1、精選優質文檔-傾情為你奉上氣相色譜GC1. 氣相色譜五個組成部件載氣系統：包括氣源、氣體凈化和氣體流速控制部件進樣系統：包括進樣器和汽化室色譜柱與柱箱：包括控溫裝置檢測系統：包括檢測器、放大器、檢測器的電源控溫裝置記錄與數據處理系統：積分儀或色譜工作站2. 基本名詞基線：在正常操作條件下，僅有載氣通過檢測器系統時所產生的響應信號的曲線。 基線漂移：指基線隨時間定向的緩慢變化 基線噪聲：指由各種因素所引起的基線起伏保留值：表示試樣中各組分在色譜柱中的滯留時間的數值 死時間、保留時間、調整保留時間 三者關系式為： 死體積、保留體積、調整保留體積 三者關系式為： 相對保留值：指某組分2的調整保留值與

2、另一組分1的調整保留值的比。（相對保留值指要柱溫、固定相性質不變，即使柱徑、柱長、填充情況及流動相流速有所變化，其值也不會改變 標準偏差：0.607倍峰高處色譜峰寬度的一半 半峰寬度：又稱區域寬度，峰高為一半處的寬度 峰底寬度：自色譜峰兩側的轉折點所作切線在基線上的截距3. 利用色譜流出曲線可以解決以下問題 根據色譜峰的位置（保留值）可以進行定性檢定 根據色譜峰的面積或峰高可以進行定量測定 根據色譜峰的位置及其寬度，可以對色譜柱分離情況進行評價4. 分配系數：在一定溫度下，組分在兩相間分配達到平衡時的濃度（單位：g / mL）比K 分配比:在一定溫度下，組分在兩相間分配達到平衡時的質量比(容量

3、因子容量比) k分配比與保留時間之間的關系：5. 塔板理論的假設: 在每一個平衡過程間隔內，平衡可以迅速達到；將載氣看作成脈動（間歇）過程；試樣沿色譜柱方向的擴散可忽略；每次分配的分配系數相同。塔板數公式為：6 速率理論：速率方程（范弟姆特方程式）H = A + B/u + C·u 減小ABC 三項可提高柱效 H減小n增大 A - 渦流擴散項A = 2dp dp：固定相的平均顆粒直徑 ：固定相的填充不均勻因子 B/u - 分子擴散項B = 2 Dg ：彎曲因子，填充柱色譜< 1。Dg：試樣組分分子在氣相中的擴散系數（cm2·s-1） C ·u - 傳質阻力項

4、：傳質阻力包括氣相傳質阻力Cg+液相傳質阻力Cl7. 分離度：作為色譜柱的分離能效指標，其定義為相鄰兩組分色譜峰保留值之差與兩個組分色譜峰峰底寬度總和之一半的比值8. 色譜分離基本方程： 為相對保留值 k為分配比9. 載氣及其流速的選擇：u最佳 =10. 柱溫的選擇：一般選擇的基本原則是：在使最難分離的組分有盡可能好的分離高度的前提下，盡可能采取較低溫度，但以保留時間適宜及不拖尾為度。選擇柱溫的根據是混合物的沸點范圍，固定液的配比和鑒定器的靈敏度。提高柱溫可縮短分析時間；降低柱溫可使色譜柱選擇性增大，有利于組分的分離和色譜柱穩定性提高，柱壽命延長。一般采用等于或高于數十度于樣品的平均沸點的柱溫

5、為較合適，對易揮發樣用低柱溫，不易揮發的樣品采用高柱溫。11. 對固定液的要求：揮發性小；熱穩定性好；對試樣各組分有適當的溶解能力；具有高的選擇性；化學穩定性好12. 分子間的相互作用力：靜電力、誘導力、色散力、氫鍵13. 相似相容原理對色譜流出規律：非極性組分：一般選用非極性固定液，組分按沸點次序流出色譜柱, 沸點低的先出峰極性組分：一般選用極性固定液，組分按極性大小順序流出色譜柱, 極性小的先出峰極性-非極性混合物：一般選用極性固定液，非極性組分先出峰,極性組分后出峰能形成氫鍵的組分：一般選用極性或氫鍵型固定液，不易形成氫鍵的先出峰, 易形成氫鍵的后出峰14. 氣相色譜檢測器 熱導池檢測器

6、TCD: 價格便宜,性能穩定,線性范圍寬,對無機物和有機物都能相應，例如甲烷、CO2等，應用廣泛，靈敏度較低。 (苯)電子捕獲檢測器ECD：只對具有電負性的物質有響應，含有鹵素、硫、磷、氮、氧的物質具有電負性越強，響應靈敏度就越高。 氫火焰離子化檢測器FID：對有機化合物具有很高的靈敏度；只適用痕量有機物分析；正庚烷火焰光度檢測器FPD：對含磷、含硫的化合物有高選擇性和高靈敏度的檢測器15. 色譜定性分析：用已知純物質對照定性；利用文獻保留值定性（利用相對保留值r21定性）；用保留指數定性 16. 色譜定量分析：歸一化法、內標法、內標標準曲線法、外標法（標準曲線法）歸一化法：如果各組分相對校正

7、因子值很接近，可用峰面積歸一化： 內標法：準確稱取m克樣品，加入一定量的某種純物質m s 克，作為內標物，將（m + m s）混合樣品注射到儀器中，記錄流出曲線。17氣相色譜應用的范圍：一般地說，只要沸點在500以下，熱穩定性良好，相對分子質量在400以下的物質，原則上都可采用氣相色譜法高效液相色譜HPLC1. HPLC與GC差別：兩者的主要區別可歸結于流動相的不同，GC能氣化、熱穩定性好、且沸點較低的樣品,高沸點、揮發性差、熱穩定性差、離子型及高聚物的樣品不可檢測,占有機物的20%;流動相為惰性氣體加溫操作。HPLC:溶解后能制成溶液的樣品,不受樣品揮發性和熱穩定性的限制，分子量大、難氣化、

8、熱穩定性差及高分子和離子型樣品均可檢測用途廣泛,占有機物的80%，流動相為液體，室溫，高壓（液體粘度大，峰展寬小）選用細顆粒填料可獲得高柱效；流動相流速低，有利于達到高柱效；選用黏度小的流動相有利于提高柱效；溫度的影響（適當提高柱溫以降低流動相黏度）；液膜厚度的影響2. 主要類型及其分離原理液 液分配色譜法及化學鍵合相色譜：組分在固定相和流動相上的分配液 固色譜法：組分在固定相吸附劑上的吸附于解吸離子對色譜法：將一種 ( 或多種 ) 與溶質分子電荷相反的離子 ( 稱為對離子或反離子 ) 加到流動相或固定相中，使其與溶質離子結合形成疏水型離子對化合物，從而控制溶質離子的保留行為。 離子交換色譜法

9、：組分在固定相上發生的反復離子交換反應，組分與離子交換劑之間親和力的大小與離子半徑、電荷、存在形式等有關，親和力大，保留時間長離子色譜法：離子交換原理空間排阻色譜法：按分子大小分離，小分子可以擴散到凝膠空隙，由其中通過，出峰慢中等分子只能通過部分凝膠空隙，中速通過，而大分子被排斥在外，出峰最快3. 在選擇流動相時應注意一下幾點：流動相純度、應避免使用會引起柱效損失或保留特性變化的溶劑、對試樣要有適宜的溶解度、溶劑的黏度小些為好、應與檢測器相匹配.4. 主要部件：進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統5. 檢測器的類型和應用對象紫外檢測器：該檢測器適用于對紫外光（或可見光）有吸收性

10、能樣品的檢測。其特點：使用面廣（如蛋白質、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用）、靈敏度高（檢測下限為10-9gml）、線性范圍寬、對溫度和流速變化不敏感。可檢測梯度溶液洗脫的樣品。 示差折光檢測器：凡具有與流動相折光率不同的樣品組分，均可使用示差折光檢測器檢測。目前，糖類化合物的檢測大多使用此檢測系統。這一系統通用性強、操作簡單，但靈敏度低（檢測下限為10-9gml），流動相的變化會引起折光率的變化，因此，它既不適用于痕量分析，也不適用于梯度洗脫樣品的檢測。 熒光檢測器：凡具有熒光的物質，在一定條件下，其發射光的熒光強度與物質的濃度成正比。因此，這一檢測器只適用于具有熒光的有機化合物（

11、如多環芳烴、氨基酸、胺類、維生素和某些蛋白質等）的測定，其靈敏度很高（檢測下限為10-1210-14gml），痕量分析和梯度洗脫作品的檢測均可采用。 電導檢測器：根據物質在某些介質中解離后所產生電導變化來測定解離物質含量蒸發光散射檢測器：基于不揮發性質對光的散射現象，通用性較強電位分析法1. 能斯特方程：表示電極電位E與溶液中對應離子活度之間存在的簡單關系 ； 2. 測定試樣溶液的 3. 膜電位：一般是基于內部溶液與外部溶液之間產生的電位差 4. 離子選擇性電極(ISE)種類ISE原電極晶體膜電極均相膜電極、非均相膜電極硅橡膠非晶體膜電極剛性基質電極氫離子、鋰離子流動載體電極液膜、冠醚敏化電極

12、氣敏電極氨電極、硫化氫電極酶電極葡萄糖電極、組織電極6. 測定離子活度的方法：標準曲線法、標準加入法7. TISAB總離子強度調節緩沖溶液典型組成：1mol/L的NaCl，使溶液保持較大穩定的離子強度；0.25mol/L的HAc和0.75mol/L的NaAc, 使溶液pH在5左右；0.001mol/L的檸檬酸鈉, 掩蔽Fe3+、Al3+等干擾離子。 8. 影響測定的因素：溫度、電動勢測量、干擾離子、溶液的pH、被測離子的濃度、響應時間、遲滯效應9. 二級微商法求滴定終點 式中：V為時所需滴定劑的體積；和為滴定終點前后兩點的二級微商值；為前后兩點的滴定劑體積差伏安分析法1. 濃差極化：電極上有電

13、流通過時，電極表面附近的反應物或產物濃度變化引起的極化。 產生條件：極化電極面積要小(面積小)，被測物濃度要低(濃度低)，溶液靜止(不攪拌)2. 影響擴散電流的因素：毛細管特性常數、溶液組分、溫度的影響3. 極譜定量方法：直接比較法、標準曲線法、標準加入法如下公式4. 可逆波與不可逆波的區別：電極反應是否出現明顯的過電位是否表現出電化學極化；可逆的反應快，擴散慢，不可逆反應慢，擴散快5. 干擾電流及其消除方法殘余電流：作圖法扣除或儀器的殘余電流補償裝置抵消遷移電流：通常是加入支持電解質或惰性電解質極大：加入可使表面張力均勻化的極大抑制劑，通常是一些表面活性物質如明膠等氧波：在酸性溶液中通入惰性

14、氣體，其他溶液中將氧還原或者去除氫波：在中性或堿性溶液中測定7. 各種方法的掃描譜圖庫侖分析法1. 法拉第電解定律 法拉第常數：F = 96487 ；n 為電解反應時電子的轉移數2. 庫侖分析法的條： 不論哪種庫侖分析法，均要求在工作電極上除被測溶液外，沒有其他任何電極發生；且電流效率必須是100%，采用控制電位庫侖分析和恒電流庫侖滴定達到。3. 控制電位電解法： 和分別為陽極電位和陰極電位，和為陽極和陰極的超電勢，U為分解電壓，R為電解池線路的內阻，i 為通過電解池的電流4. 析出順序：陽極電位越小越先析出，陰極電位越大越先析出；陰陽兩極電位有差可以完全析出，濃度低于10-7mol/L時為完

15、全析出5. 氫氧庫侖計：氣體庫侖計，電解前后刻度管中液面之差就是氫、氧氣體的總體積。在標準狀態下，沒庫侖電荷量析出0.17412mL氫、氧混合氣體。設電解后體積為V(mL) 則： 6. 庫侖滴定：第一類被測定物直接在電極上起反應 第二類在試液中加入大量物質，使此物質經電解反應后產生一種試劑，然后被測定物與所產生的試劑起反應。原子發射光譜分析1. 原子光譜為線狀：原子的各個能級是不連續的，電子的躍遷也是不連續的，這就是原子光譜是線狀光譜的原因。2. 識別特征光譜來鑒別元素的存在（定性分析），利用譜線的強度來測定元素的含量（定量分析）3.發射光譜分析的過程：使試樣在外界能量的作用下轉變成氣態原子，

16、并使氣態原子的外層電子激發至高能態，當從較高能級躍遷到較低的能級時，原子將釋放出多余的能量而發射出特征譜線4. 光譜分析儀器：光源（樣品從此進入）、分光系統（光譜儀）、觀測系統5. 觀測設備：觀測譜片的光譜投影儀、測量譜線黑度的測微光度儀、測量譜線間距的比長儀等6. 光譜的定性分析：標準試樣光譜比較法、鐵光譜比較法7. 定性分析操作過程：試樣處理、攝譜、檢查譜線8. 定量分析： 取對數有 從而可得線性關系9. 內標法基本公式： DS = g lg R = g b1lgc + g lg A R為譜線的相對強度，DS 為黑度差，g為感光板的反襯度，lg R對lg c所作的曲線即為相應的工作曲線10

17、. 內標元素與分析線的選擇要點： a.原來試樣內應不含或僅含極少量所加內標元素。亦可選用此基體元素作為內標元素。 b.要選擇激發電位相同或接近的分析線對 c.兩條譜線的波長應盡可能接近 d.所選線對的強度不應相差過大 e.所選用的譜線應不受其它元素譜線的干擾，也應不是自吸嚴重的譜線 f.內標元素與分析元素的揮發率相近11. 光譜半定量分析方法： 譜線呈現法：但分析元素含量降低時，該元素譜線也逐漸減少 譜線強度比較法：配濃度梯度的標準液，比較靈敏線的黑度 均稱線對法：找與待測物質激發電位接近物質的譜線進行比較原子吸收光譜分析1. 譜線變寬：自然寬度、多普勒變寬、壓力變寬（勞倫茲變寬，共振變寬）2

18、. 銳線光源：能發射出譜線半寬度很窄的發射線的光源3. 原子吸收分光光度計組成部件：光源：提供待測元素的特征光譜，獲得較高的靈敏度和準確度原子化系統：將試樣中的待測元素轉變成原子蒸汽 火焰原子化裝置：霧化器、燃燒器、火焰 石墨爐原子化裝置：干燥、灰化(去除基體)、原子化、凈化(去除殘渣)光學系統：單色器將待測元素的共振線與鄰近線分開檢測系統：由檢測器、放大器、對數變換器、顯示記錄裝置所構成4. 通帶寬度W：指通過單色器出射狹縫的某標稱波長處的輻射范圍，當倒色散率(D)一定時，可通過選擇狹縫寬度(S)來確定：W = D×S5. 定量分析方法標準曲線法（由標準試樣數據獲得線性方程，將測定

19、試樣的吸光度A 數據帶入計算，彎曲由壓力變寬導致）標準加入法（消除基體干擾；不能消除背景干擾）由和可得6. 干擾類型：物理干擾、化學干擾、光譜干擾7. 光譜干擾及其抑制：光譜干擾時由于分析元素吸收線與其他吸收線或輻射不能完全分開而產生的干擾，包括譜線干擾(吸收線重疊，光譜通帶內存在的非吸收線)和背景干擾。 消除：吸收線重疊，另選其他無干擾的分析線進行測定或預先分離干擾元素；非吸收線，減小狹縫或適當減小燈電流。 校正背景吸收：鄰近線校正法、用于試樣溶液有相似組成的標準溶液來校正、用分離基體的辦法來消除影響8. 測定條件的選擇：分析線的選擇、空心陰極燈電流、火焰、燃燒器高度、狹縫寬度9. 原子熒光光譜法：儀器與原子吸收分析相同，但光源、原子化器與分光系統不是排在一條直線上紫外吸收光譜分析1. 分子能量E： 、分別表示電子能、振動能和轉動能；分子吸收能量具有量子化的特征，即分子只能吸收等于兩個能級之差的能量2. 由于電子能級躍遷而產生的吸收光譜主要出于紫外及可見光區(200780nm)。這種分子光譜稱為電子光譜或紫外及可見光譜3. 一般分光光度計的分辨率，觀察到的為合并成較寬的帶，所以分子光譜是一種帶狀光譜4. 有機化合物三種典型吸收： 飽和烴及其衍生物：飽和烴躍遷；飽和烴衍