄糖苷酶。（2）剛果紅染液可以與纖維素結合形成紅色的復合物，纖維素分解菌產生的纖維素）剛果紅染液可以與纖維素結合形成紅色的復合物，纖維素分解菌產生的纖維素酶能夠將纖維素分解為葡萄糖而使其菌落周圍出現透明圈，所以在培養基中加入剛酶能夠將纖維素分解為葡萄糖而使其菌落周圍出現透明圈，所以在培養基中加入剛果紅染液可以鑒別纖維素分解菌。果紅染液可以鑒別纖維素分解菌

13、。（3）分離土壤中纖維素分解菌，先進行選擇培養，增大纖維素分解菌的濃度，梯度）分離土壤中纖維素分解菌，先進行選擇培養，增大纖維素分解菌的濃度，梯度稀釋，涂布平板、培養，單細胞挑取以獲得純培養，稀釋，涂布平板、培養，單細胞挑取以獲得純培養，正確；稀釋倒平板法是正確；稀釋倒平板法是先進行梯度稀釋，然后分別取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至先進行梯度稀釋，然后分別取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至50左右的瓊脂左右的瓊脂培養基混合、搖勻后，傾入滅菌的培養皿中，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫一定培養基混合、搖勻后，傾入滅菌的培養皿中，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫一定時間即可出現菌落，時間即可出現菌落，錯

14、誤。錯誤。（4）在微生物的分離與培養的過程中，接種環和接種針需要灼燒滅菌，培養基需要）在微生物的分離與培養的過程中，接種環和接種針需要灼燒滅菌，培養基需要高壓蒸汽滅菌。高壓蒸汽滅菌。（5）根據表格分析，該培養基中有瓊脂，因此為固體培養基；酵母膏和土豆汁在實）根據表格分析，該培養基中有瓊脂，因此為固體培養基；酵母膏和土豆汁在實驗中的作用是為纖維素分解菌提供生長因子。驗中的作用是為纖維素分解菌提供生長因子。答案答案（1）C1酶酶CX酶葡萄糖苷酶（酶葡萄糖苷酶（2）剛果紅染液可以與纖維素結合形成紅）剛果紅染液可以與纖維素結合形成紅色的復合物，纖維素分解菌產生的纖維素酶能夠將纖維素分解為葡萄糖而使其菌

15、落色的復合物，纖維素分解菌產生的纖維素酶能夠將纖維素分解為葡萄糖而使其菌落周圍出現透明圈（周圍出現透明圈（3）B（4）灼燒滅菌高壓蒸汽滅菌（）灼燒滅菌高壓蒸汽滅菌（5）固體提供生長）固體提供生長因子因子2.亞硝胺廣泛存在于化工類廢水中，對環境有嚴重危害。某研究小組欲從處理廢水亞硝胺廣泛存在于化工類廢水中，對環境有嚴重危害。某研究小組欲從處理廢水的活性污泥中分離純化亞硝胺降解高效菌株。請回答下列問題：的活性污泥中分離純化亞硝胺降解高效菌株。請回答下列問題：（1）泡菜腌制過程中產生的）泡菜腌制過程中產生的在特定的條件下也會轉變成亞硝胺，對人體健在特定的條件下也會轉變成亞硝胺，對人體健康產生危害，所

16、以在泡菜腌制過程中，要注意控制腌制的康產生危害，所以在泡菜腌制過程中，要注意控制腌制的和食鹽的用量和食鹽的用量。（2）選擇培養時的培養基只能以）選擇培養時的培養基只能以作為唯一氮源，經作為唯一氮源，經滅菌后用于滅菌后用于富集亞硝胺降解菌。富集亞硝胺降解菌。（3）分離純化出）分離純化出3種亞硝胺降解高效菌株，為了比較種亞硝胺降解高效菌株，為了比較3種菌株的降解效率，將等量種菌株的降解效率，將等量的的3種菌株接種于富含亞硝胺的培養基，一組不接種作為空白對照，一段時間后測種菌株接種于富含亞硝胺的培養基，一組不接種作為空白對照，一段時間后測定定4組培養基中亞硝胺的組培養基中亞硝胺的。設置空白對照的目的

17、是。設置空白對照的目的是_。（4）在上述實驗的基礎上研究亞硝胺降解高效菌株混合使用的降解效率，理論上）在上述實驗的基礎上研究亞硝胺降解高效菌株混合使用的降解效率，理論上還需要設計還需要設計組實驗。組實驗。解析解析（1）泡菜腌制過程中產生的亞硝酸鹽在特定的條件下也會轉變成亞硝胺，所）泡菜腌制過程中產生的亞硝酸鹽在特定的條件下也會轉變成亞硝胺，所以在泡菜腌制過程中，要注意控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量。以在泡菜腌制過程中，要注意控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量。（2）培養基只能以亞硝胺作為唯一氮源，經高壓蒸汽滅菌后用于富集亞硝胺降解菌）培養基只能以亞硝胺作為唯一氮源，經高壓蒸汽滅菌后用于富集亞硝

18、胺降解菌。（3）亞硝胺菌株的降解效率，可根據反應物的剩余量（即亞硝胺的剩余量）來判斷）亞硝胺菌株的降解效率，可根據反應物的剩余量（即亞硝胺的剩余量）來判斷，設置空白對照的目的是排除亞硝胺自然降解對實驗結果的影響，以保證本實驗的，設置空白對照的目的是排除亞硝胺自然降解對實驗結果的影響，以保證本實驗的結果是由菌株引起的。結果是由菌株引起的。（4）3種亞硝胺降解高效菌株，如研究亞硝胺降解高效菌株混合使用的降解效率，種亞硝胺降解高效菌株，如研究亞硝胺降解高效菌株混合使用的降解效率，可從可從3種亞硝胺中任取兩種，有種亞硝胺中任取兩種，有3種組合，種組合，3種亞硝胺混合種亞硝胺混合1種組合，因此理論上還需

19、種組合，因此理論上還需要設計要設計4組實驗。組實驗。答案答案（1）亞硝酸鹽時間、溫度（）亞硝酸鹽時間、溫度（2）亞硝胺高壓蒸汽（）亞硝胺高壓蒸汽（3）剩余量（含）剩余量（含量）排除亞硝胺自然降解對實驗結果的影響，以保證本實驗的結果是由菌株引量）排除亞硝胺自然降解對實驗結果的影響，以保證本實驗的結果是由菌株引起的（起的（4）4重點題型重點題型2微生物的分離與計數微生物的分離與計數微生物計數的方法專項歸納微生物計數的方法專項歸納1.間接計數法（也叫活菌計數法）間接計數法（也叫活菌計數法）常用的是稀釋涂布平板法。常用的是稀釋涂布平板法。（1）原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來

20、源于樣品）原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多稀釋液中的一個活菌，通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少個活菌。少個活菌。（2）操作：）操作：設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。將待測樣品經一系列設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。將待測樣品經一系列10倍倍稀釋，選擇三個稀釋度的菌液，分別取稀釋，選擇三個稀釋度的菌液，分別取0.1mL接種到已制備好的平板上，然后用無接種到已制備好的平板上，然后用無菌涂布器將菌液涂布于整個平板表面，放在適宜的溫度下培養，計算菌落數。為使菌涂布器將

21、菌液涂布于整個平板表面，放在適宜的溫度下培養，計算菌落數。為使結果接近真實值，可將同一稀釋度的樣液加到三個或三個以上的平板上，經涂布、結果接近真實值，可將同一稀釋度的樣液加到三個或三個以上的平板上，經涂布、培養，計算出菌落平均數。培養，計算出菌落平均數。為了保證結果準確，一般選擇菌落數為為了保證結果準確，一般選擇菌落數為30300個的平板進行計數，若設置的重復個的平板進行計數，若設置的重復組中結果相差太遠，意味著操作有誤，需重新實驗。組中結果相差太遠，意味著操作有誤，需重新實驗。計算公式：每克樣品中的細菌數（計算公式：每克樣品中的細菌數（C/V）M，其中，其中C代表某一稀釋度下平板上代表某一稀

22、釋度下平板上生長的平均菌落數，生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），），M代表稀釋倍代表稀釋倍數。數。提醒提醒此種方法統計的菌落數往往比活菌的實際數目低。這是因為當兩個或多個細胞連在此種方法統計的菌落數往往比活菌的實際數目低。這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。2.顯微鏡直接計數法顯微鏡直接計數法（1）原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的）原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數量。樣品中微生物的數量。（2

23、）方法：用計數板計數。）方法：用計數板計數。（3）缺點：不能區分死菌與活菌。）缺點：不能區分死菌與活菌。（4）操作：將清潔干燥的血球計數板蓋上蓋玻片，再將稀釋的樣品滴在計數板）操作：將清潔干燥的血球計數板蓋上蓋玻片，再將稀釋的樣品滴在計數板上，稍等片刻，待細菌全部沉降到計數室底部再在顯微鏡下統計上，稍等片刻，待細菌全部沉降到計數室底部再在顯微鏡下統計45個中格中的個中格中的細菌數，并求出每個小格所含細菌的平均數，再按公式求出每毫升樣品中所含的細菌數，并求出每個小格所含細菌的平均數，再按公式求出每毫升樣品中所含的細菌數。細菌數。點悟：點悟：（1）計數板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定面積（）計

24、數板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定面積（1mm2）和高（）和高（0.1mm）的計數室，在）的計數室，在1mm2的面積里又被劃分成的面積里又被劃分成25個（或個（或16個）中格，每個中格個）中格，每個中格進一步劃分成進一步劃分成16個（或個（或25個）小格，但計數室都是由個）小格，但計數室都是由400個小格組成的。個小格組成的。（2）計算公式：每毫升原液所含細菌數每小格平均細菌數）計算公式：每毫升原液所含細菌數每小格平均細菌數40010000稀釋稀釋倍數。倍數。3.濾膜法濾膜法以測定飲用水中大腸桿菌的數目為例，將已知體積的水過濾后，將濾膜放于伊紅以測定飲用水中大腸桿菌的數目為例，將已知體積的

25、水過濾后，將濾膜放于伊紅美藍培養基上培養，在該培養基上，大腸桿菌的菌落呈現黑色，可根據培養基美藍培養基上培養，在該培養基上，大腸桿菌的菌落呈現黑色，可根據培養基上黑色菌落的數目，計算出水樣中大腸桿菌的數量。上黑色菌落的數目，計算出水樣中大腸桿菌的數量。【例證】【例證】 （2014全國卷全國卷，39）為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作。回答下列問題：該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作。回答下列問題：（1）該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前，隨機取若）該小組采用稀釋涂布

26、平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干 滅 菌 后 的 空 白 平 板 先 行 培 養 了 一 段 時 間 ， 這 樣 做 的 目 的 是干 滅 菌 后 的 空 白 平 板 先 行 培 養 了 一 段 時 間 ， 這 樣 做 的 目 的 是_；然后，將；然后，將1mL水樣稀釋水樣稀釋100倍，在倍，在3個平板上用涂布法分別接入個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經適當培養后，稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分個平板上的菌落數分別為別為39、38和和37。據此可得出每升水樣中的活菌數為。據此可得出每升水樣中的活菌數為。（2）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌，操作時，

27、接種環通過）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌，操作時，接種環通過滅菌滅菌。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。（3）示意圖）示意圖A和和B中，中，表示的是用稀釋涂布平板法接種培養后得到的結果表示的是用稀釋涂布平板法接種培養后得到的結果。（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養基中并混勻，一部分進行靜置培養，另一）該小組將得到的菌株接種到液體培養基中并混勻，一部分進行靜置培養，另一部分進行振蕩培養。結果發現：振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快。分部分進行振蕩培養。結果發現：振蕩培

28、養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養能提高培養液中析其原因是：振蕩培養能提高培養液中的含量，同時可使菌體與培養液充的含量，同時可使菌體與培養液充分接觸，提高分接觸，提高的利用率。的利用率。解析解析（1）在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養一段時間，檢測）在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養一段時間，檢測培養基平板滅菌是否合格；每升水樣中的活菌數為：（培養基平板滅菌是否合格；每升水樣中的活菌數為：（393837）/338，再除，再除以以0.1乘以乘以100，得到，得到1毫升中的菌數，再乘以毫升中的菌數，再乘以1000就是就是1升中的菌數，故為升中的菌

29、數，故為3.8107。（2）用平板劃線法應先將接種環灼燒滅菌再劃線。第二次及以后的劃線時，總是從）用平板劃線法應先將接種環灼燒滅菌再劃線。第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，達到稀釋的目的，使得最后能夠得到單個菌落。上一次劃線的末端開始劃線，達到稀釋的目的，使得最后能夠得到單個菌落。（3）根據圖示可知，）根據圖示可知，B為稀釋涂布平板法接種后培養得到的菌落。為稀釋涂布平板法接種后培養得到的菌落。（4）振蕩的作用相當于攪拌，可以提高培養液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培）振蕩的作用相當于攪拌，可以提高培養液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養液充分接觸，提高了營養物質的利用率，因

30、此振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌養液充分接觸，提高了營養物質的利用率，因此振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快。生長速度快。答案答案（1）檢測培養基平板滅菌是否合格）檢測培養基平板滅菌是否合格3.8107（2）灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落）灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落（3）B（4）溶解氧營養物質）溶解氧營養物質1.（2019河北衡水中學模擬）河北衡水中學模擬）“貴州茅臺貴州茅臺”被譽為我國的國酒，雖然工藝并不復雜，被譽為我國的國酒，雖然工藝并不復雜，但是大家公認其獨特品質的關鍵是當地的獨特氣候、水質、以及當地空氣或環境但是大家公認其獨特品質的關鍵是當地的獨特氣候、水

31、質、以及當地空氣或環境中存在獨特的微生物。為了提取當地環境中的獨特菌種，某研究小組以優質高粱中存在獨特的微生物。為了提取當地環境中的獨特菌種，某研究小組以優質高粱、上等小麥為原料，制作培養基，搜集、分離空氣中的微生物。回答下列問題：、上等小麥為原料，制作培養基，搜集、分離空氣中的微生物。回答下列問題：（1）該培養基按成分分類，屬于）該培養基按成分分類，屬于（“天然天然”或或“合成合成”）培養基，培養基在）培養基，培養基在接種微生物前，必須先進行接種微生物前，必須先進行滅菌。滅菌。（2）將上述培養基暴露在空氣中培養一段時間后，取）將上述培養基暴露在空氣中培養一段時間后，取10g該培養基用無菌水制

32、成該培養基用無菌水制成100mL樣品溶液，再將樣品溶液稀釋樣品溶液，再將樣品溶液稀釋104倍后，各取樣品溶液倍后，各取樣品溶液0.1mL在在5個細菌培養個細菌培養基平板上接種，培養一段時間后，平板上長出的細菌菌落數分別為基平板上接種，培養一段時間后，平板上長出的細菌菌落數分別為13、156、462、178和和191。該過程采取的接種方法是。該過程采取的接種方法是，每克培養基樣品中的細菌，每克培養基樣品中的細菌數量為數量為個；與血細胞計數板相比，此計數方法測得的細菌數目較實際值個；與血細胞計數板相比，此計數方法測得的細菌數目較實際值，原因是，原因是_。（3）生產酒的主要微生物是酵母菌，其代謝類型

33、是）生產酒的主要微生物是酵母菌，其代謝類型是，其產物乙醇，其產物乙醇與與試劑反應呈現灰綠色，這一反應可用于乙醇的檢驗。試劑反應呈現灰綠色，這一反應可用于乙醇的檢驗。解析解析（1）題述培養基是由優質高粱、上等小麥等化學成分不明確的天然物質配制而）題述培養基是由優質高粱、上等小麥等化學成分不明確的天然物質配制而成的，屬于天然培養基。培養基在接種微生物前，必須先進行高壓蒸汽滅菌。（成的，屬于天然培養基。培養基在接種微生物前，必須先進行高壓蒸汽滅菌。（2）根）根據題意可知，題中所述的過程采取的接種方法是稀釋涂布平板法；為了計數結果準確據題意可知，題中所述的過程采取的接種方法是稀釋涂布平板法；為了計數結

34、果準確，統計的菌落數應介于，統計的菌落數應介于30300之間，故應選擇細菌菌落數為之間，故應選擇細菌菌落數為156、178和和191的平板計的平板計數。稀釋涂布平板法計數微生物的計算公式：單位樣品中的菌落數（數。稀釋涂布平板法計數微生物的計算公式：單位樣品中的菌落數（CV）M，其中其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數為（代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數為（156178191）3175，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積為代表涂布平板時所用的稀釋液的體積為0.1mL，M代表稀釋倍數代表稀釋倍數104，所以每克該培，所以每克該培養基樣品中的菌落數為養基樣品中的菌落數為1750.1104100101.75108