1、精密度精密度S Sr準確度準確度E Er選擇性選擇性標準曲線標準曲線線性范圍線性范圍靈敏度靈敏度檢出限檢出限吸收峰：吸收峰：曲線上吸光度最大的地方，它所對應的波長稱最大吸收曲線上吸光度最大的地方，它所對應的波長稱最大吸收波長（波長（maxmax）。）。谷：谷：峰與峰之間吸光度最小的部位，該處的波長稱最小吸收波長峰與峰之間吸光度最小的部位，該處的波長稱最小吸收波長（minmin）。）。肩峰肩峰（shoulder peakshoulder peak）：在一個吸收峰旁邊產生的一個曲折。）：在一個吸收峰旁邊產生的一個曲折。末端吸收末端吸收（end absorptionend absorption）：只

2、在圖譜短波端呈現強吸收而不）：只在圖譜短波端呈現強吸收而不成峰形的部分。成峰形的部分。1.1.吸收峰吸收峰 2.2.谷谷 3.3.肩峰肩峰 4.4.末端吸收末端吸收 根據物質分子對200760nm這一范圍的光的吸收特性建立起來的定性、定量和結構分析的方法。 朗伯朗伯比耳定律數學表達式比耳定律數學表達式 A-lg（It/I0)= b c 式中式中A A：吸光度；描述溶液對光的吸收程度；：吸光度；描述溶液對光的吸收程度； b b：液層厚度：液層厚度( (光程長度光程長度) )，通常以，通常以cmcm為單位；為單位； c c：溶液的摩爾濃度，單位：溶液的摩爾濃度，單位molLmolL； ：摩爾吸光系

3、數，單位：摩爾吸光系數，單位LmolLmolcmcm；透光率透光率T T : : 描述入射光透過溶液的程度描述入射光透過溶液的程度: : T = I t/ I0吸光度吸光度A A與透光率與透光率T T的關系的關系: : A lg T 吸光系數的幾種表示方法吸光系數的幾種表示方法CbA abCA bCEA1%1cm MaE10 101%1cm摩爾吸光系數摩爾吸光系數在數值上等于在數值上等于濃度為濃度為1 mol/L、液層厚度為、液層厚度為1cm時該溶液在某一波長下的吸光度；時該溶液在某一波長下的吸光度；吸光系數吸光系數a(Lg-1cm-1）相當于）相當于濃度為濃度為1 g/L、液層厚度為、液層厚

4、度為1cm時該溶液在某一波長下的吸光度；時該溶液在某一波長下的吸光度；比吸光系數指物質的質量分數為比吸光系數指物質的質量分數為1%，液層厚度為，液層厚度為1cm時該時該溶液在某一波長下的吸光度。溶液在某一波長下的吸光度。某一溶液在測量波長下透光率值為0.100. (a)該溶液的吸光度是多少？ (b)如果該溶液的濃度是0.02g/L,并在1CM的比色皿中測量透光率，在測定波長下，該化合物的比吸收系數是多少？ (c)如果該化合物的分子量為100，它的摩爾吸光系數是多少？ (d)計算該溶液在5CM的比色皿中所預期的透光度？ 紫外紫外可見分光光度計基本組成可見分光光度計基本組成 光源光源單色器單色器樣

5、品室樣品室檢測器檢測器顯示顯示1. 1. 光源光源 在整個紫外光區或可見光譜區可以發射連續光譜，具有在整個紫外光區或可見光譜區可以發射連續光譜，具有足夠的輻射強度、較好的穩定性、較長的使用壽命。足夠的輻射強度、較好的穩定性、較長的使用壽命。 可見光區：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在可見光區：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在3503501000 nm1000 nm。 紫外區：氫、氘燈。發射紫外區：氫、氘燈。發射160160375 nm375 nm的連續光譜。的連續光譜。 將光源發射的復合光分解成單色光并可從中選出一任將光源發射的復合光分解成單色光并可從中選出一任 波長單色光的光學系統。波長單色光的

6、光學系統。 2.2.單色器單色器3. 3. 樣品室樣品室 樣品室放置各種類型的吸收池樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應的池架附件。吸（比色皿）和相應的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。收池主要有石英池和玻璃池兩種。在紫外區須采用石英池，可見區一在紫外區須采用石英池，可見區一般用玻璃池。般用玻璃池。4. 4. 檢測器檢測器 利用光電效應將透過吸收池的利用光電效應將透過吸收池的光信號變成可測的電信號，常用的光信號變成可測的電信號，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。有光電池、光電管或光電倍增管。5. 5. 結果顯示記錄系統結果顯示記錄系統 檢流計、數字顯示、微機進行檢流計、數字顯示

7、、微機進行儀器自動控制和結果處理。儀器自動控制和結果處理。原子吸收與分子吸收 氣相色譜氣相色譜 - - 用氣體作流動相用氣體作流動相液相色譜液相色譜 - - 用液體作流動相用液體作流動相按流動相所處的狀態分類按流動相所處的狀態分類氣氣固色譜固色譜氣氣液色譜液色譜液液固色譜固色譜液液液色譜液色譜色譜法的分類色譜法的分類超臨界流體色譜超臨界流體色譜一、色譜流出曲線或色譜圖一、色譜流出曲線或色譜圖 以檢測器對組分的響應信號為縱坐標，流出時間以檢測器對組分的響應信號為縱坐標，流出時間( (或流或流出體積出體積) )為橫坐標作圖所得的曲線，這種曲線即稱為色譜流出為橫坐標作圖所得的曲線，這種曲線即稱為色譜

8、流出曲線，也稱色譜圖。曲線，也稱色譜圖。 Rf (t, V) Rf (t, V)二、色譜流出曲線構成：二、色譜流出曲線構成：由由基線和色譜峰基線和色譜峰組成。組成。基基 線：指線：指僅有流動相通過而沒有待測物，檢測器響應信號隨僅有流動相通過而沒有待測物，檢測器響應信號隨流出時間的變化流出時間的變化，穩定的基線應是一條水平直線。，穩定的基線應是一條水平直線。色譜峰：在色譜峰：在基線上突起的部分基線上突起的部分，它是由引入流動相中被測物引，它是由引入流動相中被測物引起的。起的。描述色譜峰三種參數峰高(或峰面積) 峰的大小區域寬度 峰的形狀保留值 峰的位置 (時間t、體積v) 色譜峰色譜峰高斯分布曲

9、線高斯分布曲線 色譜流出曲線可以得到那些信息？1.1.樣品含最少組分樣品含最少組分( (峰個數峰個數) ) 2.2.根據色譜峰的保留值可以進行定性分析根據色譜峰的保留值可以進行定性分析3.3.根據色譜峰的面積或峰高可以進行定量分析根據色譜峰的面積或峰高可以進行定量分析4.4.根據色譜峰的位置和區域寬度可對色譜柱效根據色譜峰的位置和區域寬度可對色譜柱效能進行評價能進行評價 通常用通常用R Rs s = 1.5 = 1.5 作為相鄰兩色譜峰完全分開的指標作為相鄰兩色譜峰完全分開的指標 R R=0.8=0.8：兩峰的分離程度可達：兩峰的分離程度可達89%89%；R R=1=1：分離程度：分離程度98

10、%98%；R R=1.5=1.5：達：達99.7%99.7%（相鄰兩峰完全分離的標準）。（相鄰兩峰完全分離的標準）。 R=0.75 R=1 R=1.5 R=0.75 R=1 R=1.5意義意義: :分離度是色譜圖中相鄰兩峰分離程度的量度分離度是色譜圖中相鄰兩峰分離程度的量度 分離度 此外還配有自動進樣及數據處理等輔助裝置。此外還配有自動進樣及數據處理等輔助裝置。 色譜柱是液相色譜的心臟部件，它包括色譜柱是液相色譜的心臟部件，它包括柱管柱管與與固定相固定相兩部分。兩部分。 柱管材料有玻璃、不銹鋼、鋁、銅及內襯光柱管材料有玻璃、不銹鋼、鋁、銅及內襯光滑的聚合材料的其他金屬。玻璃管耐壓有限，故滑的聚

11、合材料的其他金屬。玻璃管耐壓有限，故金屬管用得較多。金屬管用得較多。 一般色譜柱長一般色譜柱長1030cm，內徑為，內徑為45mm，凝膠色譜柱內徑凝膠色譜柱內徑312mm，制備柱內徑較大，可，制備柱內徑較大，可達達25mm 以上。以上。 例例: :已知混合物中乙基苯、鄰二甲苯、間二甲苯的峰面積和校正因子見下表已知混合物中乙基苯、鄰二甲苯、間二甲苯的峰面積和校正因子見下表, ,死時間為死時間為0.5min,0.5min,用歸一化法測定混合物中的乙基苯、鄰二甲苯、間二甲苯用歸一化法測定混合物中的乙基苯、鄰二甲苯、間二甲苯的含量。的含量。乙基苯鄰二甲苯間二甲苯保留時間3.005.009.00A (mVmin)140120105fis0.960.970.98解：乙基苯 =1400.96/(1400.96+1200.97+1050.98)=38.0%同理，求出鄰二甲苯i=32.9% 間二