1、開課學院、試驗室 城環學院市政與環境工程試驗爭辯中心 試驗時間 ： 年 月 日課程名稱 試驗項目名 稱 試驗項目類型驗證演示綜合設計其他指導老師成 績 一、試驗目的1. 學習使用血球計數板進行微生物計數的方法。2. 生疏活性污泥中常見的微生物，后生動物的形態及菌膠團的外形色澤3. 生疏水中常見藻類。二、試驗原理顯微鏡直接計數法就是利用血球計數板在顯微鏡下直接計數，其原理是：將經過適當稀釋的菌懸液放在血球計數板載玻片與蓋玻片之間的計數室中，在顯微鏡下進行計數由于計數室的容積是肯定的 （0.1mm2）， 所以可以依據在顯微鏡下觀看到的微生物數目來換算 成單位體積內的微生物總數目。血球計數板通常是一

2、塊特制的載玻片（如圖3-1)，其上由四條槽構成三個平臺，中間的平臺又被一短橫槽隔成兩半，每一邊的平臺上各刻有一個 方格網 （如圖3-2 ），方格網中間是邊長為 1皿的計數室，當蓋上蓋玻片后，載玻片與蓋玻片之間的高度為0.1mm，這樣就形成一 圖3-1 a. 正面圖 b. 側面圖0.1mm3 的計數室個體積為0.1mm3 的計數室。 。 計數室的刻度一般有兩種規格：一種是一個大方格分成25個中方格，而每個中方格又分成 16個小方格 （如圖3-3A），另一種是一個大方格分成16個中方格，而每個中方格 又分成25 個小方格（如圖3-3B)。但無論是哪種規格的計數板，每一個大方格中的小方格數是相同的，

3、即16X25=400小方格。計數時如接受16中方格X25小方格的計數板時，就按對角線方位數取左上、左下、 右上、右下的四個中方格內的菌數。假如是25中方格X16小方格的計數板，除數取上述 四個中方格外，還須數取其中心的一中方格的菌數位于中方格線上的菌體，一般只計此中格的上方及右方格線上的菌體。16 中方格 X25 小方格計數板：菌數 （個毫升） =4 個中方格中總菌數 X16X101OOOX 稀釋倍數4 25 中方格x16小方格計數板：菌數 （個毫升） = 5 個中方格內總菌數 X25XlOXlOOOX 稀釋倍數5圖3-2 圖3-3三、使用儀器、材料四、試驗步驟（一） 微生物計數1.在加樣前，

4、先對計數板的計數室進行鏡檢。若有污物，則需清洗后才能進行計數。2.本試驗以酵母菌液為樣品。將酵母菌液搖勻，用無菌的細口滴管吸取少許，放一滴在血球計數室上，輕輕蓋上蓋玻片，不能有氣泡，不能讓多余的菌液頂起，多余的菌液讓其自然溢出。3.將血球計數板置于顯微鏡載物臺上，先用低倍鏡觀看全貌，找到計數室所在位置，然后換成高倍鏡進行計數。假如酵母出芽，芽體太小達到母細胞的一半時，即作兩個菌體計數。4.計數時若發覺菌液太濃或太稀 ，需重新調整稀釋度后再計數，一般樣品釋釋度要求每個中方格內有 20 個左右菌體為好，登記稀釋倍數，以供計算。5.參考前面的計數公式，計數菌數。6.計數完畢，血球計數板要馬上清洗潔凈

5、，并用吸水紙吸干，最終用擦鏡紙擦潔凈并放回盒內。（二）活性污泥的觀看在生物法處理廢水中，對曝氣池活性污泥的觀看是廢水處理過程中最常用的檢驗手段 之一。通過對活性污泥中微形動物（原生動物、后生動物）及菌膠團的觀看，能準時了解處理請況，以利于準時實行補救措施。1. 取活性污泥法曝氣池混合液一小滴，放在潔凈的載玻片中心。2. 當心地用潔凈的蓋玻片掩蓋，掩蓋后片內不能有氣泡形成。3. 將制備好的標本片放在載物臺上，先用低倍鏡觀看污泥中菌膠團的外形、色澤等，然后用高倍鏡觀看污泥中的微形動物，并畫出形態草圖。（三） 藻類的觀看藻類常消滅在廢水處理的氧化塘中，在給水水源中也經常大量消滅。1. 用吸管吸少許含有藻類的水樣，放一滴在載玻片中心，蓋上蓋玻片（片內不能有氣泡形成） 即成。2. 將制備好的標本片放