1、臨床實驗室生物安全導則衛生部臨床檢驗中心申子瑜病原微生物實驗室安全管理條例病原微生物實驗室安全管理條例（征求意見稿）（征求意見稿）第一章第一章 總總 則則 為了加強病原微生物實驗室(以下稱實驗室)安全管理，保護實驗室工作人員和公眾的健康，制定本條例。 本條例所稱病原微生物：是指能夠使人或者動物致病的微生物。 條例目標及適用范圍 保護實驗室工作人員、社會公眾和環境 適應于從事病原微生物研究、教學、生產、診斷檢測等所有實驗室 國家對病原微生物按照其對人類和動物以及環境的危害程度實行分類管理，對實驗室根據其對病原微生物的防護水平實行分級管理。 國家實行統一的實驗室生物安全標準。 病原微生物的分類和管

2、理l l、 國家將病原微生物分為四類國家將病原微生物分為四類2 2、第三類、第四類稱為高致病性病原微生物、第三類、第四類稱為高致病性病原微生物3 3、衛生部負責制定并調整四類病原微生物、衛生部負責制定并調整四類病原微生物 的種類的種類 第一類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人或者動物疾病的微生物。 第二類病原微生物，是指能夠引起人或者動物疾病，發生實驗室暴露可能引起感染，但不會引起嚴重危害，且能夠有效實施預防和治療的微生物。 第三類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，但不易在人或者動物間傳播，且能夠有效實施預防和治療的微生物。 第四類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴重疾病，

3、容易在人或者動物間傳播，或者沒有有效的預防和治療措施的微生物。 第三類、第四類病原微生物統稱為高致病性病原微生物。 國家根據實驗室防護水平，將實驗室分為一級、二級、三級、四級。 臨床診斷、檢測檢驗工作可以在二級實驗室中進行。但是，發現高致病性病原微生物的其病原學的分離鑒定工作應當轉移到三級以上的實驗室中進行。中華人民共和國國家標準 GB 19489-2004實驗室 生物安全通用要求一、實驗室生物安全防護分級 一級生物安全防護實驗室，簡稱一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL1BSL1或或P1P1 二級生物安全防護實驗室，簡稱二級生物安全防護實驗室，簡稱BSL2BSL2或或P2P2 三級生物安全防護

4、實驗室，簡稱三級生物安全防護實驗室，簡稱BSL3BSL3或或P3P3 四級生物安全防護實驗室，簡稱四級生物安全防護實驗室，簡稱BSL4BSL4或或P4P4一級生物安全防護實驗室 實驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對健康成年人已知無致病對健康成年人已知無致病作用作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等。二級生物安全防護實驗室 實驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對人或環境具有中等潛在對人或環境具有中等潛在危害危害的微生物。三級生物安全防護實驗室 實驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預防

5、傳染的疫苗。 艾滋病毒的研究（血清學實驗室除外）應在三級生物安全防護實驗室中進行。 四級生物安全防護實驗室 實驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對人體具有高度的危險性，對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素微生物及其毒素。二、二級生物安全防護實驗室二、二級生物安全防護實驗室安全設備和個體防護安全設備和個體防護可能產生致病微生物氣溶膠或出現濺出的操作均應在生物安全可能產生致病微生物氣溶膠或出現濺出的操作均應在生物安全柜柜(級級生物安全柜生物安全柜為宜為

6、宜)或其他物理抑制設備中進行，并使用或其他物理抑制設備中進行，并使用個體防護設備。個體防護設備。處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜(級生級生物安全柜為宜物安全柜為宜)或其他物理抑制設備中進行，并使用個體防護或其他物理抑制設備中進行，并使用個體防護設備。設備。上述材料的離心操作如果使用密封的離心機轉子或安全離心杯，上述材料的離心操作如果使用密封的離心機轉子或安全離心杯，且它們只在生物安全柜中開閉和裝載感染性材料，則可在實驗且它們只在生物安全柜中開閉和裝載感染性材料，則可在實驗室中進行。室中進行。1. 當微生物的操作不可能在生物安全柜內進行

7、而必須采取外部操當微生物的操作不可能在生物安全柜內進行而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置裝置(護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設備備)。4 . 在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服。離開實在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內。不得穿驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內。不得穿著外出，更不能攜帶回家。用過的工作服應先在實著外出，更不能攜帶回家。用過的工作服應先在實驗室中消毒，然后統一洗滌或丟棄。驗室

8、中消毒，然后統一洗滌或丟棄。5. 當手可能接觸感染材料、污染的表面或設備時應戴當手可能接觸感染材料、污染的表面或設備時應戴手套。如可能發生感染性材料的溢出或濺出，宜戴手套。如可能發生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。用。三、實驗室設計和建造的特殊要求每個實驗室應設洗手池，宜設置在靠近出口處。每個實驗室應設洗手池，宜設置在靠近出口處。實驗室圍護結構內表面應易于清潔。地面應防滑、無縫隙。實驗室圍護結構內表面應易于清潔。地面應防

9、滑、無縫隙。實驗臺表面應不透水，耐腐蝕、耐熱。實驗臺表面應不透水，耐腐蝕、耐熱。實驗室中的家具應牢固。為易于清潔，各種家具和設備之實驗室中的家具應牢固。為易于清潔，各種家具和設備之間應保持一定間隙。應有專門放置生物廢棄物容器的臺間應保持一定間隙。應有專門放置生物廢棄物容器的臺(架架)。實驗室應有可開啟的窗戶，應設置紗窗。實驗室應有可開啟的窗戶，應設置紗窗。在實驗室所在的建筑內應高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和在實驗室所在的建筑內應高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，以保證符合要求。驗證，以保證符合要求。應設置洗眼設施，必要時應有應急噴淋裝置。應設置洗眼設施，必要時應有應急噴淋裝置。實驗室門宜帶鎖、可

10、自動關閉，門有可視窗。實驗室門宜帶鎖、可自動關閉，門有可視窗。實驗室出口應有在黑暗中可明確辨識的標識。實驗室出口應有在黑暗中可明確辨識的標識。1. 應通風，如使用窗戶自然通風，應有防蟲紗窗。應通風，如使用窗戶自然通風，應有防蟲紗窗。二級生物安全防護實驗室操作要點實驗室人口須貼上生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、負責人姓名和電話、進人實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序；禁止非工作人員進人實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經實驗室負責人批準后方可進入；禁止在工作區飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物；接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手；以移液器吸取液體，禁止口吸

11、；制定尖銳器具的安全操作規程； 按照實驗室安全規程操作，降低濺出和氣溶膠的產生；1每天至少消毒一次工作臺面，活性物質濺出后要隨時消毒；9. 所有培養物、廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活，如高壓滅活。需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內儲存、運輸及消毒滅菌；10.如有條件工作人員應接受必要的免疫接種 (如卡介苗等)；11.必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據需要定期收集血清樣本，應有檢測報告，如有問題及時處理；12.將生物安全程序納入標準操作規范或生物安全手冊，由實驗室負責人專門保管，工作人員在進入實驗室之前要閱讀規范并按照規范要求操作；13.工作人員要接受有關的潛

12、在危險知識的培訓，掌握預防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓；14.實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒；15.人員暴露于病毒時，及時向實驗室負責人匯報并記錄。安全管理制度 實驗室內務管理制度 尖銳器具安全使用制度 實驗室消毒防護制度 標本采集運輸制度 廢棄物處理制度 工作人員防護制度 差錯事故處理制度尖銳器具安全使用制度除特殊情況外，禁止在實驗室使用針、注射器及其他利器。盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。盡可能應用一次性注射器，用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽、從注射器取下，禁止用手直接操作。用過的針頭必須直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到

13、特定區域消毒，最好進行高壓消毒。盡可能使用無針注射器和其他安全裝置。禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須消毒。四、為何需使用生物安全柜?考慮對操作人員，操作樣品，操作環境的保護。美國國家衛生研究院NIH標準與美國國家疾病控制中心CDC實驗室生物安全級別標準中要求：應用于臨床、診斷、教學、研究、或者生產設施，開展有關內源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入該病源, 會引發嚴重的、可能致死的疾病。需使用ClassII級生物安全柜實驗人員受過專業訓練應有管道化的排氣系統，排出的空氣不再循環至建筑物內的任何其他區域。 1. 建議生物安全柜每年經過測試和確證 生物安

14、全設備分類 1.超凈臺 2.抽風櫥 3. CLASS I 一級生物安全柜 4.CLASS II 二級生物安全柜 5. CALSS III三級生物安全柜（又稱手套柜）1、超凈臺 正壓柜 氣流從頂部或底部經過過濾器后從操作區正面流向工作臺面，被樣品污染的氣流排出柜外，沒有循環氣流。 超凈臺保護樣品不受污染，適用于普通實驗室適用于普通實驗室或或1 1級生物安全水平中級生物安全水平中對對人員和環境無保護要求人員和環境無保護要求的實驗的實驗。 2、CLASS I一級生物安全柜負壓柜氣流經操作人員向內進入工作臺面，被污染的氣流通過HEPA過濾器外排出柜外，沒有循環氣流。CLASS I級BSC保護操作人員和

15、環境不受污染，適用于適用于生物安全水平中生物安全水平中對實驗樣品對實驗樣品無保護要求的實驗。無保護要求的實驗。 3、CLASS II 二級生物安全柜 層流負壓柜 它們可以安全的保護樣品、人員和環境它們可以安全的保護樣品、人員和環境。 II 級生物安全柜分為A型（30%排在室內 ）和 B型； B型中又分為B1 （70%接管道外排） 、 B2 （100%接管道外排） 、 B3 （30% 接管道外排） 。 CLASS II A生物安全柜（1）進入氣流最低流速平均為0.38米/秒)；（2）30%30%氣流氣流經經HEPAHEPA過濾后外過濾后外排在室內排在室內；（3）被污染的管道和氣流通道為正壓狀態生

16、物安全柜空氣流向 CLASS II B1生物安全柜（1）進入的氣流最低流速平均為0.5米/秒；（2）70%70%氣流通過專用的管道氣流通過專用的管道經經HEPAHEPA過濾后接管道外排至室過濾后接管道外排至室外外；（3）所有受生物污染的管道和氣流通道均在負壓狀態下或被負壓的管道或氣流通道包圍。CLASS II B2生物安全柜（1）進入氣流最低流速平均為0.5米/秒；（2）所有向內進入的氣流和向下的氣流均通過HEPA過濾后排到室外而不在柜內循環，也不能排入實驗室；100%100%接管道外排接管道外排。（3）所有的被污染的管道和氣流通道都在負壓狀態下或被直接外排的負 壓管道或氣流管道所包圍。CLA

17、SS II B3生物安全柜（1）進入的氣流最低流速為0.5米/秒；（2）外排到室外的氣流（外排到室外的氣流（30%30%）經過經過HEPAHEPA高效過濾；高效過濾；（3）所有經生物污染的管道和氣流通道均為負壓狀態；（4）與CLASS II A型氣流方向相同，但與CLASS A型不同的是，它30%30%外排氣是接管道外排氣是接管道排到室外的排到室外的。 II級生物安全柜Airflow 4. CLASS III生物安全柜（手套柜）全封閉的、氣密結構的通風柜；通過橡膠手套進行操作；柜內保持至少120Pa的負壓；供氣通過HEPA抽入內；外排的氣流經過雙層雙層HEPA過濾或經 HEPA后再經燃燒處理。

18、 CLASS III 型BSC適用于BSL3、BSL4的生物實驗。 高效空氣高效空氣過濾過濾工作人員工作人員安全安全無渦流單無渦流單向流空氣向流空氣實驗對象實驗對象不受污染不受污染手套箱式手套箱式操作口操作口抽風櫥抽風櫥無無是是是是否否否否I級級有有是是否否否否否否II級級有有是是是是是是否否III級級有有是是是是是是是是生物安全裝置異同級、級、級和級和級生物安全柜的區別級生物安全柜的區別BSC表面風速表面風速（m/s）%氣流氣流在循環在循環 排除排除排風系統排風系統級級0.36 0 100硬管道硬管道級級A1型型0.38-0.51 70 30派到室內或套派到室內或套管式的連接管式的連接向室外

19、排風的向室外排風的級級A2型型0.51 70 30派到室外或套派到室外或套管式的連接管式的連接級級B1型型0.51 30 70硬管道硬管道級級B2型型0.51 0 100硬管道硬管道級型級型NA 0 100硬管道硬管道根據保護類型的需要選擇適宜的生物安全柜根據保護類型的需要選擇適宜的生物安全柜保護類型保護類型BSCBSC的選擇的選擇針對危險組針對危險組1-31-3微生物的人員保護微生物的人員保護級、級、級、級、級級針對危險組針對危險組4 4微生物的人員保護，手套箱實驗室微生物的人員保護，手套箱實驗室級級針對危險組針對危險組1-31-3微生物的人員保護微生物的人員保護, ,防護服實驗室防護服實驗

20、室級、級、級級產品保護產品保護級級, ,僅當涉及層流時用僅當涉及層流時用級級針對微量的不穩定的放射性核針對微量的不穩定的放射性核/ /化學藥品的保護化學藥品的保護級級B1,B1,向室外排風的向室外排風的級級A2A2針對不穩定的放射性核針對不穩定的放射性核/ /化學藥品的保護化學藥品的保護級、級、級級B2B2，級級對各級生物安全水平實驗室的要求對各級生物安全水平實驗室的要求生物安全柜生物安全柜生物安全級別生物安全級別一級一級二級二級三級三級四級四級級級不需要不需要隨意隨意需要需要不需要不需要級級不需要不需要最好有最好有需要需要需要，在防護服實驗室中需要，在防護服實驗室中使用使用級級不需要不需要不需要不需要最好有最好有需要，在安全柜室使用需要，在安全柜室使用五、廢棄物處理 國務院醫療廢