1、氧化還原平衡失衡與頸動脈粥樣硬化         10-09-06 15:40:00     編輯：studa20                    作者：吳彧 王麗霞 韓躍剛 原芳 盧建敏 【摘要】  目的 探討氧化還原平衡失衡與頸動脈粥樣硬化的關系。方

2、法 高分辨超聲技術檢測頸動脈內膜厚度，以顯示頸動脈粥樣硬化的發(fā)展程度，并將102例擬診頸動脈粥樣硬化患者分為：頸動脈斑塊形成組46例，頸動脈內膜中層增厚組32例，頸動脈內膜中層厚度正常組24例。取靜脈血，測血漿還原型谷胱甘肽（GSH）與氧化型谷胱甘肽（GSSG），還原型輔酶（NADPH）與氧型輔酶（NADP+），氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）和丙二醛（MDA）濃度。計算GSH/GSSG，NADPH/NADP+的氧化還原電位。結果 隨頸動脈內膜增厚(從IMT正常組組到動脈斑塊組)，GSH（mol/L）(IMT正常組：7.39±1.03，IMT增厚組：6.54±0.94，動脈

3、斑塊組:5.49±0.86)、GSH/GSSG(IMT正常組:12.12±1.83,IMT增厚組：8.60±1.47，動脈斑塊組：7.22±1.18)漸次減低， GSSG（mol/L）（IMT正常組：0.62±0.03，IMT增厚組：0.68±0.04,動脈斑塊組：0.77±0.05）、GSH/GSSG氧化還原電位（mV）（IMT正常組：-145.4±3.4，IMT增厚組：-140.2±3.1，動脈斑塊組：-136.2±2.3）漸次升高（P0.05），向氧化方向明顯偏移；NADPH、NADPH/

4、NADP+氧化還原平衡亦顯示出與GSH、GSSG類似但較弱的變化；氧化應激損傷產物oxLDL（g/L）（IMT正常組：557.3±174.8，IMT增厚組：762.9±203.5，動脈斑塊組：916.9±237.4）、MDA（mol/L）（IMT正常組：6.27±1.52，IMT增厚組：9.86±1.97，動脈斑塊組：12.61±2.33）隨頸動脈內膜增厚明顯增加（P0.05）。結論 氧化還原平衡失衡、向氧化方向偏移與頸動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展可能有內在聯(lián)系。 【關鍵詞】  動脈粥樣硬化；氧化還原平衡；谷胱甘肽；輔酶；氧化型

5、低密度脂蛋白頸動脈粥樣硬化實際上是一種頸動脈內膜慢性炎癥性疾病1。在頸動脈粥樣硬化發(fā)病的諸多危險因子中，如膽固醇異常升高、高血壓、糖尿病、吸煙、高同型半胱氨酸血癥等，在分子水平的損傷機制中都有氧化應激的參與。氧化應激通過引起脂質過氧化，內皮細胞、巨噬細胞、平滑肌細胞的氧化損傷進而促進頸動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展2。但機體對于氧化應激又有著非常強大的防御、拮抗機制，兩者的平衡構成了機體內環(huán)境的一個重要穩(wěn)態(tài)機制，被稱為氧化還原平衡 3。本研究對擬診頸動脈粥樣硬化患者血漿的氧化還原平衡進行了監(jiān)測，并同步進行頸部血管超聲檢查，確定頸動脈內膜厚度及粥樣斑塊的形成面積，探討血漿的氧化還原平衡是否與頸動脈內膜的

6、增厚及粥樣斑塊的形成有相關性。1  資料與方法1.1  對象 所有研究對象為2008年3月至2009年9月在河南省人民醫(yī)院心內科的住院擬診頸動脈粥樣硬化患者，共102例，男57例，女45例，年齡3982歲，平均（58.6±14.9）歲。排除嚴重肝、腎疾病，內分泌代謝疾病，結締組織疾病和腫瘤。患者行頸部血管超聲檢查，按內膜中層厚度或斑塊形成分為三組，頸動脈斑塊形成組46例，頸動脈內膜中層厚度（IMT）增厚組32例，IMT正常組24例。1.2 方法采用SONO5500型彩色超聲心動圖儀，行兩側頸動脈檢查，由固定專人測定，探頭頻率7.5 MHz。患者仰臥位，先

7、從鎖骨的內側端橫向掃查頸總動脈，然后將探頭沿其行走方向向頭側移位，跨過分叉部，分別檢測患者雙側頸總動脈、頸動脈分叉部、頸內動脈起始處、頸外動脈，檢查內容包括：IMT，有無斑塊形成及斑塊形態(tài)、大小、范圍、軟硬度。IMT1.0 mm為正常，1.01.3 mm為IMT增厚，以內膜局限性突出管腔、內膜厚度1.3 mm為頸動脈斑塊形成。取研究對象清晨空腹靜脈血3 ml，放入預冷肝素（187.5 U/0.3 ml）抗凝管中，試管放在冰水混合物中保存，1 h內低溫（4）5 000 r/min,離心3 min，取500 l血漿超低溫（-30）保存在不銹鋼潔凈（EP）管中，備測還原型輔酶（NADPH）和氧化型輔

8、酶（NADP+）。另取750 l血漿加入10%偏磷酸750 l，低溫（4）5 000 r/min，離心15 min，取上清液500 l，超低溫（-30）保存在EP管中，備測還原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）。其余血漿用以測定氧化應激產物：氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）和丙二醛（MDA）。oxLDL用ELISA法測定（試劑盒由上海榮盛生物有限公司提供），MDA用硫代巴比妥法檢測（試劑盒由南京建成生物工程研究所提供），所有測定步驟均按說明書嚴格執(zhí)行。GSH和GSSG樣品的測定均按熒光光度法進行4（試劑盒由南京建成生物工程研究所提供）。GSH/GSSG氧化還原電位的計算按Nernst方程5：Eh=Eo+RT/2F ln(GSSG)/(GSH)2其中，R為氣體常數(shù)；F為法拉第常數(shù)；E0為GSHGSSH的標準電位值，以血液pH7.4時，標準E0為-264 mV。NADPH和NADP+樣品的測定也按熒光光度法進行4。NADP+和NADPH氧化還原電位的計算同上均按Nernst方程Eh = Eo+ RT/2F In(NADP+)/(NADPH) 5。1.3  統(tǒng)計學分析 采用SPSS12.0統(tǒng)計分析軟件包進行統(tǒng)計分析，計量資料以x±s表示，組間比較采用方差分析，兩組比較用q檢驗。2  結 果2.1