1、清大天一個性化細胞培養基針對在生物制藥行業使用個性化細胞培養基的必然趨勢以及我國生物醫藥行業對個性 化細胞培養基的潛在需求，清大天一依托于在細胞培養基研發和動物細胞大規模培養方面具 有豐富經驗的研發團隊， 潛心研究，開發出了國有個性化細胞培養基，成功應用于生物制藥企業，獲得一致的市場好評。一.清大天一個性化細胞培養基簡介清大天一個性化細胞培養基主要是在基礎培養基如DMEM、199、MEM、MBRM、BBSM的基礎上，針對生物制藥中常用動物細胞基質而研制開發的，主要產品及其特點（參見表1）。表1清大天一個性化細胞培養基主要特點產品名稱產品代 號特點DMEMMD205改良DMEM，具有較強細胞維持

2、能力， 可增加收液次數，提高病毒表達率。MD208DMEM培養基的改良低血清培養基，可用于CHO細胞的低血清培養。MD210改良DMEM，適用于 Marc145細胞培養。199MD502改良199,具有高緩沖性能，提高病毒滴度MD504199培養基的改良低血清培養基?？捎糜赩ero細胞、地鼠腎細胞的低血清培養。MD505199培養基的改良低血清培養基。可用于Vero細胞微載體反應器低血清培養。MEMMD610適用于二倍體細胞的培養MD611MEM培養基的改良低血清培養基。可用于BHK21細胞的低血清培養。MBRMMD900不含苯酚紅，可用于 Marc145細胞微載體反應器低血清懸浮培養。BBS

3、MMD910可用于BHK21細胞反應器低血清懸浮培養。SAF-CHO-G-001SAF106無血清無動物來源組分細胞培養基，CHO懸浮細胞生長培養基，不含苯酚紅。SAF-CHO-F-001SAF107無血清無動物來源組分細胞培養基，CHO細胞培養基添加劑，不含苯酚紅。SAF-NS0-G-001SAF110無血清無動物來源組分細胞培養基，NS0懸浮細胞生長培養基。二.清大天一個性化細胞培養基應用實例應用一：BHK21細胞生物反應器懸浮培養基和維持液的應用細胞培養基：清大天一 BHK21細胞懸浮培養細胞培養基MD910/MD920。MD910 :用于BHK21細胞增殖培養，血清濃度可降低為3%。M

4、D920 ,用于病毒培養，無需使用血清和水解乳蛋白。生物反應器：ClavorusTM650L反應器進行馴化培養，挑選良好的馴化細胞進行細胞克隆，并進行口蹄疫病毒敏感性實驗，篩選出口蹄疫病毒敏感性懸浮培養BHK21細胞，確定為BHK21C13-BR細胞，作為口蹄疫疫苗生產的種子細胞。500L反應器：使用反應器逐級放大技術，BHK21細胞密度可達1-3 x 16Cells/ml。抗原產量：口蹄疫抗原產量是轉瓶培養的10-20倍，換算為單位細胞產量為轉瓶培養的3-7倍。應用二：Marc145細胞微載體培養基的應用細胞培養基：清大天一反應器Marc145細胞專用培養基 MD900微載體：cytodex

5、-1 , GEHC , 8-10g/L生物反應器：ClavorusTM 120L反應器細胞密度可達3.6 x 10cells/ml工藝路線：轉瓶細胞直接接種培養工藝應用二：Vero細胞微載體培養基的應用某企業使用清大天一反應器高密度培養基（細胞培養：細胞培養后期培養液灌流體積可達到密度達到1 x 10cells/ml以上。病毒培養收獲：接種狂犬病毒后可連續收液20天以上，收獲病毒液使用小鼠腦內法檢測病毒毒力在9.0以上。疫苗制備：使用工作體積為10L的反應器，收獲的病毒液制備狂犬疫苗，每罐可制備23萬人份，疫苗效力效價在4IU/瓶以上。應用四：Vero細胞微載體培養基的應用細胞培養基：清大天一

6、反應器咼密度Vero細胞專用培養基微載體：GE 的 Cytodex-1 5g/L細胞培養體積：65LVero細胞密度在4.5 x 10ells/ml時的照片：均勻、致密。應用五：Vero細胞微載體培養基的應用細胞培養基：清大天一反應器咼密度Vero培養基。微載體：GE 的 cytodex-1。在5升B.Braun生物反應器灌注培養Vero細胞，120hr時微載體上的細胞如下圖，144hr細胞密度提高至7.1 x 1&cells/ml。左: 5升反應器培養 Vero細胞，120hr, 100x應用六：無血清無動物組分的研究050100150200Time（小時）)lm/ sle 密胞 細右：5升

7、反應器灌注培養CHO細胞培養基全懸浮培養細胞株：CHO工程株(上海某抗體藥物公司構建)。無血清培養基：A :清大天一公司的 SAF-CH0-G-003 ;B :國外某培養基公司的無血清培養基實驗方法：5X 10cells/ml接種，每天計數，留樣測定IgG。結論：(1)批培養的最高細胞密度均可達到4.5 x 106cells/ml,細胞存活率基本一致。(2) IgG產量比較抗體濃度：清大天一：148ug/ml國外某公司：114ug/ml。清大天一提高 30%。00Vero細胞的生長曲線CHO細胞表達人源化單克隆抗體6050403020010國外某公司345Time/d%/yLDav706090

8、8020JTl/50 11111111012345678Time/d細胞活力比較0清大天一ii678160o2804001234567Time/dIgG產量比較抗體濃度應用七：無血清無動物組分 CHO細胞培養基在200升Wave反應器中培養 CHO細胞生產人 源化抗體細胞培養基：清大天一無血清無動物組分CHO培養基及CHO營養添加劑(無酚紅)。細胞培養：在200升的Wave反應器中懸浮培養 CHO細胞, 活細胞密度達到1 x 10cells/ml，連續灌注1個月以上。抗體表達情況：抗體表達水平超過進口的無血清培養基。應用八：營養添加劑在流加培養CHO細胞表達抗體中的作用00246 810分組實

9、驗：批培養：對照培養（con trol）流加培養：SAF-CHO-Feed-1營養添加劑實驗方法：每天取樣，計數、測定IgGtime/day當細胞密度達到 3 x 1&ells/ml左右時，隔天補加定量的營養添加劑。細胞生長和抗體生成情況應用九：EPO專用細胞培養基培養 CHO細胞生產重組促紅細胞生成素培養基：清大天一 EPO生產專用細胞培養基；反應器： NBS7.5L反應器，FibraCel? Disks 細胞培養：CHO細胞密度約為6-8 x 10cells/ml。EPO產量（轉瓶）：多收液1次，EPO產量提高了 27.5%。應用十：ST細胞專用細胞培養基的應用生物反應器：B.Braun反應器，工作體積5L 微載體：Cytod